Le système Tol2 du poisson zèbre : une approche de transgénèse modulaire et flexible basée sur une passerelle

Le poisson zèbre transgénique s’est avéré essentiel à notre compréhension du développement embryonnaire. Le système Tol2 est un outil polyvalent qui permet aux chercheurs de générer rapidement et systématiquement plusieurs poissons-zèbres transgéniques pour les études sur l’ETCAF. La conception modulaire et la facilité de génération de nouveaux composants du kit font du système Tol2 un outil polyvalent pour générer de nouveaux transgéniques sans avoir à redessiner les composants du kit.

Mon conseil aux chercheurs qui pratiquent cette technique pour la première fois est de faire plusieurs essais pour s’entraîner à la précision de la génération et de l’injection de constructions transgéniques. Pour commencer, linéariser le plasmide du kit Tol2 contenant de la transposase avec une endonucléase de restriction nulle en combinant 10 microlitres de plasmide transposase, 1,5 microlitre de tampon de réaction de l’endonucléase de restriction et 0,3 microlitre d’endonucléase nulle dans un tube microcentrifuge de 500 microlitres. Remplissez la réaction jusqu’à 20 microlitres avec de l’eau sans ARNase.