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DOI: 10.3791/64807-v
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Ici, nous décrivons un protocole décrivant comment isoler les follicules ovariens humains du tissu cortical gelé-décongelé pour effectuer des analyses d’expression génique.
Ce protocole décrit une méthode efficace pour isoler les follicules ovariens des cellules stroma environnantes afin d’évaluer les analyses d’expression génique sur ces cellules germinales. Cette technique, utilisant des isolations enzymatiques et mécaniques contrôlées, permet de récupérer les follicules tout en maintenant leur intégrité. En suivant ce protocole, le chercheur peut évaluer des expressions géniques spécifiques à partir de ces cellules.
La technique pourrait être utilisée pour mieux comprendre le déficit d’expression génique dans les follicules lié à des maladies affectant la fonction ovarienne ou après une exposition à des agents toxiques. Commencez à préparer une plaque de six puits en ajoutant cinq millilitres de solution cryoprotectrice au premier puits et cinq millilitres de milieu Leibovitz 15 avec des concentrations décroissantes de cryoprotecteur aux quatre puits suivants. Retirer un flacon contenant un fragment cortical ovarien de l’azote liquide conformément aux règles de sécurité.
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