Name: Surveillance continue simple de la glycémie chez des souris en mouvement libre (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-24T13:35:00.000+00:00
Duration: 3 min 25 s
Description: Apprenez une méthode simple de surveillance continue de la glycémie chez des souris en mouvement libre. Cette technique sans chirurgie invasive permet d'étudier les phénotypes métaboliques dans les modèles d'obésité et de diabète.

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Nous remercions Dvir Mintz DVM et le personnel vétérinaire et d’élevage de l’animalerie, ainsi que les membres de notre groupe, pour leurs discussions fructueuses. Cette étude a été soutenue par une subvention 1541/21 de la Fondation israélienne des sciences accordée à D.B.Z. D.B.Z. est une faculté Zuckerman STEM.

Les expériences ont été approuvées par le Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’Université hébraïque.
NOTE: Tous les outils doivent être stérilisés et la manipulation de la canule doit être effectuée à l’aide d’une technique stérile. Le protocole ci-dessous est adapté à un CGM spécifique. Le protocole peut être adapté à d’autres CGM.
1. Administration d’analgésique avant la procédure
<ol><li>Administrer 5% de dextrose et 0,45% de solution saline avec du méloxicam à 5 mg / kg de poids corporel par voie sous-cutanée.</li>
</ol>2. Administration de l’anesthésie
<ol><li>Placez la souris dans la chambre à induction en fermant hermétiquement le couvercle. Régler l’induction de l’anesthésie dans la chambre d’induction à 3 % d’isoflurane à un débit de 500 mL/min.</li>
	<li>Une fois que la souris ne répond plus, retirez-la de la chambre et ajustez le cône de nez à la souris. Confirmez le niveau d’anesthésie avec une pincement interdigitale. Régler la concentration à 1 %-1,5 % d’isoflurane et le débit à 100 mL/min chez une souris pesant 30 g.</li>
	<li>Appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux pour prévenir la sécheresse pendant l’anesthésie.</li>
</ol>3. Préparation du capteur
<ol><li>Montez le capteur sur le dispositif de montage du capteur pour exposer la bande et la canule du capteur (Figure 1A). Soyez prudent car l’aiguille est insérée dans la canule et exposée.</li>
	<li>Suturer deux points de suture coniques 5-0 à la bande des deux côtés de la canule (Figure 1A).</li>
</ol>4. Épilation et désinfection
<ol><li>Rasez une zone d’environ 4 cm x 4 cm sur la ligne médiane du dos de la souris.</li>
	<li>Administrer une crème dépilatoire sur la zone rasée pour assurer une épilation complète.</li>
	<li>Essuyez la peau et désinfectez-la à l’aide d’une solution antiseptique contenant 2% de gluconate de chlorhexidine et 70% d’alcool isopropylique.</li>
</ol>5. Préparation dorsale de la peau
<ol><li>Faites une incision de 2 mm au centre de la zone rasée au-dessus de la colonne vertébrale à l’aide de ciseaux tranchants (Figure 1B).</li>
	<li>En bref, insérez de petites pinces avec un bord émoussé sous la peau pour former une petite poche sous-cutanée afin que la canule puisse être insérée facilement dans la poche sous-cutanée (Figure 1B).</li>
	<li>Passez une suture de l’étape 3.2 à travers la peau de chaque côté de l’incision (Figure 1C).</li>
</ol>6. Insertion du capteur
<ol><li>Retirez complètement le capteur du dispositif de montage du capteur (la canule est vide de l’aiguille) et maintenez le capteur avec une pince pour empêcher le ruban environnant de coller à lui-même.</li>
	<li>Insérez délicatement la canule dans la poche sous-cutanée.</li>
	<li>Tirez les sutures de chaque côté, serrez-les et attachez-les pour fixer le capteur fermement en place, empêchant ainsi la canule de glisser hors de la poche sous-cutanée une fois que le ruban adhésif se desserre avec le temps.</li>
</ol>7. Fixation et suture du capteur
<ol><li>Fixez fermement le capteur à l’arrière en attachant les sutures internes et en utilisant le ruban adhésif entourant le capteur.</li>
	<li>Effectuez huit sutures discontinues autour du capteur, en fixant le bord du ruban adhésif du capteur à la peau (Figure 1D).</li>
</ol>8. Activation du lecteur
<ol><li>Une fois le capteur inséré, activez-le en allumant le lecteur, en appuyant sur Démarrer un nouveau capteur et en faisant glisser le capteur conformément aux instructions du fabricant.</li>
	<li>La première lecture ne peut être effectuée que quelques minutes après l’installation du CGM. Dans le cas de ce CGM, la première lecture peut être effectuée après 60 min.</li>
</ol>9. Résultats de lecture
<ol><li>Placez le lecteur près de la souris (il n’est pas nécessaire de le toucher). Toutes les données stockées dans le capteur sont transmises au lecteur. REMARQUE: Différents appareils CGM peuvent différer dans la période de capacité historique d’économie de données. Dans le cas de ce CGM, un maximum de 8 h peut être stocké entre deux lectures.</li>
</ol>10. Retrait du capteur
<ol><li>Anesthésiez la souris (voir rubrique 2).</li>
	<li>Coupez les sutures reliant le capteur à l’arrière de la souris à l’aide de ciseaux tranchants.</li>
	<li>Retirez et coupez les sutures à l’incision en retirant doucement le capteur.</li>
	<li>Si nécessaire, utilisez une seule suture pour fermer l’incision à l’arrière de la souris.</li>
</ol>11. Analyse des données
<ol><li>Téléchargement des données : Téléchargez les données conformément aux instructions fournies par le fabricant du CGM. REMARQUE: Chaque CGM a un format différent, qui peut ou non être facilement accessible à l’utilisateur. Il s’agit d’une considération importante dans le choix du CGM.</li>
	<li>Pour l’analyse avec le logiciel fourni, formatez les données selon les instructions du fichier readme sur Github (https://github.com/mika-littor/CGM-in-Mice-Analysis.git).</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64743/64743fig01.jpg"> Figure 1 : Fixation du capteur à la souris. (A) Deux sutures marquées par des flèches rouges sont passées à travers le ruban de capteur des deux côtés de la canule sur la face inférieure du capteur CGM, marquées par une flèche blanche. (B) Une petite incision de 2 mm est pratiquée au centre de la zone rasée le long de la colonne vertébrale à l’aide de ciseaux tranchants. De petites pinces avec un bord émoussé sont brièvement insérées sous la peau pour former une petite poche sous-cutanée afin que la canule puisse être insérée par voie sous-cutanée. (C) Les mêmes sutures de A sont passées par voie sous-cutanée de chaque côté de l’incision. Les flèches rouges marquent les sutures attachées au capteur comme dans A, les flèches bleues marquent l’emplacement des sutures passées à la peau à l’arrière de la souris et la flèche noire montre l’incision. (D) Après l’insertion de la canule, les sutures internes sont serrées et attachées près de l’incision pour fixer le CGM. Le capteur est ensuite suturé à la peau. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64743/64743fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

<ol><li>Polonsky, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+past+200+years+in+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">The past 200 years in diabetes.</a> New England Journal of Medicine. 367 (14), 1332-1340 (2012).</li>
<li>Rees, D. A., Alcolado, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetic+Medicine%22%5BJournal%5D)">Animal models of diabetes mellitus.</a> Diabetic Medicine. 22 (4), 359-370 (2005).</li>
<li>Pearson, J. A., Wong, F. S., Wen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+non-obese+diabetic+%28NOD%29+mouse+model+in+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Autoimmunity%22%5BJournal%5D)">The importance of the non-obese diabetic (NOD) mouse model in autoimmune diabetes.</a> Journal of Autoimmunity. 66, 76-88 (2016).</li>
<li>Heydemann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+murine+high+fat+diet+as+a+model+for+Type+2+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Diabetes+Research%22%5BJournal%5D)">An overview of murine high fat diet as a model for Type 2 diabetes mellitus.</a> Journal of Diabetes Research. 2016, 2902351(2016).</li>
<li>Kennard, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+mice+in+diabetes+research%3A+The+impact+of+experimental+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The use of mice in diabetes research: The impact of experimental protocols.</a> Diabetic Medicine. 38 (12), 14705(2021).</li>
<li>Klueh, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+glucose+monitoring+in+normal+mice+and+mice+with+prediabetes+and+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Technology+and+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Continuous glucose monitoring in normal mice and mice with prediabetes and diabetes.</a> Diabetes Technology and Therapeutics. 8 (3), 402-412 (2006).</li>
<li>Wuyts, C., Simoens, C., Pinto, S., Philippaert, K., Vennekens, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+glucose+monitoring+during+pregnancy+in+healthy+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Continuous glucose monitoring during pregnancy in healthy mice.</a> Scientific Reports. 11, 4450(2021).</li>
<li>Korstanje, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+glucose+monitoring+in+female+NOD+mice+reveals+daily+rhythms+and+a+negative+correlation+with+body+temperature%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Continuous glucose monitoring in female NOD mice reveals daily rhythms and a negative correlation with body temperature.</a> Endocrinology. 158 (9), 2707-2712 (2017).</li>
<li>Han, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Markers+of+glycemic+control+in+the+mouse%3A+Comparisons+of+6-h-and+overnight-fasted+blood+glucoses+to+Hb+A1c%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Markers of glycemic control in the mouse: Comparisons of 6-h-and overnight-fasted blood glucoses to Hb A1c.</a> American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 295 (4), 981-986 (2008).</li>
<li>Xie, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+measurement+noise+in+a+continuous+glucose+monitor+by+coating+the+sensor+with+a+zwitterionic+polymer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Reduction of measurement noise in a continuous glucose monitor by coating the sensor with a zwitterionic polymer.</a> Nature Biomedical Engineering. 2 (12), 894-906 (2018).</li>
<li>Van Der Meulen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urocortin3+mediates+somatostatin-dependent+negative+feedback+control+of+insulin+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Urocortin3 mediates somatostatin-dependent negative feedback control of insulin secretion.</a> Nature Medicine. 21 (7), 769-776 (2015).</li>
<li>Peterson, Q. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+the+generation+of+human+stem+cell-derived+alpha+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">A method for the generation of human stem cell-derived alpha cells.</a> Nature Communications. 11, 2241(2020).</li>
<li>Klueh, U., Liu, Z., Feldman, B., Kreutzer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+fluid+physiology+as+it+relates+to+glucose+monitoring+technologies%3A+Importance+of+Interleukin-1+and+Interleukin-1+receptor+antagonist+in+short-term+glucose+sensor+function+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Diabetes+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Interstitial fluid physiology as it relates to glucose monitoring technologies: Importance of Interleukin-1 and Interleukin-1 receptor antagonist in short-term glucose sensor function in vivo.</a> Journal of Diabetes Science and Technology. 4 (5), 1073(2010).</li>
<li>Klueh, U., Antar, O., Qiao, Y., Kreutzer, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+interleukin-1%2Finterleukin-1+receptor+antagonist+family+of+cytokines+in+long-term+continuous+glucose+monitoring+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Diabetes+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Role of interleukin-1/interleukin-1 receptor antagonist family of cytokines in long-term continuous glucose monitoring in vivo.</a> Journal of Diabetes Science and Technology. 7 (6), 1538(2013).</li>
<li>Klueh, U., Kaur, M., Qiao, Y., Kreutzer, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+role+of+tissue+mast+cells+in+controlling+long-term+glucose+sensor+function+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Critical role of tissue mast cells in controlling long-term glucose sensor function in vivo.</a> Biomaterials. 31 (16), 4540-4551 (2010).</li>
<li>Kogot-Levin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+metabolic+reprogramming+induced+by+sodium-glucose+cotransporter+2+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Mapping the metabolic reprogramming induced by sodium-glucose cotransporter 2 inhibition.</a> JCI Insight. , 164296(2023).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.

Ce protocole offre une méthode simple et peu coûteuse pour surveiller les niveaux de glucose chez la souris qui ne nécessite pas de microchirurgie difficile et n’implique pas de saignement ou de manipulation des souris. La méthode est facile à mettre en œuvre dans tous les établissements et ne cause pas de mortalité, de douleur ou d’inconfort excessif aux souris. L’étape la plus critique du protocole consiste à insérer la canule du capteur de glucose sous la peau de la souris. L’ajout de quelques sutures permet à la canu...

Le diabète sucré (DM) est une maladie dévastatrice caractérisée par une glycémie élevée. Le diabète de type 1 peut être le résultat d’une attaque auto-immune sur les cellules bêta productrices d’insuline dans le pancréas. Le DM de type 2 et le DM gestationnel, en revanche, sont caractérisés par une incapacité des cellules bêta à sécréter suffisamment d’insuline en réponse à une augmentation du taux de glucose1. La souris est un organisme modèle commun utilisé pour étudier le DM car elle a une physiologie similaire et ses niveaux normaux de glucose sont proches de ceux des humains. De plus, des souches de souris spécifiques peuvent développer un DM en raison de mutations dans les principales voies de signalisation ou à la suite d’une exposition à des régimes spécifiques, ce qui permet la modélisation de la maladie 2,3,4.
La glycémie est couramment mesurée chez la souris à l’aide de glucomètres conçus pour les patients en extrayant une petite goutte de sang (1-2 μL) du bout de la queue de la souris. Cette méthode provoque un stress et nécessite la manipulation de la souris, ce qui affecte les niveaux de glucose et interdit la mesure de la glycémie chez les souris se comportant librement ou lorsque le chercheur n’est pas à proximitéde 5. Le saignement des souris peut causer du stress aux souris voisines, en particulier aux souris de la même cage dont la glycémie n’a pas encore été mesurée, affectant ainsi les résultats. Les souris réagissent différemment selon le manipulateur, et la personne qui mesure le glucose peut affecter les niveaux de glucose des souris. Ces pièges exigent une conception expérimentale minutieuse et sous-tendent certaines incohérences entre les expériences.
Il est possible de mesurer le glucose chez des souris en mouvement libre sans saignement en implantant des capteurs de glucose dans l’arc aortique des souris à l’aide de la télémétriede pointe 6. Les mesures résultantes sont très bonnes et peuvent être maintenues sur une longue période, mais il est difficile d’implanter ces capteurs, et le système de télémétrie est coûteux, ce qui conduit à une adoption modérée de cette méthodologie et à aucune adoption dans les laboratoires non spécialisés. Des capteurs de glucose sous-cutanés ou autres adaptés aux dimensions des souris et à leur physiologie ont été développés ces dernières années, mais ceux-ci nécessitent à nouveau des experts hautement qualifiés et sont dans certains cas coûteux 6,7,8,9,10.
Les glucomètres continus (CGM) commerciaux qui ont été développés à l’origine pour surveiller les niveaux de glucose des patients atteints de DM offrent une autre option pour mesurer le glucose chez les souris en mouvement libre, avec des exigences de coût et d’expertise technique inférieures à celles des sondes implantées. De telles sondes ont été utilisées en recherche fondamentale par quelques laboratoires 5,11,12,13,14,15 y compris nos collègues qui ont utilisé ce protocole 16. Ces périphériques comprennent généralement un capteur, un dispositif de montage, un récepteur et une application logicielle. Le capteur dispose d’une canule guidant le glucocapteur enzymatique, d’un ruban adhésif, d’une source d’énergie, d’une mémoire à court terme et d’un module de communication sans fil qui stocke et envoie les données au récepteur. Le récepteur peut afficher les niveaux de glucose actuels et envoyer les données à un serveur; Ce récepteur peut être un téléphone portable. L’application logicielle fournit des données au patient et à l’équipe médicale sur la glycémie du patient. Chez les patients, le capteur se fixe facilement à l’aide du dispositif de montage. La canule est insérée par voie sous-cutanée en pressant le dispositif de montage contre la peau, et le capteur reste en place à l’aide de ruban adhésif.
Il s’agit d’un protocole détaillé pour adapter un dispositif CGM commercial pour mesurer les niveaux de glucose chez la souris. Ce protocole décrit comment insérer chirurgicalement le capteur de glucose et le fixer à la souris. Des scripts pour l’analyse et la visualisation des données de base sont fournis. Les pièges potentiels, le dépannage et des exemples de résultats standard sont fournis. Le protocole ci-dessous est spécifique à un certain CGM, mais peut être facilement adapté à d’autres types de CGM commerciaux dès qu’ils deviennent disponibles.

<table><tbody><tr><td>2 %&nbsp ; gluconate de chlorhexidine et 70 %&nbsp ; Alcool isopropylique</td><td>3M</td><td>ID&nbsp ; </td><td></td>7000136290</tr><tr><td>5 % de dextrose et 0,45 % de chlorure de sodium injectable, USP</td><td>Braun</td><td>L6120</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo porte-aiguille</td><td>FST</td><td>12061-02</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux de Bonn extra fins</td><td>FST</td><td>14084-08</td><td></td></tr><tr><td>FreeStyle Libre 1 lecteur</td><td>Abbott</td><td>ART27543&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Capteur FreeStyle Libre</td><td>Abbott</td><td>ART36687</td><td></td></tr><tr><td>Applicateur de capteur FreeStyle Libre</td><td>Abbott</td><td>ART36787</td><td></td></tr><tr><td>Compresses de gaze</td><td>Sion medical</td><td>PC912017</td><td></td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>FST</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Crème dépilatoire</td><td>Veet</td><td>3116523</td><td></td></tr><tr><td>Régime riche en matières grasses et riche en saccharose</td><td>Envigo Teklad régimes</td><td>TD.08811</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane, USP Terrell</td><td>Piramal</td><td>26675-46-7</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam 5 mg/mL</td><td>Chanelle Pharma</td><td>08749/5024</td><td></td></tr><tr><td>MiniARCO Clipper kit</td><td>Moser</td><td>CL8787-KIT</td><td></td></tr><tr><td>PROLENE Suture en polypropylène 5-0</td><td>Ethicon</td><td>8725H</td><td></td></tr><tr><td>Puralube Pommade ophtalmique</td><td>Perrigo</td><td>574402511</td><td></td></tr><tr><td>Q-tips&nbsp ;</td><td>B.H.W</td><td>271676</td><td></td></tr><tr><td>SomnoSuite Système d’anesthésie à faible débit</td><td>Kent Scientific</td><td>SOMNO</td><td></td></tr></tbody></table>

surveillance continue simple de la glycémie chez des souris en mouvement libre

Simple Continuous Glucose Monitoring in Freely Moving Mice

Les souris sont un organisme modèle commun utilisé pour étudier les maladies métaboliques telles que le diabète sucré. Les niveaux de glucose sont généralement mesurés par saignement de la queue, ce qui nécessite la manipulation des souris, provoque du stress et ne fournit pas de données sur le comportement libre des souris pendant le cycle sombre. La mesure continue de pointe de la glycémie chez la souris nécessite l’insertion d’une sonde dans l’arc aortique de la souris, ainsi que d’un système de télémétrie spécialisé. Cette méthode difficile et coûteuse n’a pas été adoptée par la plupart des laboratoires. Ici, nous présentons un protocole simple impliquant l’utilisation de glucomètres continus disponibles dans le commerce utilisés par des millions de patients pour mesurer le glucose en continu chez la souris dans le cadre de la recherche fondamentale. La sonde de détection de glucose est insérée dans l’espace sous-cutané à l’arrière de la souris à travers une petite incision sur la peau et est maintenue fermement en place à l’aide de quelques sutures. L’appareil est suturé à la peau de la souris pour s’assurer qu’elle reste en place. L’appareil peut mesurer les niveaux de glucose jusqu’à 2 semaines et envoie les données à un récepteur à proximité sans avoir besoin de manipuler les souris. Des scripts pour l’analyse des données de base des niveaux de glucose enregistrés sont fournis. Cette méthode, de la chirurgie à l’analyse informatique, est rentable et potentiellement très utile dans la recherche métabolique.

Résultat chirurgical Les résultats de huit souris HSD: ICR (âgées de 8 semaines) nourries avec un régime riche en graisses et en saccharose (HFHS) pendant 18 semaines et cinq souris HSD: ICR maigres (âgées de 12 semaines) sont présentés. L’appareil que nous avons utilisé stocke les données jusqu’à 8 heures. L’accès à l’animalerie locale a été limité de 7h00 à 19h00, interdisant ainsi la collecte de données pendant les heures tardives de l’après-midi, lorsque les souris sont actives. Les souris ont don...

Ici, nous décrivons une méthode simple pour implanter un glucomètre continu commercial conçu pour les patients sur des souris et fournir les scripts pour analyser les résultats.

Surveillance continue simple de la glycémie chez des souris en mouvement libre

Mice are a common model organism used to study metabolic diseases such as diabetes mellitus. Glucose levels are typically measured by tail-bleeding, which ...

Notre protocole offre une méthode simple et peu coûteuse pour surveiller les niveaux de glucose chez la souris. Le principal avantage de cette technique est qu’elle ne nécessite pas de microchirurgie difficile et n’implique pas de saignement ou de manipulation des souris. Cette méthode peut être utilisée pour identifier les phénotypes de gestion du glucose insaisissables dans des modèles murins d’obésité et de diabète.Lors de la tentative de ce protocole, l’étape la plus critique est l’insertion de la canule sous la peau et le resserrement des sutures internes afin de maintenir la canule en place. Pour commencer, rasez la ligne médiane du dos de la souris anesthésiée et utilisez une crème dépilatoire pour assurer une épilation complète. Ouvrez et chargez le capteur.Montez ensuite le capteur sur le dispositif de montage du capteur pour exposer la bande et le côté canule du capteur. La canule est vide de l’aiguille. Suturer deux points de suture coniques 5-0 à la bande des deux côtés de la canule.Pour la préparation de la peau dorsale, faites une incision de deux millimètres au centre de la zone rasée au-dessus de la colonne vertébrale à l’aide de ciseaux tranchants. Insérez brièveme

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La pince hyperinsulinémique-euglycémique, ou pince à l'insuline, est le gold standard pour évaluer action de...

Hyperinsulinémique euglycémique-pinces dans Conscient, Souris illimités

Cette vidéo explique comment effectuer un test de tolérance au glucose par voie orale sur une souris de laboratoire.

Test de tolérance au glucose par voie orale (OGTT) : mesure du métabolisme du glucose chez la souris

Cette vidéo montre une procédure de collecte d’urine de souris et d’évaluation de son taux de glucose. Pour évaluer le taux de glucose, plongez dans l’échantillon une bandelette de test recouverte d’enzymes et d’un colorant chromogène, en initiant un changement de couleur qui indique les niveaux de glucose. Pour quantifier les niveaux de glucose dans l’urine, introduisez un échantillon d’urine dans une plaque multipuits avec des concentrations de glucose croissantes, ajoutez le mélange...

Tests pour l’évaluation qualitative et quantitative des concentrations de glucose dans l’urine de souris

Cette vidéo démontre l’effet de la perfusion continue de médicament dans le cerveau de la souris sur la glycémie. Le métabolisme du glucose est évalué en prélevant du sang sur la queue d'une souris à jeun et en mesurant les niveaux de glucose avant et après l'administration orale de glucose. La tolérance à l’insuline est évaluée en injectant de l’insuline dans la souris, avec des niveaux de glucose enregistrés à des intervalles spécifiques.

Évaluation de l’effet de la perfusion continue de médicament dans le cerveau de la souris sur les taux de glucose périphérique

L’objectif de ce protocole est d’évaluer la pression artérielle systémique chez des souris conscientes se déplaçant librement à l’aide de dispositifs de radiotélémétrie implantables.

Mesure la pression artérielle à long terme chez la souris Librement mobile à l&#39;aide de télémesure

Ce protocole étudie le rôle de ligand de chemokine (C-C motif) 5 (CCL5) dans l’hypothalamus en livrant un antagoniste, MetCCL5, dans le cerveau de souris à l’aide d’un système de perfusion de cerveau pompe micro-osmotique. Cette inhibition transitoire de l’activité CCL5 interrompu insuline hypothalamique, signalisation, entraînant une intolérance au glucose et sensibilité à l’insuline systémiques périphériques.

Étudier le Signal hypothalamique de l’insuline à l’intolérance au Glucose périphérique avec un système de perfusion continue de drogues dans le cerveau de souris

L’article décrit la génération et la caractérisation métabolique de chez les souris nourries à la diète riche en gras comme un modèle de résistance à l’insuline induite par le régime alimentaire et l’obésité. Il dispose également des protocoles détaillés pour effectuer l’épreuve d’hyperglycémie provoquée par voie orale et le test de tolérance de l’insuline, suivi des altérations du corps entier de glucose métabolisme in vivo.

Étude In Vivo du métabolisme du Glucose à haute teneur en graisses régime chez les souris nourries avec épreuve d’hyperglycémie provoquée par voie orale (HGPO) et Test de tolérance à l’insuline (ITT)

Cet article décrit un protocole détaillé pour augmenter la concentration de glucose dans le liquide céphalorachidien (LCR) des souris. Cette approche peut être utile pour étudier les effets d’une glycémie élevée dans le LCR sur la neurodégénérescence, la cognition et le métabolisme périphérique du glucose chez la souris.

Implantation d’une minipompe osmotique pour augmenter la concentration de glucose dans le liquide céphalorachidien de souris

Une pince hyperglycémique est utilisée pour mesurer la libération d’insuline avec une concentration de glucose sanguin plus élevée. Un clamp hypoglycémique sert à mesurer la production de glucose induite par des réponses contre-régulatrices. Les deux méthodes utilisent la même procédure chirurgicale. Ici, nous présentons une technique de clamp pour évaluer le métabolisme systémique du glucose.

Pince hyperglycémique et pince hypoglycémique chez la souris consciente

Ici, nous présentons un protocole pour établir un modèle murin d’injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI)-transfert d’embryon (ET), nous permettant d’observer les changements liés à l’âge dans le métabolisme du glucose qui peuvent être attribués à l’ICSI, donnant ainsi un aperçu de ses impacts potentiels à long terme sur le développement humain.

Surveillance de la glycémie chez la progéniture de souris après une injection intracytoplasmique de spermatozoïdes

Apprenez une méthode simple de surveillance continue de la glycémie chez des souris en mouvement libre. Cette technique sans chirurgie invasive permet d'étudier les phénotypes métaboliques dans les modèles d'obésité et de diabète.

Surveillance continue simple de la glycémie chez des souris en mouvement libre

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