Mesure transdermique du débit de filtration glomérulaire chez les porcelets ventilés mécaniquement

TGFR offre une évaluation en temps réel des fonctions rénales. Par rapport aux marqueurs traditionnels, le TGFR peut surveiller les changements dans la fonction rénale chez les mêmes animaux plusieurs fois. De plus, la technique ne nécessite aucune collecte de sang ou d’urine.

Avec les progrès récents de la xénotransplantation, d’autres recherches seront menées à l’aide du modèle porcin. Nous pensons donc que cet outil sera essentiel pour la recherche translationnelle et qu’il sera plus susceptible d’être utilisé cliniquement dans les années à venir. L’expérience est menée sur des porcelets âgés de trois à sept jours.

Les animaux sont sujets à l’hypothermie, à l’hypovolémie et à d’autres complications résultant de la chirurgie. Par conséquent, une surveillance étroite est nécessaire tout au long de la procédure. En outre, la méthodologie nécessite de la pratique car elle implique une trachéostomie et des canulations de vaisseaux.

Après avoir préparé l’animal pour la procédure, utilisez une lame chirurgicale pour créer une incision verticale paramédiane gauche de cinq à six centimètres, car le caecum chez les porcs se trouve dans la fosse paralombaire gauche. Disséquez les couches de la paroi abdominale, en évitant de blesser les vaisseaux épigastriques superficiels. Une fois la couche péritonéale incisée, utilisez un rétracteur pour améliorer l’accès aux structures intraabdominales et identifier le côlon spiralé dans le quadrant supérieur gauche de l’abdomen.

Pour localiser le caecum, tracez le côlon en spirale caudale et dorsale. Le côlon spiralé à la base du caecum est joint à l’ilium. Libellez le caecum juste distal à la jonction iléo-cæcale.

À l’aide d’une aiguille de calibre 18, faites sept perforations dans le caecum et extrudez les matières fécales dans la région péritonéale. Fermez les couches abdominales avec une suture de soie 3/0, en utilisant des points simples interrompus ou continus. Une agrafeuse peut également être utilisée pour fermer la couche de peau si disponible.

Après huit heures de ligature des selles, initier la mesure transdermique du DFG. Utilisez la version 3.0 du logiciel MB Service pour ajuster la fréquence d’échantillonnage sur le périphérique GFR. À l’aide du connecteur USB, connectez le dispositif GFR transdermique à l’ordinateur.

Ouvrez le logiciel MB Service. Cliquez sur Connecter et réglez la synchronisation à 4 000 millisecondes. Cliquez sur Écrire pour enregistrer les paramètres, puis cliquez sur Déconnecter.

Fixez les patchs adhésifs double face avec une fenêtre transparente sur un côté de l’appareil. Connectez la batterie à l’appareil, en veillant à ce que la diode électroluminescente recouvre la fenêtre transparente pour permettre la détection du traceur. Une fois la batterie fixée, collez immédiatement le patch adhésif avec l’appareil en place.

Assurez-vous qu’il est bien sécurisé. Étant donné que les porcelets sont profondément anesthésiés, le ruban peut être inutile pour maintenir l’appareil en place. Préparer 50 milligrammes par millilitre de solution FITC-sinistrin avec une solution saline et aspirer la dose appropriée dans une seringue.

Fixez la seringue avec le médicament à un côté d’un robinet d’arrêt à trois voies et une chasse d’eau saline de l’autre côté du robinet d’arrêt. Poussez le FITC-sinistrin, immédiatement suivi d’un bolus salin de cinq millilitres avant de fermer le robinet d’arrêt à trois voies à la veine du porcelet. Gardez l’appareil attaché au porcelet pendant quatre heures.

Pour éviter les artefacts de mouvement pendant cette période, gardez le porcelet sous anesthésie comme décrit dans le manuscrit. À la fin des quatre heures, retirez l’appareil et débranchez immédiatement la batterie. Connectez le dispositif de DFG transdermique à l’ordinateur à l’aide du connecteur USB fourni par le fournisseur.

Ouvrez le logiciel MB lab pour récupérer les données de l’appareil. Pour enregistrer les données brutes, cliquez sur Connexion et sélectionnez Lire. Ensuite, attendez que l’appareil ait fini de lire.

Cliquez sur Renommer et enfin, cliquez sur Enregistrer. Traiter et évaluer les données enregistrées dans le logiciel d’analyse selon les instructions du manuel. En bref, ouvrez MB Studio et cliquez sur charger pour importer les données enregistrées.

Ajustez les positions de décalage, de départ et d’arrêt à l’aide des marqueurs automatisés. Supprimez les artefacts si nécessaire. Sélectionnez le modèle à trois compartiments et cliquez sur ajuster pour obtenir une lecture montrant la clairance FITC-sinistrin en quelques minutes et calculer le TGFR à l’aide de cette équation.

Les animaux fictifs et septicémiques avaient des poids comparables. Après 12 heures de septicémie, une augmentation des taux sériques de protéine C-réactive, un marqueur de la septicémie, a été observée dans le groupe de septicémie. Des courbes de clairance FITC-sinistrin ont été montrées pour les porcelets fictifs et septiques 12 heures après la chirurgie.

Les porcs septiques présentant une insuffisance rénale ont montré une augmentation de l’aire sous la courbe. Les porcelets atteints de septicémie présentaient une clairance altérée de la FITC-sinistrin, indiquant une lésion rénale aiguë. La demi-vie moyenne de FITC-sinistrin dans les groupes simulé et septicémie était respectivement de 114 et 537 minutes.

Le DFG moyen dans le groupe simulé était significativement plus élevé que dans le groupe septicémie. Le taux de créatinine sérique à zéro et 12 heures était similaire dans le groupe fictif. Cependant, une augmentation significative du taux de créatinine chez les porcs septiques a été observée après 12 heures.

Assurez-vous que la batterie est correctement connectée aux porcelets. Si les piles sont délogées, l’appareil ne fonctionnera pas. Essayez d’injecter la FITC-sinistrin dans un bolus fluide pour éviter plusieurs pics.

Assurez-vous également que l’appareil est correctement connecté aux porcelets pour éviter les artefacts de mouvement. Avec une mesure en temps réel du DFG, nous pouvons évaluer correctement la fonction rénale pour détecter l’IRA à un stade précoce et éventuellement évaluer les agents thérapeutiques à l’étude.