Combinaison de la microscopie confocale à réflectance avec la tomographie par cohérence optique pour le diagnostic non invasif des cancers de la peau par acquisition d’images

Ce protocole détaille les étapes d’acquisition d’images pour les dispositifs RCM et RCM-OCT au chevet du patient. Il est essentiel d’acquérir des images de bonne qualité pour un diagnostic correct et une gestion des lésions cutanées. Ces dispositifs permettent d’imager la peau à une résolution histopathologique in vivo, ce qui permet d’éviter des biopsies bénignes inutiles tout en détectant les cancers de la peau précoces.

Le diagnostic est posé au chevet du patient, ce qui réduit le temps d’attente et l’anxiété des patients. L’imagerie avec ce microscope nous aide à guider de manière non invasive la détection et le diagnostic des lésions cutanées et des cancers de la peau chez les patients au chevet du patient. De plus, l’imagerie nous aide à trier les lésions cutanées entre celles qui peuvent être superficielles et celles qui peuvent être plus profondes, ce qui aide à orienter le traitement.

Ainsi, l’imagerie nous aide à intégrer ou à combiner le diagnostic et le traitement en une seule visite du patient, ce que l’on appelle maintenant un paradigme de soins aux patients à guichet unique. En plus d’utiliser l’imagerie pour détecter et diagnostiquer les lésions cutanées et les cancers de la peau, nous utilisons également l’imagerie pour guider la détection et le diagnostic des lésions buccales et des cancers buccaux chez les patients. Mme Ucalene Harris, une histotechnicienne de mon laboratoire, fera la démonstration de la procédure.

Pour commencer, sélectionnez le dispositif WP-RCM pour les lésions situées sur les surfaces planes de la peau, telles que le tronc et les extrémités, et le dispositif HH-RCM pour les lésions sur les surfaces courbes, comme le nez, les lobes des oreilles, les paupières et les organes génitaux. Pour l’imagerie, placez le patient sur une chaise entièrement inclinable ou une table d’examen plate avec support. Ensuite, nettoyez la lésion et la peau environnante avec une lingette imbibée d’alcool.

Ajoutez une goutte d’huile minérale au centre de la fenêtre en plastique et étalez-la soigneusement sur la largeur de la fenêtre. Retirez le livre broché du côté adhésif de la fenêtre, étirez doucement la peau et fixez la fenêtre. Pour acquérir des images à l’aide du dispositif WP-RCM, positionnez la sonde perpendiculairement à la lésion.

Obtenez ensuite des images de dermoscopie en survolant la sonde WP-RCM au-dessus du capuchon de fenêtre en plastique et en évaluant le meilleur angle d’insertion pour la sonde. Alignez la petite flèche blanche située sur le côté de la sonde avec la flèche sur le côté de la caméra de dermoscopie. Insérez la caméra de dermoscopie dans le capuchon de fenêtre en plastique.

Assurez-vous que l’image du dermatoscope couvre toute la surface de la lésion et appuyez sur la gâchette de la caméra pour obtenir une image. Retirez ensuite le dermatoscope. Ensuite, placez une quantité de gel à ultrasons de la taille d’un pois à l’intérieur du capuchon de fenêtre en plastique jetable.

Insérez la sonde RCM dans le capuchon jetable en plastique jusqu’à ce qu’un clic brusque se fasse entendre. À l’aide de l’image dermoscopie acquise à l’étape précédente, sélectionnez le centre de la lésion et identifiez la couche supérieure ou la plus brillante de la peau, qui est la couche anucléaire de la couche cornée. Définissez la profondeur d’imagerie sur zéro à ce niveau.

Appuyez sur l’icône de pile pour acquérir une pile au centre de la lésion. Dans le menu déroulant, sélectionnez un site anatomique, visage ou corps. Définissez la taille des pas à 4,5 microns et la profondeur à 250 microns.

Identifiez la jonction dermo-épidermique, ou couche DEJ dans la pile et sélectionnez un carré de 8x8 millimètres pour couvrir toute la lésion. Appuyez ensuite sur l’icône mosaïque pour acquérir la première mosaïque au DEJ. Pour acquérir des mosaïques suivantes, cliquez sur une structure sur la mosaïque DEJ pour la visualiser dans la vue en direct.

Faites défiler vers le bas à partir du DEJ pour acquérir des mosaïques au niveau du derme, puis vers le haut depuis le DEJ pour prendre des mosaïques dans l’épiderme. Capturer une pile dans chaque quadrant et une au centre de la lésion avec un motif homogène à la dermoscopie, ou acquérir des piles supplémentaires pour les lésions hétérogènes. Après avoir terminé une séance d’image, détachez le cône de protection entourant la lentille du microscope.

Nettoyez la pointe de la lentille de l’objectif avec un tampon imbibé d’alcool et séchez la lentille. Refixez le cône en plastique à la sonde du microscope. Pour générer un rapport d’évaluation diagnostique confocale, cliquez sur Nouvelle évaluation.

Entrez le diagnostic parmi les options présélectionnées dans le menu déroulant. Sélectionnez les fonctionnalités observées pendant la création d’images dans la liste de contrôle du rapport, puis sélectionnez la gestion applicable. Cliquez sur Terminer et signer.

Générez le rapport au format PDF et imprimez-le. pour acquérir des images à l’aide du dispositif HH-RCM, positionner d’abord le patient et nettoyer le site de la lésion et entourer la lésion avec un anneau en papier. Appliquez une quantité de gel à ultrasons de la taille d’un pois sur la lentille de l’objectif du HH-RCM et recouvrez-la avec le capuchon en plastique.

Ajoutez une goutte généreuse d’huile minérale sur le côté du capuchon en plastique qui touchera la peau. Appuyez la sonde sur le côté de la lésion sur la peau avec une pression ferme. Utilisez les commandes de profondeur Z de l’appareil HH-RCM pour monter et descendre à différentes profondeurs dans la lésion.

Acquérir plusieurs images et piles à image unique dans les régions d’intérêt. Pour les lésions importantes, prenez des vidéos en continu à différentes couches en déplaçant la sonde HH-RCM sur toute la surface de la lésion et en cliquant sur le symbole de capture vidéo. Enregistrer le mouvement des cellules sanguines dans les vaisseaux.

Une fois la session d’imagerie terminée, appuyez sur Done Imaging. Nettoyez la lésion avec un tampon imbibé d’alcool, retirez le gel à ultrasons de la lentille de l’objectif de la sonde et refixez le capuchon en plastique. Positionner le patient pour l’imagerie et s’assurer que la limite de la lésion est exempte de poils excessifs et d’impuretés topiques.

Après avoir préparé la sonde comme décrit dans la section précédente, cliquez sur Paramètres d’imagerie. Sélectionnez le mode Image linéaire pour acquérir une image RCM. Définissez la taille des pas sur cinq microns et le nombre de pas sur 40.

Acquérir des piles comme indiqué dans la section précédente en cliquant sur Saisir. Cliquez ensuite sur le bouton Congeler une fois terminé. Cliquez sur Paramètres d’imagerie et sélectionnez Mode raster pour acquérir une vidéo OCT corrélative pour l’architecture de la lésion.

Passez à l’onglet technicien. Une fois terminé, cliquez sur le bouton Grab et appuyez immédiatement sur le bouton Enregistrer. Grâce à ce protocole, des images RCM de haute qualité ont été acquises à des profondeurs pertinentes dans la peau.

Les artefacts tels que les bulles d’air, les débris de surface et les artefacts de mouvement qui entravent l’évaluation diagnostique doivent être évités. Sur la MCR, diverses couches cutanées ont été observées, telles que la couche cornée, composée de kératinocytes anucléés, et la couche spinosum, composée de cellules nucléées étroitement emballées avec un cytoplasme brillant créant un motif typique en nid d’abeille. Cela a été suivi par la strate basale, identifiée par le motif pavé formé par la calotte de mélanine des kératinocytes basaux.

Et le DEJ caractérisé par le motif annelé lumineux. Le derme papillaire était composé de fibres de collagène brillantes et de vaisseaux sanguins. Les images RCM pour les cancers de la peau courants, comme le carcinome basocellulaire, ont montré des nodules tumoraux avec fente et palissade.

Le carcinome épidermoïde présentait un motif atypique en nid d’abeille et des vaisseaux à la boutonnière. Et le mélanome a montré des amas de grandes cellules paguétoïdes rondes brillantes dans l’épiderme. Pour le carcinome basocellulaire, l’image RCM n’a pas été en mesure de montrer un nodule tumoral définitif.

Alors que les images RCM-OCT interprétées à la fois par les piles et les rasters montraient un nodule tumoral gris distinct connecté à l’épiderme, ainsi que des fentes et des faisceaux de collagène épaissis. Le diagnostic a été confirmé par la biopsie colorée H&E. Il est important d’acquérir des mosaïques de qualité diagnostique à partir de cinq couches de la peau avec l’imagerie WP-RCM.

Prenez une vidéo fluide et des piles à l’aide de HH-RCM, et à la fois une pile et un raster dans la même zone à l’aide du périphérique RCM-OCT.