Établissement d’un modèle de lésion médullaire par contusion chez la souris basé sur une technique mini-invasive

Les techniques mini-invasives réduisent les courants d’instabilité causés par des dommages physiques excessifs. Cultiver pour analyser précisément le microenvironnement de la moelle épinière. Cette technique combine le principe de sevrage classique d’Alan avec une procédure opératoire de précision pour établir un modèle reproductible de lésion de la moelle épinière.

L’objectif principal de ce protocole est de se familiariser avec la structure anatomique. Ce qui est plus facile à suivre même pour les étudiants de deuxième année comme moi. Xiangchuang Fan A de troisième cycle de l’hôpital Qilu, Zhongze Yuan et Zimeng Yang feront la démonstration de la procédure.

Tous deux étudiants de premier cycle du Collège de médecine Cheeloo de l’Université du Shandong. Pour commencer, assemblez la plate-forme avec une table d’opération chirurgicale au-dessus d’un stabilisateur t-bral et une pointe d’impacteur. Mettez l’embout, qui permet une localisation précise de la moelle épinière dans la manche.

Sélectionnez les masses appropriées des gouttes de poids pour l’expérience, qui sont respectivement de 1,3, 2,0 et 2,7 grammes pour les groupes légers, modérés et sévères. Branchez la goupille de traction dans les trous de la perte de poids. Assemblez la perte de poids jusqu’au sommet du manchon avec la goupille de traction insérée dans la rainure du bras XYZ, de sorte qu’une fois la localisation terminée, le poids soit libéré pour frapper la pointe de l’impacteur.

Par conséquent, la contusion de la moelle épinière et les changements dans la moelle épinière sont observés au microscope. Placez la souris en position couchée sur le ventre dans une partie désignée de la table d’opération. Explorez la 13e côte d’un côté de la partie osseuse, sous le microscope opératoire.

Explorez le processus épineux dans la ligne médiane en touchant légèrement la zone de l’angle costo-tébral, puis vers le rostral pour localiser l’espace interépineux entre les 12e et 13e vertèbres thoraciques. Explorez l’espace interépineux entre les 9e et 10e vertèbres thoraciques de l’espace des 12e et 13e vertèbres thoraciques au côté rostral. Disséquer le muscle paraspinal le long de l’apophyse épineuse du T9 jusqu’aux facettes antérieures et postérieures des deux côtés avec des micro-ciseaux.

Rétracter les muscles paraspinaux avec des micro-rétracteurs et nettoyer les tissus mous sur la lame et dans l’espace interépineux des T8 à T9 et T9 à T10, avec des micro-ciseaux. Pour effectuer une laminectomie T9, serrez l’apophyse épineuse de T9 avec des pinces microchirurgicales. Légèrement soulevé, insérez les micro-ciseaux parallèlement, le long du côté latéral dorsal droit de la lame.

Éviter d’endommager la moelle épinière et couper la lame avec des micro-ciseaux. Répétez sur le côté gauche et la moelle épinière peut être exposée. Avant de fixer la vertèbre, desserrez le bras universel et serrez lentement les articulations des facettes 9e à 10e des deux côtés de la vertèbre avec la micro-pince anti-moustiques du stabilisateur vertébral.

Serrez les vis sur les micro pinces anti-moustiques, et la vertèbre est ainsi stabilisée. Ajustez la moelle épinière au plan horizontal. Serrez le bras universel et la vertèbre est fixée.

Une fois que la moelle épinière de niveau T9 est exposée et que la vertèbre est fixée, visez la moelle épinière par l’extrémité à l’intérieur du manchon sous le microscopique opératoire. Après avoir localisé l’espace interépineux du T12 à T13, abaissez le manchon jusqu’à ce que l’extrémité de l’élément de frappe soit compatible avec la marque sur la fenêtre d’observation et que la hauteur spécifiée de 22 millimètres soit atteinte. Retirez la goupille de traction pour libérer le poids.

Retirez l’élément de frappe lorsque la contusion est terminée et observez le degré de lésion de la moelle épinière au microscope opératoire. Dans le groupe léger, l’altération de la couleur rouge clair peut être observée dans le groupe modéré. La vue de la blessure présente un rouge foncé en trois à quatre secondes, et peut-être une éminence peut être observée.

Dans le groupe sévère, les manifestations rouge foncé peuvent apparaître immédiatement et une éminence évidente dans la dure-mère se manifeste, mais la dure-mère est toujours sous une forme cohérente. La zone de lésion a progressivement augmenté de manière significative des groupes légers à sévères le premier jour après la blessure. Pendant ce temps, la continuité de la substance blanche des deux côtés de la moelle épinière était meilleure dans le groupe léger.

Avec de petites vacuoles rondes observables, qui sont les caractéristiques de l’œdème interstitiel. Dans le groupe modéré, la substance blanche affichait une faible continuité et la structure de la substance blanche ventrale n’était pas ordonnée. Dans le groupe sévère, la substance blanche ventrale présentait une perturbation plus grave et une grande partie de la cavité est apparue au centre de la blessure.

De plus, les tissus environnants présentaient un remplissage évident des globules rouges et les globules rouges près du canal central se rassemblaient en bandes. Des astrocytes formant des cicatrices qui se chevauchaient étaient visibles au centre des trois groupes de blessures. Avec la longueur de la zone de la blessure, augmentant avec la gravité de la blessure, tandis que le diamètre de la cicatrice diminuait.

Ceci, suggère la présence d’une contracture cicatricielle, ce qui peut entraîner une diminution du diamètre de la moelle épinière. L’élimination des tissus mous devant et derrière la lame autant que possible facilite la relaxation de la lame et prévient les dommages à la moelle épinière lors de la coupe parallèle. La technique actuelle fournit un modèle animal simple, reproductible et moins invasif.

lésion de la moelle épinière post-traumatique, en particulier une lésion de contusion.