Méthode simple modifiée pour l’induction d’un infarctus du myocarde chez la souris
3 décembre 2021
Sous anesthésie adéquate, le cœur de la souris a été extériorisé par l’espace intercostal, et l’infarctus du myocarde a été induit avec succès en ligaturant l’artère descendante antérieure gauche (LAD) à l’aide de matériaux facilement disponibles dans la plupart des laboratoires.
Ce rapport présente une approche unique pour l’induction de l’infarctus du myocarde chez la souris. La méthode actuelle est simple, permet de gagner du temps et utilise les tubes chirurgicaux et l’équipement que l’on trouve facilement dans la plupart des laboratoires. L’établissement de modèles d’infarctus du myocarde fournit une prémisse pour étudier les mécanismes passés du remodelage post-IM et la variation de nouvelles thérapies.
Appliquez la crème dépilatoire sur la poitrine de la souris et attendez une minute. Essuyez ensuite délicatement la crème dépilatoire et les cheveux avec de la gaze humide. Fixez la souris sur une plate-forme chirurgicale en position couchée sur le dos.
Désinfectez la zone chirurgicale comme décrit dans le texte. Placez ensuite un champ stérile autour de la zone désinfectée. Faites une incision cutanée de 0,5 centimètre le long de la ligne reliant le xiphoïde et l’aisselle, et séparez carrément les muscles pectoraux majeurs et pectoraux mineurs à l’aide de pinces.
Ouvrez le quatrième espace intercostal à l’aide d’un hémostat Micro-Mosquito. Extériorisez le cœur en le poussant vers le quatrième espace intercostal avec l’index de la main gauche. Fixez le cœur avec la main gauche et ligaturez la branche descendante antérieure gauche avec une suture 6/0 à trois millimètres de son origine.
Replacez rapidement le cœur dans la cavité thoracique. Évacuez l’air de la cavité thoracique en appuyant doucement sur la cavité thoracique. Pour la gestion de la douleur postopératoire, injectez de la buprénorphine par voie sous-cutanée toutes les quatre à six heures jusqu’à soixante-douze heures après la chirurgie.
Placez la souris sur un coussin chauffant pour récupérer de l’anesthésie. Fixez la souris euthanasiée sur la plate-forme chirurgicale en position couchée. Faites une incision ventrale d’environ trois à quatre centimètres dans la partie supérieure de l’abdomen.
Coupez les côtes des deux côtés de la cavité thorax, puis retirez le diaphragme. Perfuser le cœur avec 10 millilitres de PBS froid à quatre degrés Celsius 1X par injection intraventriculaire. Ensuite, collectez le cœur en coupant la racine aortique et en le stockant immédiatement à moins 80 degrés Celsius.
Coupez le cœur congelé en sections d’un millimètre d’épaisseur sur de la glace à l’aide de lames de rasoir. Incuber les tranches de cœur préparées dans une solution à 1 % TTC dissoute dans un PBS 1X à 37 degrés Celsius pendant 10 à 15 minutes. Photographiez ensuite les tranches à l’aide d’un appareil photo numérique.
Après la ligature de l’artère coronaire, l’analyse de coloration TTC a indiqué une induction réussie de l’infarctus du myocarde et des changements temporels de la taille de la cicatrice post-IM. Les résultats de l’analyse de survie ont montré une mortalité manifeste dans les sept jours suivant l’infarctus du myocarde chez les souris mâles et femelles C57BL/6J. La rupture ventriculaire était une cause fréquente de décès après l’IM.
L’évaluation échocardiographique post-IM a démontré l’induction réussie d’un dysfonctionnement contractile et d’un remodelage ventriculaire. Lorsque vous essayez d’extérioriser le cœur, n’appuyez pas d’abord sur la cavité thoracique et, en suivant notre résistance, indique un besoin d’ajuster la direction par rapport à la louange pondérée. À la suite de cette procédure, une injection intramyocardique de vecteurs ou de cellules virales peut être réalisée pour tester l’efficacité des thérapies géniques ou des thérapies cellulaires en matière de maladies cardiaques.
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Aperçu
Cet article présente une méthode pour induire un infarctus du myocarde chez la souris, en utilisant du matériel chirurgical facilement disponible. La technique permet l'étude du remodelage post-MI et l'évaluation de nouvelles thérapies.
Composantes clés de l'étude
Domaine de la science
- Recherche cardiovasculaire
- Modèles d'infarctus du myocarde
- Techniques chirurgicales dans les études sur les animaux
Contexte
- L'infarctus du myocarde est un domaine d'étude critique dans la recherche cardiovasculaire.
- Comprendre le remodelage post-MI est essentiel pour développer de nouveaux traitements.
- Les méthodes existantes peuvent être complexes ou nécessiter un équipement spécialisé.
- Cette étude vise à simplifier le processus en utilisant du matériel de laboratoire courant.
Objectif de l'étude
- Établir un modèle fiable d'infarctus du myocarde chez la souris.
- Faciliter la recherche sur le remodelage cardiaque post-MI.
- Permettre le test des thérapies géniques et cellulaires dans les maladies cardiaques.
Méthodes utilisées
- Application de crème dépilatoire pour la préparation chirurgicale.
- Extériorisation du cœur par l'espace intercostal.
- Ligature de l'artère coronaire antérieure descendante.
- Soins post-opératoires et évaluation de l'infarctus du myocarde.
Principaux résultats
- L'induction réussie de l'infarctus du myocarde a été confirmée par coloration TTC.
- Les taux de mortalité ont été observés dans les sept jours après l'infarctus du myocarde.
- Un dysfonctionnement contractile et un remodelage ventriculaire ont été documentés.
- La méthode permet des interventions thérapeutiques ultérieures.
Conclusions
- La méthode décrite est efficace et reproductible pour induire un infarctus du myocarde chez la souris.
- Elle fournit une plateforme pour des recherches supplémentaires sur les thérapies cardiaques.
- Les études futures peuvent s'appuyer sur ce modèle pour explorer diverses interventions.
Questions fréquemment posées
Executive Industry Relevance
Robust in vivo myocardial infarction (MI) models are essential for preclinical evaluation of cardiac therapeutics and mechanistic studies of post-MI remodeling. This streamlined coronary artery ligation protocol enables reproducible MI induction in mice, supporting translational research and early-stage therapeutic hypothesis testing. The method's accessibility and efficiency facilitate broader adoption across discovery and preclinical R&D portfolios.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of cardiac injury pathways and post-MI remodeling mechanisms.
- Supports functional validation of therapeutic targets in a disease-relevant in vivo context.
- Facilitates mechanistic de-risking for candidate interventions targeting cardiac repair.
Screening & Assay Development
- Provides a standardized platform for evaluating efficacy of gene or cell therapies post-MI.
- Delivers reproducible infarct size and contractile dysfunction for quantitative assessment.
- Enables downstream integration with imaging and histological assays for robust readouts.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant endpoints such as ventricular remodeling and survival analysis.
- Supports continuity from mechanistic discovery to preclinical therapeutic validation.
- Allows for assessment of intervention timing and impact on post-MI outcomes.
Pipeline & Workflow Integration
This MI induction protocol fits at the interface of early discovery and preclinical validation, enabling hypothesis-driven studies and candidate screening in a physiologically relevant model.
- Discovery Biology: Facilitates hypothesis testing on cardiac injury and repair mechanisms.
- Screening: Provides reproducible infarct induction for comparative efficacy studies.
- Analytics: Supports quantitative measurement of infarct size, contractile function, and survival.
- Translational Research: Bridges mechanistic insights to preclinical therapeutic evaluation in vivo.
- Enterprise Reuse: Offers a scalable, accessible model for diverse cardiac research programs.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in target validation and mechanistic studies.
- Operational Value: Standardizes MI induction, reducing technical variability and training burden.
- Strategic Value: Accelerates go/no-go decisions for cardiac therapeutic candidates.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of interventions targeting post-MI remodeling.
Implementation Considerations
- Requires surgical proficiency and familiarity with murine cardiac anatomy.
- Needs access to basic surgical instruments and post-operative care infrastructure.
- Demands cross-team standardization for reproducibility in multi-site studies.
- Adaptable to gene or cell therapy delivery post-ligation for intervention studies.
- Mortality and technical variability must be monitored and reported for data integrity.
