Un test métrique pour évaluer la mémoire de travail spatiale chez les rats adultes après une lésion cérébrale traumatique

Les lésions cérébrales traumatiques sont généralement associées à des troubles de la mémoire. Ici, nous présentons un protocole pour évaluer la mémoire de travail spatiale après une lésion cérébrale traumatique, via une tâche métrique. Les principaux avantages des tâches métriques comprennent la possibilité d’une observation dynamique, une reproductibilité à faible coût, une relative facilité de mise en œuvre et un environnement à faible stress.

Pour évaluer le score de gravité neurologique après une blessure par percussion paragiteuse, placez le rat Sprague Dawley adulte au centre d’un cercle de 50 centimètres de diamètre, trois fois et surveillez sa capacité à sortir du cercle. Pour tester une perte du réflexe de redressement, placez l’animal sur le dos dans la paume de la main et donnez un score de un si le rat est capable de se redresser. Pour tester l’hémiplégie, évaluez l’incapacité du rat à résister au positionnement forcé.

Pour tester la flexion réflexive du membre postérieur, soulevez l’animal par sa queue. Pour tester la capacité de marcher droit, placez le rat sur le sol. Pour tester le réflexe du pavillon, effectuez une stimulation tactile légère pour observer la rétraction de l’oreille.

Pour tester le réflexe cornéen, appliquez légèrement un bâton doux sur l’œil et mesurez la réponse au clignement des yeux. Pour tester le réflexe de sursast, faites glisser un stylo sur le dessus de la cage métallique et enregistrez la réponse de l’animal. Pour évaluer la perte de comportement de recherche dans la prostration, placez le rat dans un nouvel environnement et observez si le rat bouge ses moustaches, renifle ou court.

Ensuite, testez les réflexes des membres pour les placer sur les membres antérieurs gauche et droit, suivis des membres postérieurs gauche et droit. Pour tester l’équilibre, effectuez une tâche d’équilibrage de faisceau en plaçant le rat sur un faisceau de 1,5 centimètre de large, pour une session de 20, 40 et plus que la deuxième. Ensuite, exécutez un test de marche de faisceau en utilisant trois faisceaux de largeurs différentes.

Avant d’effectuer la tâche métrique, placez une plate-forme circulaire noire de 200 centimètres de diamètre, d’un centimètre d’épaisseur sur une table de 80 centimètres de haut et placez deux objets au centre de la plate-forme, espacés de 68 centimètres. Installez une caméra avec le logiciel informatique requis pour capturer, enregistrer et traiter les données, à une hauteur de 290 centimètres du sol. Un jour avant l’analyse, placez le rat sur la plate-forme pendant 10 minutes pour habituer l’animal au nouvel environnement.

Le jour de la tâche, placez le rat au bout de la plate-forme, à égale distance des objets pendant une période d’accoutumabilité de 15 minutes et commencez à enregistrer. À la fin de la période d’accoutumant expérimentale, transférez le rat dans une cage individuelle pendant cinq minutes et nettoyez la plate-forme avec cinq à dix pour cent d’alcool. Réduisez la distance entre les objets à 34 centimètres, puis placez le rat sur la plate-forme pendant cinq minutes tout en enregistrant son activité d’exploration.

Nettoyez à nouveau la plate-forme avant de passer à l’animal suivant. Avant d’analyser les fichiers vidéo, insérez la clé matérielle logicielle, puis démarrez le logiciel de suivi vidéo et ouvrez le modèle prédéfini. Après avoir vérifié, dupliqué et renommé les paramètres de contrôle et de détection de l’essai en arène dans le champ de vision principal, cliquez avec le bouton droit de la souris pour sélectionner saisir l’arrière-plan.

Dans le menu Parcourir, sélectionnez l’emplacement du fichier vidéo à utiliser comme image d’arrière-plan. Capturez l’image et marquez les zones étudiées et les zones pour calibrer l’image à des fins d’analyse. Effectuez la même configuration pour les paramètres de contrôle et de détection de la version d’évaluation.

Après avoir téléchargé la liste des fichiers vidéo à analyser à partir de la liste d’essai, ajoutez les vidéos et indiquez l’emplacement avec les paramètres requis. Sélectionnez ensuite l’acquisition et démarrez la version d’évaluation et exportez toutes les données dans une feuille de calcul. Le groupe témoin ne présente aucun déficit neurologique, 48 heures après la blessure simulée.

Après un TCC, les déficits neurologiques sont significativement plus importants chez les animaux blessés mâles et femelles. Au cours de la tâche métrique, le temps d’exploration de l’objet est significativement plus court pour les rats TBI mâles que pour les rats mâles opérés par simulacre. Le même schéma est observé pour les TCC femelles et les rats femelles opérés par simulacre.

Après la tâche métrique, nous pouvons effectuer d’autres méthodes d’évaluation de la mémoire, telles que le labyrinthe de Barnes et les tâches topologiques et de labyrinthe d’eau. La tâche métrique permet également d’approfondir les recherches sur les troubles de la mémoire dans des modèles comparables de dommages neurologiques, tels que des modèles de lésions cérébrales axonales diffuses et d’accidents vasculaires cérébraux.