Name: Étude du transport sur de longues distances des acides perfluoroalkyliques dans le blé au moyen d’une technique d’exposition à racines fendues (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-28T14:05:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Découvrez la technique des racines fendues pour étudier le transport à longue distance des acides perfluoroalkyliques dans le blé Triticum aestivum. Cette méthode simple permet d'observer efficacement la translocation des composés organiques.

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Nous remercions la Fondation chinoise des sciences naturelles (NSFC 21737003), le Fonds scientifique des universités chinoises (n ° 2452021103) et la Fondation chinoise des sciences postdoctorales (n ° 2021M692651, 2021M702680).

Des semences de blé, Triticum aestivum L., ont été achetées (voir le tableau des matières) et utilisées pour la présente étude.
1. Germination des semis de blé et culture hydroponique
<ol><li>Choisissez des graines de blé de taille similaire et désinfectez-les pendant 15 minutes avec une solution de peroxyde d’hydrogène à 8 % (p/p).</li>
	<li>Rincez soigneusement les graines désinfectées à l’eau désionisée, puis placez-les sur du papier filtre humide à l’obscurité à température ambiante pour germer pendant 5 jours.</li>
	<li>Sélectionner environ neuf plantules germées de taille uniforme et les transférer dans des béchers en plastique avec 250 ml de solution nutritive (1/4 de la force de la solution de Hoagland; sa composition chimique est indiquée dans le tableau 1). REMARQUE : Sur les neuf graines, trois ont été sélectionnées pour le blanc, l’APFO et le SPFO, respectivement.</li>
	<li>Cultiver les plantules dans des chambres de croissance pendant 7 jours avant l’exposition avec un cycle de 14 h à 22 °C et de 10 h à 27 °C.</li>
</ol>2. L’expérience de fractionnement des racines
<ol><li>Effectuer la culture des plants dans deux tubes à centrifuger de 50 ml (A et B). REMARQUE : Dans le tube à centrifuger A, 50 mL de solution stérile de Hoagland de concentration 1/4 était présente, et la même quantité de solution nutritive était présente dans le tube de centrifugation B.<ol><li>Dissoudre l’APFO et le SPFO commerciaux (voir le tableau des matières) dans du méthanol et les diluer avec la solution nutritive stérile comme solution mère. Ensuite, ajouter la solution mère dans le tube B à une concentration d’APFO/SPFO de 100 μg/L.</li>
		<li>Effectuer les traitements en trois exemplaires avec une commande à blanc pour surveiller la contamination de fond. Un diagramme schématique des expériences d’exposition à racines fendues est présenté à la figure 1.</li>
	</ol></li>
	<li>Séparez les racines entières du semis de blé à l’aide d’une pince à épiler en deux parties égales afin que les racines soient toujours accrochées à la même pousse et insérez-les soigneusement dans les tubes A et B, respectivement.</li>
	<li>Scellez les deux tubes avec du papier d’aluminium et cultivez-les dans un incubateur pendant 7 jours. Maintenir les mêmes conditions d’incubation que celles indiquées à l’étape 1.4.</li>
	<li>Recueillir les plants de blé après 7 jours de culture et séparer le blé en trois parties: pousses et racines cultivées dans la solution enrichie d’AAFC et la solution non enrichie, respectivement, à l’aide de ciseaux stérilisés.</li>
	<li>Lyophiliser les échantillons de plantes dans un lyophilisateur à −55 °C pendant 48 h.</li>
	<li>Homogénéiser et peser les échantillons de racines et de pousses. Recueillir les échantillons de solution enrichie et non enrichie.</li>
</ol>3. Extraction de l’APFO et du SPFO des tissus végétaux
<ol><li>Ajouter 2 mL de tampon de carbonate de sodium (0,25 mol/L), 1 mL d’hydrogénosulfate de tétrabutylammonium (0,5 mol/L) et 5 mL d’éther méthyl tert-butylique (voir le tableau des matières) à un tube en polypropylène de 15 mL, y compris la racine ou la pousse homogénéisée.</li>
	<li>Agiter le tube à 250 tr/min pendant 20 min et centrifuger à 2 000 x g pendant 10 min à température ambiante pour obtenir la phase organique surnageante. Effectuez le processus d’extraction deux fois.</li>
	<li>Mélanger les extraits recueillis, vaporiser à sec dans un léger flux d’azote (N2), puis reconstituer avec 5 mL de méthanol et les vorter, en maintenant la même vitesse pendant environ 30 s.</li>
	<li>Conditionner la cartouche de pesticarbe (voir le tableau des matières) avec 5 mL de NH4OH à 0,1 % dans du méthanol, 5 mL d’eau et 5 mL de méthanol.</li>
	<li>Ajouter les 5 mL de solution d’extraction du méthanol à travers la cartouche de pesticarbe (500 mg/6 mL) pour enlever le pigment, éluer la cartouche avec 5 mL de méthanol et recueillir dans les mêmes tubes.</li>
	<li>Évaporer les 10 mL de solution de méthanol recueillie jusqu’à quasi-sécheresse et reconstituer avec 200 μL de méthanol, puis tourbillonner et centrifuger à 10 000 x g pendant 20 min à température ambiante.</li>
</ol>4. Préparation de l’échantillon à partir de la solution nutritive
<ol><li>Conditionner avec 5 mL de méthanol et 5 mL d’eau pour activer la cartouche d’extraction de polymère amélioré polaire (PEP) (60 mg/g, 3 mL) (voir le tableau des matériaux).</li>
	<li>Ajouter 1 mL de la solution enrichie ou 50 mL des échantillons de solution non enrichie (étape 2.6) dans la cartouche, respectivement.</li>
	<li>Éluer les APFA cibles avec 10 mL de méthanol, évaporer l’extrait avec du N2 doux, puis reconstituer avec 200 μL de méthanol pour analyse.</li>
</ol>5. Analyse instrumentale
<ol><li>Utiliser une chromatographie liquide ultra-performante UPLC couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS) pour quantifier les APFA cibles en mode multi-réaction (MRM) et ionisation électrospray négative (ESI-) (voir le tableau des matériaux).</li>
	<li>Injecter 10 μL d’échantillons et séparer les APFA cibles à l’aide d’une colonne de chromatographie liquide en C18 (1,7 μm, 2,1 mm x 50 mm, voir le tableau des matériaux), et utiliser 2 mM d’acétate d’ammonium dans l’eau (phase A) et le méthanol (phase B) comme phase mobile pour l’UPLC, avec un débit de 0,3 mL/min. Maintenir la température de la colonne à 50 °C. NOTA : Les transitions ioniques de l’APFO et du SPFO sont de 413 à 369 et de 499 à 80, respectivement. Le programme d’élution par gradient et les paramètres instrumentaux LC-MS/MS pour la quantification des APFA cibles sont énumérés au tableau 2.</li>
	<li>Traitez les données avec le logiciel d’analyse des données (voir Tableau des matériaux).</li>
</ol>

<ol><li>Lindstrom, A. B., Strynar, M. J., Libelo, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyfluorinated+compounds%3A+Past%2C+present%2C+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Polyfluorinated compounds: Past, present, and future.</a> Environmental Science & Technology. 45 (19), 7954-7961 (2011).</li>
<li>Kannan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfluoroalkyl+and+polyfluoroalkyl+substances%3A+Current+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances: Current and future perspectives.</a> Environmental Chemistry. 8 (4), 333-338 (2011).</li>
<li>Cui, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+and+tissue+distribution+of+novel+perfluoroether+carboxylic+and+sulfonic+acids+and+legacy+per%2Fpolyfluoroalkyl+substances+in+black-spotted+frog+%28Pelophylax+nigromaculatus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Occurrence and tissue distribution of novel perfluoroether carboxylic and sulfonic acids and legacy per/polyfluoroalkyl substances in black-spotted frog (Pelophylax nigromaculatus).</a> Environmental Science & Technology. 52 (3), 982-990 (2018).</li>
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<li>Chi, Q., Li, Z., Huang, J., Ma, J., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+of+perfluorooctanoic+acid+and+perfluorooctanesulfonic+acid+with+serum+albumins+by+native+mass+spectrometry%2C+fluorescence+and+molecular+docking%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Interactions of perfluorooctanoic acid and perfluorooctanesulfonic acid with serum albumins by native mass spectrometry, fluorescence and molecular docking.</a> Chemosphere. 198, 442-449 (2018).</li>
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<li>Stockholm Convention. Chemicals proposed for listing under the Convention. , Switzerland. Available from: 
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<li>Pan, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Worldwide+distribution+of+novel+perfluoroether+carboxylic+and+sulfonic+acids+in+surface+water%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Worldwide distribution of novel perfluoroether carboxylic and sulfonic acids in surface water.</a> Environmental Science & Technology. 52 (14), 7621-7629 (2018).</li>
<li>Knight, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+investigation+into+the+long-term+binding+and+uptake+of+PFOS%2C+PFOA+and+PFHxS+in+soil+-+plant+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hazardous+Materials%22%5BJournal%5D)">An investigation into the long-term binding and uptake of PFOS, PFOA and PFHxS in soil - plant systems.</a> Journal of Hazardous Materials. 404, 124065(2021).</li>
<li>Liu, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crop+bioaccumulation+and+human+exposure+of+perfluoroalkyl+acids+through+multi-media+transport+from+a+mega+fluorochemical+industrial+park%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+International%22%5BJournal%5D)">Crop bioaccumulation and human exposure of perfluoroalkyl acids through multi-media transport from a mega fluorochemical industrial park, China.</a> Environment International. 106, 37-47 (2017).</li>
<li>Mei, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Per-+and+polyfluoroalkyl+substances+%28PFASs%29+in+the+soil-plant+system%3A+Sorption%2C+root+uptake%2C+and+translocation%5BTitle%5D)+AND+%22Environment+International%22%5BJournal%5D)">Per- and polyfluoroalkyl substances (PFASs) in the soil-plant system: Sorption, root uptake, and translocation.</a> Environment International. 156, 106642(2021).</li>
<li>Wang, W., Rhodes, G., Ge, J., Yu, X., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+and+accumulation+of+per-+and+polyfluoroalkyl+substances+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Uptake and accumulation of per- and polyfluoroalkyl substances in plants.</a> Chemosphere. 261, 127584(2020).</li>
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<li>Liu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+kinetics%2C+accumulation%2C+and+long-distance+transport+of+organophosphate+esters+in+plants%3A+Impacts+of+chemical+and+plant+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Uptake kinetics, accumulation, and long-distance transport of organophosphate esters in plants: Impacts of chemical and plant properties.</a> Environmental Science & Technology. 53 (9), 4940-4947 (2019).</li>
<li>Wang, Z. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xylem-+and+phloem-based+transport+of+CuO+nanoparticles+in+maize+%28Zea+mays+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Xylem- and phloem-based transport of CuO nanoparticles in maize (Zea mays L.).</a> Environmental Science & Technology. 46 (8), 4434-4441 (2012).</li>
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<li>Felizeter, S., McLachlan, M. S., de Voogt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+of+perfluorinated+alkyl+acids+by+hydroponically+grown+lettuce+%28Lactuca+sativa%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Uptake of perfluorinated alkyl acids by hydroponically grown lettuce (Lactuca sativa).</a> Environmental Science & Technology. 46 (21), 11735-11743 (2012).</li>
<li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+uptake%2C+translocation%2C+and+transformation+mechanisms+of+perfluorophosphinates+and+perfluorophosphonates+in+wheat+%28Triticum+aestivum+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Insights into uptake, translocation, and transformation mechanisms of perfluorophosphinates and perfluorophosphonates in wheat (Triticum aestivum L.).</a> Environmental Science & Technology. 54 (1), 276-285 (2020).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Pour assurer la précision de cette méthode, une opération prudente doit être effectuée pour s’assurer que la solution enrichie dans le tube B ne contamine pas la solution non enrichie dans le tube A. La concentration donnée des APFA cibles dans la présente étude était relativement plus élevée que leur concentration dans l’environnement réel, ce qui permet de surveiller les APFA cibles dans le blé et les solutions non enrichies à l’aide de LC-MS/MS. 
Il y a des limites à cette méthode. Étant do...

Les acides perfluoroalkylés (PFAA) sont largement utilisés dans divers produits commerciaux et industriels en raison de leurs excellentes propriétés physicochimiques, y compris l’activité de surface et la stabilité thermique et chimique 1,2,3. L’acide perfluorooctane sulfonique (SPFO) et l’acide perfluorooctane (APFO) sont les deux principaux APFA utilisés dans le monde 4,5,6, bien que ces composés aient été inscrits dans la Convention internationale de Stockholm en 2009 et 2019 7,8, respectivement. En raison de leur persistance et de leur utilisation répandue, le SPFO et l’APFO ont été largement détectés dans diverses matrices environnementales. Les concentrations d’APFO et de SPFO dans les eaux de surface de différents fleuves et lacs du monde sont respectivement de 0,15 à 52,8 ng/L et de 0,09 à 29,7 ng/L, respectivement9. En raison de l’utilisation d’eau souterraine ou d’eau de récupération pour l’irrigation et de l’utilisation de biosolides comme engrais, l’APFO et le SPFO sont largement présents dans le sol, variant entre 0,01 et 123 μg/kg et entre 0,003 et 162 μg/kg, respectivement10, ce qui pourrait introduire une grande quantité d’APFC dans les plantes et poser des risques potentiels pour la santé humaine. Les concentrations de PFAA (C4-C8) dans les sols agricoles et les céréales (blé et maïs) montrent une corrélation linéaire positive11. Par conséquent, il est impératif d’étudier l’accumulation et la translocation des APFA dans les plantes.
La translocation des APFA dans les plantes se produit d’abord des racines vers les tissus aériens, et la translocation des APFA des racines vers les tissus comestibles est considérée comme un transport sur de longues distances12,13. Des études antérieures ont détecté du bisphénol A, du nonylphénol et des œstrogènes naturels dans les légumes et les fruits14, ce qui implique que ces produits chimiques pourraient migrer via le phloème. Par conséquent, il est important de découvrir la translocation des APFA dans les plantes pour évaluer leur risque potentiel. Cependant, l’accumulation et la translocation des APFA sont influencées par leur biodisponibilité dans le sol, de sorte qu’il n’est pas facile d’évaluer la capacité de translocation des APFA cibles dans les plantes. De plus, les expériences hydroponiques sont généralement limitées par plusieurs facteurs, ce qui rend plus difficile l’acquisition des tissus comestibles des plantes. Typiquement, le phloème a été recueilli directement sur les plantes pour observer la translocation des composés organiques sur de longues distances dans les plantes, alors qu’il est difficile d’acquérir des phloèmes à partir de plantsde plantes 15. Par conséquent, une méthode simple et efficace, la technique des racines fendues, a été introduite pour étudier la translocation des APFA dans les plantes lors d’une exposition à relativement court terme. En ce qui concerne l’étude de la racine fendue, les racines d’un plant plant sont séparées en deux parties; une partie est introduite dans la solution nutritive contenant les APFA cibles (tube A), et l’autre est placée dans la solution nutritive en l’absence d’APFA (tube B). Après une exposition de plusieurs jours, les APFA dans le tube B sont mesurés par LC-MS/MS. La concentration d’APFA dans le tube B révèle le potentiel de translocation des APFA à travers le phloème dans les plantes16,17,18.
L’expérience de racine fendue a été rapportée pour étudier la translocation à longue distance de nombreux composés dans les plantes, tels que les nanoparticules de CuO17, les œstrogènes stéroïdes 18 et les esters organophosphorés16. Ces études ont fourni des preuves que ces composés pouvaient être transférés via le phloème aux parties comestibles des plantes. Cependant, la question de savoir si les APFA pourraient aider à la translocation dans les plantes et l’impact des propriétés des composés doivent être explorées plus avant. Sur la base de ces rapports, l’expérience à racines fendues a été menée dans la présente étude pour divulguer le transport sur de longues distances des APFC dans le blé.

<table><tbody><tr><td>ACQUITY UPLC BEH C18</td><td>column Waters, Milford, MA</td><td></td><td>Colonne de chromatographie liquide</td></tr><tr><td>Cleanert PEP cartouche</td><td>Bonna- Angel Technologies, Chine</td><td></td><td>Colonne d’extraction en phase solide</td></tr><tr><td>Clearnert Pesticarb</td><td>cartouche Bonna- Angel Technologies, Chine</td><td></td><td>Colonne d’extraction en phase solide</td></tr><tr><td>LC-MS/MS(Waters Acquity UPLC i-Class Coupled to Xevo TQ-S)</td><td>Waters, Milford, MA</td><td></td><td>Chromatographie liquide et spectrométrie de masse</td></tr><tr><td>Lyophilizer&nbsp ;</td><td>Boyikang Instrument Ltd., Pékin, Chine</td><td>FD-1A50</td><td>Échantillon lyophilisé</td></tr><tr><td>Masslynx</td><td>Waters, Milford, MA</td><td></td><td>logiciel d’analyse de données</td></tr><tr><td>Méthyl tert-butyl éther</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, États-Unis)</td><td></td><td>utilisation pour l’extraction de composés cibles de tissus végétaux</td></tr><tr><td>MPFAC-MXA</td><td>Wellington Laboratories (Ontario, Canada)</td><td>PFACMXA0518</td><td>les normes internes</td></tr><tr><td>PFAC-MXB</td><td>Wellington Laboratories (Ontario, Canada)</td><td>PFACMXB0219</td><td>mélange d’étalons PFAA</td></tr><tr><td>PFOA</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, États-Unis)</td><td>335-67-1</td><td>a représente les PFAA</td></tr><tr><td></td><td>PFOS Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, États-Unis)</td><td>2795-39-3</td><td>a représente les PFAA</td></tr><tr><td>Tampon de carbonate de sodium</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, États-Unis)</td><td></td><td>utilisation pour l’extraction de composés cibles de tissus végétaux</td></tr><tr><td>Sulfate d’hydrogène de tétrabutylammonium</td><td>Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, États-Unis)</td><td></td><td>utilisation pour l’extraction de composés cibles de tissus végétaux</td></tr><tr><td>Graines de blé</td><td>Académie chinoise des sciences agricoles (Pékin, Chine)&nbsp ;</td><td></td><td>Triticum aestivum L.</td></tr></tbody></table>

Étude du transport sur de longues distances des acides perfluoroalkyliques dans le blé au moyen d’une technique d’exposition à racines fendues

Investigating Long-Distance Transport of Perfluoroalkyl Acids in Wheat via a Split-Root Exposure Technique

De grandes quantités d’acides perfluoroalkyliques (APFA) ont été introduites dans le sol et accumulées par les plantes, ce qui pose des risques potentiels pour la santé humaine. Il est impératif d’étudier l’accumulation et la translocation des APFC dans les plantes. Le transport sur de longues distances est une voie importante pour les APFA transférés des feuilles de la plante aux tissus comestibles par le phloème. Cependant, il était auparavant difficile d’évaluer le potentiel de translocation de la contamination organique au cours d’une période d’exposition à court terme. L’expérience à racines fendues fournit une solution pour découvrir efficacement la translocation à longue distance des APFA à l’aide d’une expérience hydroponique, qui, dans cette étude, a été réalisée dans deux tubes à centrifuger de 50 mL (A et B), dont le tube à centrifuger A contenait 50 mL de solution nutritive stérile Hoagland d’un quart de concentration, tandis que le tube de centrifugation B avait la même concentration en nutriments. et les APFA cibles (acide perfluorooctane sulfonique, SPFO, et acide perfluorooctane, APFO) ajoutées à une concentration donnée. Une racine de blé entière a été séparée manuellement en deux parties et insérée avec précaution dans les tubes A et B. La concentration d’APFA dans les racines, les pousses de blé et les solutions dans les tubes A et B a été évaluée à l’aide de LC-MS/MS, respectivement, après avoir été cultivée dans un incubateur pendant 7 jours et récoltée. Les résultats suggèrent que l’APFO et le SPFO subissent un processus de transport sur de longues distances similaire à travers le phloème de la pousse à la racine et pourraient être libérés dans l’environnement ambiant. Ainsi, la technique de la racine fendue peut être utilisée pour évaluer le transport sur de longues distances de différents produits chimiques.

L’expérience à racines fendues a étudié le transport sur de longues distances des APFA dans le blé. Comme le montre la figure 2A, C, l’APFO et le SPFO pourraient être absorbés par la racine de blé et transférés à la pousse. Le SPFO et l’APFO n’ont pas été détectés dans la racine de blé et la solution dans le tube A de l’essai témoin vierge. Il a été constaté que le SPFO et l’APFO ont été détectés dans les racines de blé cultivées dans la solution non enrichie, avec une conce...

Le présent protocole décrit une méthode simple et efficace pour le transport sur de longues distances des acides perfluoroalkyliques dans le blé.

Large amounts of perfluoroalkyl acids (PFAAs) have been introduced into the soil and accumulated by plants, posing potential risks to human health. It is ...

Le phloème a été recueilli directement sur les plantes pour observer la translocation des composés organiques sur de longues distances, alors qu’il est difficile d’acquérir du phloème à partir de semis de plantes. Une méthode simple et efficace, la technique des racines fendues, a été introduite pour étudier la translocation des APFA dans les plantes, lors d’une exposition à relativement court terme. Cette méthode peut également révéler le transport sur de longues distances de différents composés dans les plantes.La concentration donnée des APFA cibles doit être relativement plus élevée que leur concentration dans l’environnement réel, ce qui permet de surveiller les APFA cibles dans le blé en solution non enrichie. Commencez par sélectionner les graines de Triticum aestivum de taille similaire et désinfectez-les pendant 15 minutes avec une solution de peroxyde d’hydrogène à 8%. Rincez soigneusement les graines désinfectées avec de l’eau désionisée.Placez les graines sur le papier filtre humide dans l’obscurité à température ambiante pendant 5 jours pour la germination. Sélectionnez environ 9 plants germés, de taille uniforme, et transférez-les dans des béchers en plastique avec 25

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In planta, la mesure des flux de nutriments et de toxiques est essentielle à l’étude de la nutrition et de la toxicité des plantes. Ici, nous couvrons les protocoles de radiotraceurs pour la détermination de l’afflux et de l’efflux dans les racines intactes des plantes, en utilisant les flux de potassium (K+) et d’ammoniac/ammonium (NH3/NH4+) comme exemples. Les avantages et les limites de ces techniques sont discutés.

Mesurer les flux d&#39;éléments nutritifs et des substances toxiques minéraux dans les usines avec Traceurs radioactifs

Toute une analyse de biorapporteur cellulaire avec Burkholderia sartisoli RP037-MCHE a été développé pour détecter fractions d'un contaminant organique (par exemple, le fluorène) disponible pour la dégradation bactérienne après le transport actif par mycéliums de pontage des pores remplis d'air dans un système de modèle insaturé de l'eau.

Une approche Cell biorapporteur entières pour évaluer transport et la biodisponibilité des contaminants organiques dans les systèmes insaturés eau

Ce manuscrit décrit comment les taux de métabolisme des herbicides peuvent être quantifiés efficacement à l’aide de feuilles excisées d’une mauvaise herbe dicotylédones, réduisant ainsi la variabilité et éliminant tout effet confondant possible de l’absorption ou de la translocation de l’herbicide généralement observé dans les essais sur la plante entière.

Mesurer les taux de métabolisme dans l&#39;herbicide Mauvaises herbes dicotylédones avec un dosage excisés Feuille

Ici, les essais biologiques conçus pour suivre l’évolution d’un pathogène fongique, Colletotrichum fioriniae, en présence de bleuet ou canneberges extraits floraux sur couvre-objet en verre sont décrites. Eau - chloroforme- et l’eau de pluie de champ - basent florale extraction techniques sont détaillées ainsi que de mieux comprendre comment cette information peut être appliquée.

COLLETOTRICHUM fioriniae Développement dans l’eau et des extraits floraux axée sur le chloroforme aux bleuets et aux canneberges

Nous présentons ici un protocole de quantification ciblée séquentielle et d’analyse indifférenciés de composés fluorés dans l’eau par spectrométrie de masse. Cette méthode fournit des niveaux quantitatifs de composés connus de composés fluorés et identifie des produits chimiques indéterminés dans les exemples associés avec des estimations semi-quantitatives de leur abondance.

Identification par- et les espèces chimiques polyfluorés avec un flux de travail combinée spectrométrie de masse à haute résolution ciblée et Non-ciblés-dépistage

La sécrétion d’exsudats racinaires est généralement une stratégie de désintoxication externe pour les plantes dans des conditions de stress. Ce protocole décrit comment évaluer l’impact des xénobiotiques sur la luzerne par analyse métabolomique non ciblée.

Collecte d’exsudats de racines de luzerne pour étudier l’impact du phtalate de di(2-éthylhexyle) sur la production de métabolites

Un protocole pour la détermination de l’absorption, de la translocation et de la distribution de l’imidaclopride dans le blé dans des conditions hydroponiques par chromatographie liquide et spectrométrie de masse en tandem (LC-MS-MS) est présenté ici. Les résultats ont montré que l’imidaclopride peut être absorbé par le blé, et l’imidaclopride a été détecté dans les racines et les feuilles du blé.

Détermination de l’absorption, de la translocation et de la distribution de l’imidaclopride dans le blé

Le présent protocole décrit les procédures utilisées pour étudier et caractériser les enzymes liées à la paroi cellulaire, principalement la β-1,3-glucanase et la peroxydase, chez les plants de blé. Leurs niveaux d’activité augmentent lors de l’interaction blé-RWA et sont impliqués dans la réponse de défense des plantes par le renforcement de la paroi cellulaire, ce qui dissuade l’alimentation des pucerons.

Élucidation des propriétés physicochimiques de la #946 ;-1,3-glucanase et de la peroxydase du mécanisme de défense de la paroi cellulaire du blé contre l’infestation par Diuraphis noxia

Découvrez la technique des racines fendues pour étudier le transport à longue distance des acides perfluoroalkyliques dans le blé Triticum aestivum. Cette méthode simple permet d'observer efficacement la translocation des composés organiques.

Étude du transport sur de longues distances des acides perfluoroalkyliques dans le blé au moyen d’une technique d’exposition à racines fendues (Vidéo) | JoVE Journal

Étude du transport sur de longues distances des acides perfluoroalkyliques dans le blé au moyen d’une technique d’exposition à racines fendues

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