Une procédure pour étudier la rechute de l’héroïne induite par le stress après l’abstinence imposée par la punition

C’est la première fois que la rechute à l’héroïne induite par le stress est montrée après l’abstinence imposée par la punition. Ces méthodes pourraient nous aider à comprendre le mécanisme neuronal sous-jacent à la rechute induite par le stress chez l’homme après l’abstinence volontaire. En utilisant la privation alimentaire et l’abstinence imposée par la punition, nous imitons plus étroitement la condition humaine et apportons une validité écologique aux modèles animaux de rechute.

Commencez par régler les chambres de conditionnement opérationnelles telles que décrites dans le manuscrit. Après la récupération de la chirurgie, habituez le rat dans la chambre d’entraînement opérante pendant 24 heures avant de commencer le protocole sans attacher le rat au ressort métallique. Placez le rat logé dans les chambres opératoires tout au long de l’expérience.

Ensuite, fixez le connecteur 5up au tube Tygon et au ressort métallique. Commencez la séance d’entraînement au début de la phase sombre du cycle de lumière inversé. Pour l’auto-administration d’héroïne, le levier de prélèvement doit être disponible sous un rapport fixe un, ou FR un.

Programmez chaque essai en commençant par l’insertion du levier de prise et l’allumage de la lumière de la maison. Une fois que le rat appuie une fois sur le levier de prise, rétractez le levier de prise, allumez le voyant de repère au-dessus du levier et tonifiez pendant une période de temporisation de 20 secondes. Éteignez la lumière de la maison et permettez la livraison de 0,13 millilitre de perfusion d’héroïne à une dose de 0,1 milligramme par kilogramme.

Ensuite, programmez un intervalle intertrial de 30 secondes dans lequel aucun signal n’est présenté, la lumière de la maison est éteinte et le levier est rétracté. Pour le prochain essai, insérez le levier de prise et allumez la lumière de la maison. Pour l’auto-administration avec la chaîne de prise de recherche sous FR un, programmez le système d’entraînement opérationnel pour insérer uniquement le levier de recherche et allumez la lumière de la maison pour signaler le début de la session avec le levier de prise dans un état rétracté.

Une fois que le rat appuie une fois sur le levier de recherche, le programme rétracte le levier de recherche et insère le levier de prise. Une pression sur le levier de prise rétracte le levier de prise et lance la procédure d’allumage du voyant de repère, ainsi qu’un intervalle d’essai de 30 secondes, comme démontré précédemment. Après l’intervalle inter-essais, programmez le système d’entraînement opérationnel pour insérer le levier de recherche et allumez la lumière de la maison pour signaler le début de l’essai suivant.

Ensuite, programmez toutes les étapes de l’auto-administration avec une chaîne de prise de recherche sous le rapport fixe un, comme démontré précédemment avec l’introduction d’un intervalle variable de cinq pendant trois jours comme nouveau calendrier de renforcement sur le levier de recherche. Configurez le logiciel pour permettre à la première pression sur le levier de recherche d’activer les horaires à intervalle variable cinq. Autorisez le logiciel à sélectionner de manière aléatoire un intervalle de temps dans une liste de 0,1, cinq et 10 secondes, ce qui donne un intervalle moyen de cinq secondes.

Une fois l’intervalle sélectionné écoulé, la première pression sur le levier de recherche rétracte le levier de recherche et étend le levier de prise. Après avoir suivi les étapes pour le levier de prise, et à la fin de l’essai, entraînez le rat pendant cinq jours selon un calendrier d’intervalle variable 30 pour le lien de recherche. Pour ce faire, autorisez le logiciel à sélectionner au hasard un temps dans une liste de 15, 30 et 45 secondes pendant une moyenne de 30 secondes.

Ensuite, entraînez les rats pendant trois jours selon des horaires à intervalles variables de 60, ce qui permet au logiciel de sélectionner au hasard un temps dans une liste de 45, 60 et 75 secondes. Pour l’abstinence imposée par la punition, mener des séances de punition pendant huit jours avec une surveillance régulière pour garantir que les rats ne montrent pas de signes de douleur anormale ou de problèmes de santé. Commencez les séances de punition avec l’insertion du levier de recherche et allumez la lumière de la maison.

Programmez le système d’entraînement opérationnel de sorte qu’après avoir terminé la liaison de recherche sous intervalle variable 60, le levier de recherche se rétracte, l’éclairage de la maison est éteint et un léger choc au pied est administré au rat sur 30% des liens de recherche terminés au lieu de l’insertion du levier de prise. Le levier de prise s’étend sur les 70% restants des liens de recherche terminés comme dans l’essai régulier d’auto-administration. Après avoir programmé un intervalle inter-essais de sept minutes, réglez l’intensité du choc du pied à 0,2 milliampère et augmentez de 0,1 milliampère par jour de punition jusqu’à 1,0 milliampère.

Une fois que le rat appuie sur le levier de prise, répétez le rapport fixe une étape pour la rétraction du levier, la livraison de perfusion d’héroïne et la présentation des indices suivie d’un intervalle de sept minutes. Après le dernier jour de l’abstinence imposée par la punition, retirez les trémies de nourriture des chambres pour les rats qui subissent un test de rechute induite par la privation de nourriture et gardez les trémies de nourriture pour le groupe rassasié. Fournir un accès illimité à l’eau dans les deux groupes et surveiller la santé des animaux.

Après 24 heures de privation alimentaire, procéder à un test de recherche d’héroïne induit par la privation alimentaire de trois heures selon un calendrier à intervalle variable de 60 avec un intervalle intertrial de sept minutes sans choc ni perfusion d’héroïne. Après la séance, remettez les trémies de nourriture aux rats privés de nourriture. Le lendemain, retirez les trémies de nourriture des chambres des rats qui ont été rassasiés lors du premier test de rechute.

Permettre aux rats précédemment privés de nourriture un accès illimité à la nourriture avant et pendant le test. Après une privation alimentaire de 24 heures, effectuez un test de recherche d’héroïne de trois heures, comme démontré précédemment. Dans l’étude, les rats mâles ont démontré une augmentation des presses à levier de recherche à mesure que le calendrier de renforcement augmentait.

Un nombre fiable et constant de perfusions d’héroïne a été observé au cours des jours de formation. Pendant la punition, les rats ont diminué le nombre de presses à levier de recherche et d’infusions avec l’augmentation de l’intensité du choc du pied sur huit jours de punition. Dans le test de recherche d’héroïne, la condition de privation alimentaire a significativement augmenté la recherche d’héroïne après l’abstinence imposée par la punition, et aucun effet statistiquement significatif n’a été observé pour le temps ni pour la recherche de drogue au fil du temps dans toutes les conditions d’alimentation.

Sans cette étape, les animaux ne pourront pas avancer dans les expériences. Après avoir mis en œuvre le modèle, nous pouvons maintenant concevoir des expériences qui examinent la neurobiologie de la rechute induite par le stress après l’abstinence volontaire.