In vivo Détection de perméabilité vasculaire dans la glande sous-maxillaire de souris

Le présent protocole décrit une mesure de détection de perméabilité paracellulaire in vivo pour évaluer la fonction des jonctions endothéliales serrées dans les glandes sous-maxillaires de souris. Néanmoins, la microscopie à balayage laser à deux photons présente non seulement l’avantage de la microscopie confocale conventionnelle, mais peut également être utilisée pour détecter plus clairement les tissus et les images plus profonds. Cette expérience fournit une bonne mesure méthodologique pour évaluer la perméabilité vasculaire de différents tissus, en particulier les tissus de surface et les organes des animaux.

Commencez par choisir des traceurs appropriés tels que la fluorescéine, l’isothiocyanate, le dextrane marqué et la rhodamine B, le dextrane marqué avec des spectres d’émissions d’excitation distincts, afin de minimiser l’interférence entre les signaux de fluorescence pour le test de perméabilité. Diluer les traces dans une solution saline tamponnée au phosphate stérile en 100 milligrammes par millilitre et stocker les aliquotes à l’abri de la lumière à moins 20 degrés Celsius. Après avoir anesthésié la souris mâle de type sauvage âgée de 8 à 10 semaines, tenez doucement la tête et le cou de la souris pour faire légèrement saillir un côté du globe oculaire.