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JoVE Journal Cancer Research
Visualizing DNA Damage Repair Proteins in Patient-Derived Ovarian Cancer Organoids via Immunofluorescence Assays

Visualisation des protéines de réparation des dommages à l’ADN dans les organoïdes du cancer de l’ovaire dérivés de patients par des tests d’immunofluorescence

Full Text
2,264 Views
04:07 min
February 24, 2023

DOI: 10.3791/64881-v

Lillian van Biljon1, Bisiayo Fashemi1, Jeimmy Rodriguez1, Olivia Graham1, Amanda Compadre1, Katherine Fuh1,2, Dineo Khabele1, Mary Mullen1

1Washington University in St. Louis, 2University of California San Francisco

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le présent protocole décrit des méthodes d’évaluation des protéines de réparation des dommages à l’ADN dans les organoïdes du cancer de l’ovaire dérivés de patientes. Vous trouverez ici des méthodes complètes de placage et de coloration, ainsi que des procédures de quantification détaillées et objectives.

L’étude de la réponse aux dommages de l’ADN est nécessaire pour comprendre la physiopathologie des biomarqueurs potentiels du cancer de l’ovaire dans le cadre d’une nouvelle thérapie ciblée. Cette technique permet à l’échantillon de rester intact et permet l’examen des antigènes dans leur lieu d’action. Ce protocole est rapide et peut être adapté à tout antigène susceptible d’immunofluorescence.

Cette méthode donne un aperçu du cancer de l’ovaire et des processus de réparation des dommages à l’ADN impliqués dans la chimiothérapie et la résistance aux inhibiteurs de PARP. Ces méthodes peuvent être appliquées à d’autres domaines d’étude impliquant l’utilisation de cultures 3D et d’organoïdes. Pour commencer, aspirez les milieux des organoïdes irradiés et incubés sans perturber la matrice 3D.

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