Un modèle hépatocytaire compétent examinant l’entrée du virus de l’hépatite B par le polypeptide cotransportant le taurocholate de sodium comme cible thérapeutique

Ce protocole est conçu pour vérifier si un candidat composé anti-VHB inhibe l’entrée virale, en particulier en bloquant la liaison au PNCP. Cette technique vise à déterminer si l’entrée du VHB ou une étape initiale de l’infection pourrait être interrompue par un composé candidat. La démonstration de la procédure sera Piyanoot Thongsri, un étudiant PSP de mon laboratoire.

Pour commencer la mesure du polypeptide co-transportant du taurocholate de sodium, ou NTCP, incuber les hépatocytes matures avec huit moulins ou plus d’acide éthylènediaminetétraacétique ou EDTA pendant 15 minutes. Recueillir les granulés cellulaires et fixer les hépatocytes en ajoutant 300 microlitres de paraformaldéhyde à 3,7% dans du PBS pendant 15 minutes. Ensuite, transférez la suspension cellulaire dans un tube microcentrifuge de 1,5 millilitre pour les centrifuger à 300 G et 25 degrés Celsius pendant 10 minutes.