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DOI: 10.3791/64023-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article discusses the use of microfluidic chambers in visual, single-molecule biochemistry. It emphasizes the importance of proper connections and techniques to ensure successful experiments without leaks or bubbles.
La biochimie visuelle à molécule unique étudiée à travers des chambres microfluidiques est grandement facilitée à l’aide d’un baril en verre, de seringues étanches aux gaz, de connexions stables de tubes aux cellules d’écoulement et d’élimination des bulles en plaçant des vannes de commutation entre les seringues et les tubes. Le protocole décrit deux pièges optiques qui permettent de visualiser les transactions d’ADN et les interactions intermoléculaires.
La fixation des orifices pour s’accoupler aux seringues avec des tubes est essentielle car, lorsque c’est bien fait, il n’y a pas de fuites, il n’y a pas de bulles dans la cellule d’écoulement et des expériences peuvent être effectuées à plusieurs reprises en utilisant la même cellule d’écoulement sur une période d’un an avec une utilisation prudente. Ici, deux méthodes simples seront présentées pour fixer les connecteurs aux cellules d’écoulement. Ceux-ci sont faciles, reproductibles et permettent à l’investigateur d’adapter facilement la cellule d’écoulement à ses besoins sans trop de problèmes.
L’utilisation de ces cellules d’écoulement a été faite avec des expériences de molécule unique à l’esprit. En particulier, ce que nous appelons la biochimie visuelle, mais ils peuvent être utilisés dans toute étude où la microfluidique est nécessaire et dans les situations où l’écoulement de fluide lamina doit être utilisé. Donc, pour éviter les erreurs, au lieu d’utiliser des cellules d’écoulement précieuses pour établir les techniques, je suggérerais de pratiquer d’abord sur une lame de verre ou un slip de couverture.
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