Visualisation de la dynamique des microtubules plus-end dans le modèle de la maladie de Huntington basé sur les fibroblastes de la peau primaire humaine

La maladie de Huntington, MH, est une pathologie neurodégénérative incurable causée par une mutation d’un gène codant pour la protéine huntingtine. La huntingtine est principalement associée aux vésicules et aux microtubules, et probablement impliquée dans les processus de transport dépendants des microtubules. Pour étudier l’influence de la huntingtine mutante sur le dynamisme des microtubules, nous avons utilisé la visualisation in vivo de la protéine EB3, qui régule les propriétés dynamiques des microtubules en pliant et en stabilisant les extrémités positives en croissance.

Pour charger de l’EB3 marqué par fluorescence dans des fibroblastes de peau humaine, nous avons appliqué une transfection de plasmides. Nous avons utilisé la culture primaire de fibroblastes pour obtenir à partir de la biopsie cutanée du patient EB3 pour cette étude. Administrer la biopsie au laboratoire en quelques heures en milieu DMEM, complétée par 15 microgrammes par millilitre de pénicilline et 50 unités par millilitre de streptomycine.