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DOI: 10.3791/64082-v
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Le protocole présente un modèle d’immunothérapie du cancer utilisant la vaccination tumorale cellulaire avec le mélanome B16-F10 exprimant Flt3L. Ce protocole démontre les procédures, y compris la préparation de cellules tumorales en culture, l’implantation tumorale, l’irradiation cellulaire, la mesure de la croissance tumorale, l’isolement des cellules immunitaires intratumorales et l’analyse par cytométrie en flux.
Ce protocole fournit un modèle clinique d’immunothérapie des tumeurs solides et une plateforme de recherche pour étudier la relation entre les cellules tumorales et les cellules immunitaires infiltrantes. Ce vaccin tumoral à base de cellules est pratique, simple à utiliser et peut être combiné avec d’autres modalités thérapeutiques telles que le blocage des points de contrôle, pour obtenir un effet additif ou synergique pouvant entraîner une immunité tumorale plus puissante et plus élevée. Ann Balancio, une technicienne de recherche de mon laboratoire, aidera à démontrer la procédure.
Pour commencer, culture de cellules de mélanome B16-F10 dans l’IMDM, contenant 10% de FBS inactif à la chaleur, 2 glutamine millimolaire, 1 pyruvate de sodium millimolaire, 1 millimolaire MEM acides aminés non essentiels et 100 unités par millilitre de pénicilline et de streptomycine. Maintenir la lignée cellulaire à 37 degrés Celsius avec 5% de dioxyde de carbone. Ensemencez et récoltez les cellules B16-F10 comme décrit dans le manuscrit textuel.
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