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DOI: 10.3791/63060-v
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Ici, nous décrivons une méthode de surveillance non invasive impliquant l’expression de la luciférase et de la protéine fluorescente verte dans diverses lignées cellulaires de cancer du sein. Ce protocole fournit une technique pour surveiller la formation de tumeurs et la colonisation métastatique en temps réel chez la souris.
En utilisant cet outil sophistiqué et non invasif, nous pouvons surveiller en temps réel la cinétique de croissance tumorale et la colonisation métastatique chez la souris, ce qui a un grand potentiel dans la thérapie du cancer du sein et la gestion de la maladie. La combinaison de la luciférase et de la détection par fluorescence est une stratégie utile pour faire progresser les études précliniques sur la progression du cancer du sein et la gestion de la maladie. Cela peut être appliqué pour les études de médicaments anticancéreux.
Ce protocole ne se limite pas au cancer du sein et pourrait être appliqué à d’autres carcinomes, tels que le poumon et le pancréas. Commencez par cultiver les cellules MCF-7, MDA-MB-468 et MDA-MB-231 GFP et luciférase positive séparément dans une plaque de 16 centimètres à 80% de confluence. Après avoir récolté les cellules par trypsinisation, ensemencez un nombre croissant de cellules dans chaque puits dans une plaque noire de 96 puits.
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