Mesure quantitative en temps réel de la migration et de l’invasion des cellules tumorales après une transfection d’ARNm synthétique

Ce protocole démontre que la combinaison de la transaction de l’ARN messager à sensation avec des mesures en temps réel de la migration et de l’invasion cellulaires basées sur l’impédance facilite l’identification des gènes qui stimulent la migration et l’invasion des cellules tumorales. Le système d’analyse cellulaire en temps réel basé sur l’impédance permet une surveillance quantitative, continue et complète de la migration des cellules tumorales lors des changements d’expression génique. Les gènes qui surexpriment les tumeurs et stimulent la migration des cellules tumorales peuvent être identifiés comme une cible potentielle pour inhiber les métastases dans le traitement du cancer.

Pour commencer, ajoutez 10 microlitres de tampon de réaction 10x, 1,5 microlitre de PNE One et 10 microgrammes d’ADN plasmidique dans un tube de micro-centrifugation pour linéariser l’ADN plasmidique avec l’enzyme de restriction. Ajoutez de l’eau sans nucléase pour porter le volume de réaction à 100 microlitres. Mélangez-le en le tapotant et en le faisant tourner avant d’incuber le mélange réactionnel à 37 degrés Celsius pendant la nuit.