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DOI: 10.3791/64920-v
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This article presents a highly efficient and reproducible method to quantify single-stranded DNA, a marker of replication stress in various cell lines. The method is particularly relevant for studying ovarian cancers and is suitable for high-throughput applications.
Ici, nous décrivons une méthode basée sur l’immunofluorescence pour quantifier les niveaux d’ADN simple brin dans les cellules. Cette méthode efficace et reproductible peut être utilisée pour examiner le stress de réplication, une caractéristique commune à plusieurs cancers de l’ovaire. De plus, ce test est compatible avec un pipeline d’analyse automatisé, ce qui augmente encore son efficacité.
Notre protocole présente une méthode très efficace et facilement reproductible pour quantifier l’ADN simple brin, qui est un marqueur du stress de réplication dans une variété de lignées cellulaires. De plus, sa simplicité permet des applications et des écrans à haut débit. Cette méthode permet notamment de quantifier rapidement un stress de réplication, caractéristique de plusieurs cancers de l’ovaire.
Il se prête également à un logiciel d’analyse automatique hôte, ce qui augmente encore l’efficacité. L’ADN simple brin est maintenant activement considéré comme un biomarqueur de la réponse à la chimiothérapie ciblant les voies de réparation de l’ADN. Par conséquent, cette méthode est très applicable dans ce scénario.
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