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DOI: 10.3791/64147-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article describes a method for isolating conditionally immortalized glomerular endothelial cells (GECs) from transgenic mice, allowing for the examination of mitochondrial structures in response to various stimuli. Utilizing high yields of GECs, the method serves as a foundation for screening potential therapies for diabetic kidney disease.
L’article décrit la méthode d’isolement des cellules endothéliales glomérulaires immortalisées conditionnellement des reins de souris transgéniques exprimant le virus simien thermolabile 40 et les mitochondries photo-activables, PhAMexcisée. Nous décrivons la procédure d’isolement des glomérules à partir de reins entiers à l’aide de billes, d’étapes de digestion, d’ensemencement et de culture de GECs-CD31 positifs.
Les cellules endothéliales glomérulaires immortalisées avec des mitochondries fluorescentes stables sont un excellent outil pour examiner l’effet de différents stimuli sur la structure mitochondriale in vitro. La méthode décrite dans le présent article produit un nombre élevé de cellules endothéliales glomérulaires. En testant de petites molécules sur un GEC, nous pourrions dépister en monothérapie pour la maladie rénale diabétique où les GEC sont affectés.
La méthode décrite est facile à réaliser et ne nécessite pas d’équipement spécifique. Cependant, il est important de suivre les étapes décrites et de stériliser l’équipement pour éviter toute contamination. Pour commencer, placez les matériaux de perfusion et d’isolement nécessaires pour isoler les cellules glomérulaires rénales sur un espace de travail.
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