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DOI: 10.3791/64243-v
Satyaghosh Maurya1, Vishwesh Haricharan Rai1, Aditya Upasani1, Saurabh Umrao1,2, Diksha Parwana1, Rahul Roy1,3
1Department of Chemical Engineering,Indian Institute of Science, 2Holonyak Micro & Nanotechnology Lab,University of Illinois, Urbana-Champaign, 3Center for BioSystems Science and Engineering,Indian Institute of Science
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ici, un protocole pour effectuer et analyser la liaison, la mobilité et l’assemblage de molécules uniques sur des membranes lipidiques artificielles encombrées à l’aide de la microscopie à fluorescence interne totale à molécule unique (smTIRF) est présenté.
Les membranes cellulaires sont très encombrées en raison de la présence de protéines et de sucres intégrés. Nous démontrons l’imagerie d’une seule molécule sur des bicouches lipidiques synthétiques encombrées. Cette plateforme est utile pour étudier l’effet de l’encombrement sur les réactions biomoléculaires membranaires, au niveau moléculaire.
Le protocole explique l’analyse de la liaison, de la diffusion et de l’assemblage de biomolécules membranaires. Le succès de l’expérience dépend d’un nettoyage rigoureux du substrat, d’éviter d’endommager la bicouche et de maintenir un rapport signal sur bruit élevé en imagerie à molécule unique. Aditya Upasani et Vishwesh Haricharan Rai, étudiants diplômés du laboratoire, font la démonstration de la procédure avec moi.
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