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DOI: 10.3791/62599-v
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Ce protocole décrit la formation de cellules imitant les vésicules unilipidiques et multilipidiques, les bicouches lipidiques soutenues et les bicouches lipidiques en suspension. Ces modèles in vitro peuvent être adaptés pour incorporer une variété de types de lipides et peuvent être utilisés pour étudier diverses interactions entre molécules et macromolécules.
La construction des membranes bicouches lipidiques décrites dans ce protocole peut être utilisée pour obtenir des informations cruciales sur les interactions membranaires avec les agents pharmaceutiques, les toxiques environnementaux et même les composés biologiques. Ces techniques peuvent être utilisées pour fabriquer des membranes de complexité liquide variable et pour évaluer la perméabilité, l’absorption et l’incorporation des composés dans les membranes. Pour commencer, ajoutez le volume approprié de solution mère lipidique dans un verre propre vile pour obtenir une concentration finale de vésicules de 2,5 milligrammes par millilitre après réhydratation.
Éliminer le chloroforme de la solution lipidique à l’aide d’un flux d’azote gazeux. Pour assurer l’élimination complète du chloroforme, connectez le film lipidique séché au vide pendant au moins quatre heures. Réhydrater le film lipidique séché avec un volume requis de tampon de chlorure de sodium Tris pour obtenir la concentration finale de vésicules de 2,5 milligrammes par millilitre, et vortex pendant environ 15 à 30 secondes.
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