Name: Ablation de la tige oculaire pour augmenter la maturation ovarienne chez les crabes de vase (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-31T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 28 s
Description: Découvrez l'ablation de la tige oculaire pour stimuler la maturation ovarienne chez les crabes de vase femelles. Cette technique améliore la reproduction en aquaculture crustacée sans affecter la survie des animaux.

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Cette étude a été soutenue par le ministère de l’Éducation de Malaisie dans le cadre du programme Higher Institution Centre of Excellence (HICoE), Malaisie, accrédité auprès de l’Institute of Tropical Aquaculture and Fisheries, Universiti Malaysia Terengganu (Vot No. 63933 & Vot No. 56048). Nous reconnaissons le soutien de l’Universiti Malaysia Terengganu et de Sayap Jaya Sdn. Bhd. via la subvention de recherche en partenariat privé (vot. n ° 55377). Un poste de boursier académique adjoint de l’Universiti Sains Malaysia à Khor Waiho et Hanafiah Fazhan est également reconnu.

Ce protocole est conforme au Code de pratiques malaisien pour le soin et l’utilisation des animaux à des fins scientifiques décrit par l’Association malaisienne des sciences des animaux de laboratoire. Le sacrifice des échantillons expérimentaux a été effectué conformément au National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH Publications No. 8023, révisé en 1978). Des crabes de vase femelles sexuellement prématurés (crabe de boue orange S. olivacea) ont été récoltés sur le marché local (5°66′62′′N, 102°72′33′′E) dans les zones humides de Setiu en Malaisie. L’espèce de crabe de vase a été identifiée en fonction des caractéristiques morphologiques1.
1. Prélèvement et désinfection des échantillons
<ol><li>Recueillir des crabes de vase femelles en santé, actives et prématurées (figure 1). REMARQUE : Les crabes femelles prématurés ont des lambeaux abdominaux triangulaires et de couleur claire ainsi qu’une plage CW de 80 à 85 mm.</li>
	<li>Lavez les crabes avec de l’eau du robinet chlorée (eau douce) pour enlever les débris et les parasites osmophiles.</li>
	<li>Faire tremper les crabes dans du formaldéhyde de 150 ppm avec une salinité de 20 ppt pendant 30 min.</li>
	<li>Maintenir une aération continue et douce avec des pierres aériennes pendant le traitement au formaldéhyde. La source d’aération peut provenir d’une conduite d’aération centrale ou d’une pompe d’aérateur d’aquarium.</li>
	<li>Lavez les crabes avec de l’eau de mer qui coule pour éliminer tout formaldéhyde résiduel.</li>
</ol><img alt="Comparaison de la morphologie des crabes femelles prématurés et matures ; référence d’échelle de taille incluse ; biologie marine." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65039/65039fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Figure 1 : Morphologie abdominale des crabes de vase femelles utilisés pour identifier les stades de maturation sexuelle. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65039/65039fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
2. Acclimatation
<ol><li>Transférer chaque femelle désinfectée dans un réservoir circulaire séparé de 32 L.</li>
	<li>Élever les femelles pendant 3 jours dans une salinité de 20 ppt et continuer à se nourrir deux fois par jour (matin 09h00 et soir 20h00) avec des poissons marins hachés à environ 4% à 5% du poids corporel du crabe.</li>
	<li>Enlevez les aliments excédentaires et non consommés en siphonnant avant l’alimentation du matin.</li>
	<li>Échangez 10% de l’eau de mer d’élevage du crabe (20 ppt) par jour.</li>
</ol>3. Mue induite pour la maturité sexuelle
<ol><li>Coupez toutes les jambes sauf les jambes de natation à l’aide de ciseaux stérilisés.<ol><li>Attrapez le crabe avec un filet à pelle et tenez-le soigneusement. Coupez d’abord les deux chélipèdes, puis les jambes de marche à la deuxième articulation à l’aide de ciseaux. Le crabe autotomisera automatiquement les appendices endommagés. L’anesthésie n’est pas nécessaire pour l’autotomie des membres.</li>
	</ol></li>
	<li>Laver le crabe dans de l’eau douce immédiatement après l’autotomie des membres.</li>
	<li>Transférer individuellement les crabes autotomisés dans des paniers en plastique perforés (28 cm L x 22 cm L x 7 cm H) et les placer dans un réservoir en fibre de verre (305 cm L x 120 cm L x 60 cm H). NOTE: Deux paniers peuvent être attachés et clipsés ensemble. Le panier supérieur est utilisé comme couverture afin que le crabe ne puisse pas s’échapper du panier.</li>
	<li>Utilisez un système d’aquaculture en recirculation (SAR) avec une salinité de 20 ppt et une profondeur d’eau d’au moins 10 cm pour vous assurer que tout le panier en plastique est submergé.</li>
	<li>Continuer à nourrir le crabe femelle autotomisé avec du poisson marin haché deux fois par jour à 5 % à 7 % du poids corporel du crabe.</li>
	<li>Élever les crabes jusqu’à maturité sexuelle par mue (35 jours). REMARQUE : La mue induite peut être ignorée pour la maturation ovarienne commerciale et la production de graines avec des crabes de vase femelles matures sauvages. Les femelles matures récoltées dans la nature doivent être acclimatées et directement soumises à une anesthésie par choc dû au froid et à une ablation subséquente du pédoncule oculaire.</li>
</ol>4. Anesthésie
<ol><li>Sélectionnez les femelles sexuellement matures avec un lambeau abdominal ovale de couleur foncée avec un CW &gt;86 mm (Figure 1).</li>
	<li>Attrapez les crabes avec un filet à pelle et gardez-les individuellement dans de petits aquariums pour l’anesthésie.</li>
	<li>Après 5 min de période d’acclimatation, ajouter du 2-phénoxyéthanol (2-PE) à 2 mL/L dans chaque aquarium et prévoir 15 min de traitement anesthésique.</li>
	<li>Assurez-vous que les crabes sont complètement anesthésiés par l’absence de mouvement spontané.</li>
</ol>5. Ablation de la tige oculaire
<ol><li>Technique de cautérisation<ol><li>Effectuez toutes les procédures sur une table et dans un espace ouvert.</li>
		<li>Prenez une tige métallique nickel-acier à tête plate (p. ex., un tournevis) avec un manche en bois ou en plastique et couvrez la poignée avec une serviette en coton humide.</li>
		<li>Stérilisez deux pinces chirurgicales inoxydables dans un autoclave.</li>
		<li>Préparez de l’éthanol à 70 % dans un flacon pulvérisateur et tenez-le à l’écart de toute source liée au feu, comme le chalumeau et le tournevis chauffé au rouge. Ayez du papier de soie prêt à l’emploi. REMARQUE : L’éthanol est facilement inflammable. Maintenez une distance sécuritaire des sources d’incendie.</li>
		<li>Connectez solidement un chalumeau à une bouteille de gaz (butane). ATTENTION : Suivez les instructions sur le chalumeau et la bouteille de gaz. Assurez-vous que le chalumeau est éteint lors de la connexion avec la bouteille de gaz. Lisez et suivez toutes les précautions de sécurité incendie mentionnées sur la bouteille de gaz.</li>
		<li>Portez des gants de coton épais pour éviter les blessures causées par des objets chauds.</li>
		<li>Soumettre l’extrémité de la tige métallique au feu du chalumeau jusqu’à ce que la tige métallique soit rouge vif.</li>
		<li>Couvrir le crabe anesthésié avec une serviette en coton humide. REMARQUE : Couvrez les antennes du crabe pour éviter des dommages inutiles.</li>
		<li>Tenez un œil du crabe avec des pinces stérilisées. REMARQUE: Stériliser les pinces dans un autoclave pour la première utilisation et désinfecter avec de l’éthanol à 70% pour une utilisation ultérieure sur d’autres crabes.</li>
		<li>Tenez la pointe plate en métal chauffé au rouge sur l’œil du crabe et appuyez légèrement pendant environ 10−15 s jusqu’à ce que le pédoncule de couleur orange ou orange rougeâtre. Soyez prudent lorsque vous effectuez cette étape pour éviter d’endommager les structures adjacentes. REMARQUE: Deux personnes sont nécessaires pour effectuer l’ablation du pédoncule oculaire suivant la méthode de cautérisation: une pour tenir le crabe et une autre pour effectuer la procédure d’ablation.</li>
		<li>Désinfectez les pinces avec un spray d’éthanol à 70% pour éviter toute contamination croisée entre les crabes. REMARQUE: N’effectuez cette étape qu’au moins 5 minutes après la procédure d’ablation du pédoncule oculaire pour vous assurer que les pinces sont refroidies avant la désinfection à l’aide d’éthanol à 70% pour prévenir les risques d’incendie potentiels.</li>
		<li>Après avoir effectué l’ablation du pédoncule oculaire sur tous les crabes, trempez la tige métallique en acier nickel chaud (tournevis) dans l’eau du robinet.</li>
		<li>Désinfectez la serviette avant de la réutiliser. Plusieurs serviettes peuvent être utilisées pour gagner du temps. REMARQUE: Lavez la serviette avec de l’eau du robinet et trempez-la dans de l’eau chlorée de 30 ppm pendant 5 min. Ensuite, lavez à nouveau la serviette à l’eau du robinet et trempez-la dans une solution de thiosulfate de sodium à 1 g/L.</li>
		<li>Gardez le chalumeau dans un endroit sûr après l’avoir éteint et attendez qu’il revienne à la température ambiante (environ 30 minutes) avant de le déconnecter.</li>
	</ol></li>
	<li>Technique chirurgicale<ol><li>Effectuez la procédure dans un endroit bien ventilé.</li>
		<li>Stériliser deux ciseaux chirurgicaux et des pinces dans un autoclave.</li>
		<li>Versez 50 mL d’éthanol à 70 % dans un bécher en verre de 100 mL.</li>
		<li>Portez des gants de coton épais.</li>
		<li>Tenez le crabe anesthésié et couvrez-le d’une serviette en coton humide.</li>
		<li>Tenez un œil du crabe avec des pinces stérilisées.</li>
		<li>Coupez rapidement la tige oculaire à l’aide de ciseaux chirurgicaux stérilisés. NOTE: L’hémolymphe peut être perdue de la partie blessée du crabe.</li>
		<li>Trempez les ciseaux et les pinces dans de l’éthanol à 70% après chaque utilisation et séchez-les avec du papier de soie avant de les réutiliser.</li>
	</ol></li>
</ol>6. Soins post-anesthésiques
<ol><li>Préparer de l’eau de mer filtrée à 20 ppt et conserver dans un réservoir supérieur avec une aération continue.</li>
	<li>Connectez un tuyau flexible avec le réservoir aérien pour l’écoulement gravitationnel de l’eau.</li>
	<li>Immédiatement après l’ablation du pédon, placez le crabe dans le panier et soumettez le crabe à l’eau de mer qui coule (température ambiante de l’eau : 28 °C) du réservoir supérieur.</li>
	<li>Maintenez l’eau de mer en écoulement et surveillez le crabe jusqu’à ce qu’il puisse se déplacer spontanément, ce qui indique une récupération de l’anesthésie. REMARQUE: L’eau de mer peut être préparée dans un réservoir souterrain et une pompe à eau submersible peut être utilisée pour l’écoulement de l’eau.</li>
	<li>Gardez les crabes individuellement dans de l’eau de mer de 20 ppt avec aération dans un aquarium pendant 30 minutes pour une observation plus approfondie. REMARQUE : Les crabes récupérés seront élevés individuellement dans le cadre du processus subséquent d’élevage des géniteurs.</li>
</ol>7. Observation de la maturation ovarienne
<ol><li>Élevage de géniteurs<ol><li>Transférer les crabes matures dans des bassins circulaires individuels de 32 L.</li>
		<li>Continuez à nourrir avec des poissons marins hachés (congelés à −20 °C) deux fois par jour (matin 09h00 et soir 20h00), et retirez les aliments non consommés avant le repas du matin.</li>
		<li>Élever les géniteurs individuellement pendant 30 jours dans une salinité de 20 ppt.</li>
		<li>Enlevez les matières fécales et échangez 10% de l’eau de mer (20 ppt) par jour.</li>
	</ol></li>
	<li>Dissection<ol><li>Nettoyez un plateau de dissection, des ciseaux et des pinces avec de l’éthanol à 70 %.</li>
		<li>Anesthésiez les femelles individuellement avec la méthode d’anesthésie par immersion 2-PE.</li>
		<li>Choisir au hasard les femelles nouvellement matures (après la mue des femelles prématurées) qui n’ont pas subi d’ablation du pédoncule oculaire pour confirmer leurs stades gonadiques.</li>
		<li>Sacrifiez individuellement toutes les femelles expérimentales ablées par la tige oculaire et identifiez les stades de maturation des gonades. Détruisez les ganglions thoraciques du crabe à l’aide d’un poinçon stérile pointu. Enlevez d’abord la carapace supérieure, puis l’hépatopancréas pour rendre l’ovaire visible. Observez la couleur des ovaires et identifiez le stade de maturation ovarienne (Figure 2).</li>
	</ol></li>
	<li>Identification des stades de maturation ovarienne<ol><li>Observez la couleur des ovaires à l’œil nu ou au stéréomicroscope.</li>
		<li>Identifier les stades de maturation ovarienne en fonction de la coloration30 : l’immature (stade-1) présente une couleur blanche translucide ou crème ; La maturation précoce (stade 2) montre une couleur jaunâtre pâle à claire; iii) la prématuration (stade 3) présente une couleur jaune à orange clair; et (iv) la maturité complète (stade 4) montre une couleur orange foncé à rougeâtre.</li>
	</ol></li>
</ol>

Aucun des auteurs n’a de conflit d’intérêts.

Ce protocole a été développé pour l’ablation du pédoncule oculaire du crabe de vase, Scylla spp., et peut être appliqué comme méthode efficace pour induire la maturation des gonades. Ce protocole peut être facilement reproduit pour la maturation ovarienne commerciale des crabes de vase et peut être mis en œuvre pour réduire la période de latence (temps d’un frai à l’autre) dans la production de graines de crabe de vase.
L’ablation oculaire des crustacés (c.-à-d. crevettes d’eau douce,...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/65039">Eyestalk Ablation to Increase Ovarian Maturation in Mud Crabs</a>. The Introduction, Protocol, Discussion and References were&#160;updated.

Erratum: Eyestalk Ablation to Increase Ovarian Maturation in Mud Crabs

Les quatre espèces de crabes de vase appartenant au genre Scylla sont des espèces de crustacés commercialement importantes en aquaculture 1,2. La croissance des crustacés, y compris les crabes de vase, et leur transformation de la phase prématurée (subadulte ou pubertaire) à la phase sexuellement mature (adulte) se produisent par un processus de mue qui implique l’excrétion périodique d’exosquelettes plus anciens et plus petits. La largeur de la carapace (CW), les chélipèdes et les morphologies des lambeaux abdominaux sont largement utilisés pour déterminer la maturité sexuelle de Scylla spp. 3,4,5. Le processus de mue est régulé par l’action de diverses hormones et nécessite une énorme quantité d’énergie6. En plus du processus normal de mue, la perte de membres, volontaire ou induite par des facteurs externes, accélère la mue des crabes sans affecter leur taux de survie 7,8,9. Par conséquent, l’autotomie des membres est couramment utilisée pour l’induction de la mue dans l’industrie de l’élevage du crabe de vaseà carapace molle 7,9.
L’ablation unilatérale ou bilatérale de la tige oculaire est surtout populaire chez les crevettes d’eau douce et les crevettes marines pour la maturation des gonades et la production de graines10,11,12,13. Les techniques courantes d’ablation du pédoncule oculaire chez les crustacés sont les suivantes: (i) ligature à la base du pédoncule oculaire à l’aide d’une ficelle14,15; ii) cautérisation du pédoncule oculaire à l’aide de pinces chaudes ou d’appareils d’électrocautérisation16; iii) l’ablation ou le pincement direct du pédoncule oculaire pour laisser une plaie ouverte12; et (iv) l’ablation du contenu de la tige oculaire par incision après avoir tranché la partie distale de l’œil avec un rasoir17. Les organes X du pédoncule oculaire sont des organes endocriniens importants chez les crustacés car ils régulent les hormones hyperglycémiques des crustacés (CHH), les hormones inhibitrices de la mue (MIH) et les hormones inhibitrices de la vitellogenèse (VIH)6,18,19,20,21,22. Les organes X de la tige oculaire (ou le complexe des glandes sinusales) synthétisent et libèrent des hormones inhibitrices des gonades (GIH), également connues sous le nom d’hormones inhibant la vitellogenèse (VIH), appartenant à la famille des hormones neuropeptidiques6. L’ablation unilatérale ou bilatérale du pédoncule oculaire réduit la synthèse de la GIH, ce qui entraîne la dominance des hormones stimulantes (c.-à-d. les hormones stimulant les gonades, GSH) et l’accélération du processus de maturation ovarienne chez les crustacés23,24,25,26. Sans l’influence de la GIH après l’ablation de la tige oculaire, les crustacés femelles consacrent leur énergie au développement des ovaires27. Il a été constaté que l’ablation unilatérale du pédoncule oculaire est suffisante pour l’induction de la maturation ovarienne chez les crustacés11 et que le pédoncule oculaire ablé des crevettes et des crabes peut se régénérer après plusieurs mues28. Quatre stades de développement ovarien ont été enregistrés chez Scylla spp. : i) immature (stade 1), ii) maturation précoce (stade 2), iii) prématuration (stade 3) et iv) pleine maturité (stade 4)29,30. Le stade ovarien immature se trouve chez les femelles immatures. Après la mue pubertaire et l’accouplement, l’ovaire immature commence à se développer et finit par mûrir (stade 4) avant de frayer31.
Un protocole d’ablation du pédoncule oculaire est essentiel au développement du stock de géniteurs de crabe de vase et à la production de semences. Sur le marché alimentaire mondial, les crabes de vase matures avec des ovaires complètement matures (stade 4) plutôt que les crabes avec une teneur musculaire plus élevée sont préférés par les consommateurs et, par conséquent, ont une valeur commerciale plus élevée, même plus élevée que les gros mâles. Il n’existe pas de protocole complet pour l’ablation du pédoncule oculaire des crabes de boue. Le protocole d’ablation du pédoncule oculaire dans ce travail minimise le stress en utilisant des crabes entièrement anesthésiés et minimise les blessures physiques au personnel causées par les morsures de crabe. Ce protocole est simple et rentable. Ici, nous présentons un protocole pour l’ablation du pédoncule oculaire de Scylla spp. qui peut induire la maturation de la gonade. Deux techniques d’ablation de la tige oculaire (cautérisation et chirurgie) ont été testées et leur efficacité comparée en fonction du taux de développement gonadique des crabes de boue femelles.

<table><tbody><tr><td>Tube d’aération&nbsp ;</td><td>Ming Yu Trois</td><td>N/A</td><td>Aquarium et animalerie</td></tr><tr><td>Airstone</td><td>Ming Yu Trois</td><td>N/A</td><td>Aquarium et animalerie</td></tr><tr><td>Machine autoclave</td><td>HIRAYAMA MANUFACTURING CORPORATION</td><td>N/A</td><td>MADE IN JAPAN</td></tr><tr><td>Poudre de blanchiment (Hi-Chlon 70 %)</td><td>Nippon Soda Co.Ltd,Japan</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Chalumeau&nbsp ;</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Réservoir circulaire (32L)</td><td>BEST PLASTIC INDUSTRY SDN. BHD.&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Gants en coton (épais)&nbsp ;</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Serviette en coton</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Thermomètre numérique</td><td>Hanna Instrument</td><td>HI9814</td><td>Hanna&nbsp ; Instruments&nbsp ; GroLine Hydroponics étanche pH / EC / TDS / Temp. Compteur portable HI9814</td></tr><tr><td>Pied à coulisse numérique</td><td>INSIZE Co., Ltd.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Plateau de dissection</td><td>Hatcheri AKUATROP&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>Centre de Recherche de l’Universiti Malaysia Terengganu</td></tr><tr><td>Flacon compte-gouttes/Pipettes en plastique Dropper</td><td>Shopee Malaysia</td><td>N/A</td> N<td>/A</td></tr><tr><td>Éthanol 70 %</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>033361.M1</td><td>Dilué à 70 % à l’aide d’eau double distillée</td></tr><tr><td>Réservoir en fibre de verre (1 tonne)</td><td>Hatcheri AKUATROP&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>Centre de recherche de l’Universiti Malaysia Terengganu</td></tr><tr><td>Sable fin</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>collecté sur la plage de l’Universiti Malaysia Terengganu</td></tr><tr><td>Trousses de premiers secours</td><td>Watsons</td><td>Malaysia N/</td><td>A N/A</td></tr><tr><td>Tige métallique en acier au nickel à tête plate (tournevis)</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Formaldéhyde</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>119690010</td><td></td></tr><tr><td>Bouteille de gaz (gaz butane) pour chalumeau</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Pistolet à gaz (tête longue)</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Gobelet en verre (100 mL))</td><td>Corning Life Sciences</td><td>1000-100</td><td></td></tr><tr><td>Sac de glace&nbsp ;</td><td>Watsons Malaysia</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Paniers en plastique perforés&nbsp ;</td><td>Eco-Shop Marketing Sdn. Bhd.</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>tuyau en PVC 15mm</td><td>Bina Plastic Industries Sdn Bhd (QG)</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Réfractomètre</td><td>ATAGO CO.,LTD.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Réfrigérateur</td><td>Sharp Corporation Japon</td><td>N/A</td><td>Congélateur coffre SHARP 110L - SJC 118</td></tr><tr><td>Scoop net</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td></td><td>N/A</td></tr><tr>Hatcheri<td>d’eau de mer</td><td>AKUATROP&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>Centre de recherche de l’Universiti Malaysia Terengganu</td></tr><tr><td>Tuyau de siphonnage</td><td>MR D.I.Y. Group Berhad</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Flacon pulvérisateur</td><td>Mr. DIY Sdn Bhd</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Pince chirurgicale en acier inoxydable&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Ciseaux chirurgicaux en acier inoxydable&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>N/A N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pompe à eau submersible&nbsp ;</td><td>Modèle AS</td><td>N/A</td><td>: Astro 4000</td></tr><tr><td>Teinture de solution iodée (Povidone iodée)</td><td>Farmasi Fajr Sdn Bhd</td><td>N/A</td><td>N/A</td></tr><tr><td>Papier de soie&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Aquarium en plastique transparent</td><td>Ming Yu Three</td><td>N/A</td><td>aquarium et animalerie</td></tr><tr><td>Table étanche</td><td>Hatcheri AKUATROP&nbsp ;</td><td>N/A</td><td>Centre de Recherche de l’Universiti Malaysia Terengganu</td></tr></tbody></table>

ablation de la tige oculaire pour augmenter la maturation ovarienne chez les crabes de vase

Eyestalk Ablation to Increase Ovarian Maturation in Mud Crabs

Les crabes de vase (Scylla spp.) sont des espèces de crustacés commercialement importantes que l’on trouve dans toute la région indo-pacifique occidentale. Pendant la culture, l’induction de la maturation ovarienne est importante pour répondre à la demande des consommateurs de crabes de vase matures et accélérer la production de graines. L’ablation de la tige oculaire est un outil efficace pour améliorer la maturation ovarienne chez les crabes de boue. Cependant, il n’existe pas de protocole standard pour l’ablation du pédoncule oculaire des crabes de vase. Dans cette étude, deux techniques d’ablation du pédoncule oculaire sont décrites : la cautérisation (l’utilisation de métal chaud pour ablater le pédoncule oculaire d’un crabe anesthésié) et la chirurgie (l’ablation du pédoncule oculaire à l’aide de ciseaux chirurgicaux). Avant l’ablation du pédoncule oculaire, les femelles sexuellement matures (CW > 86 mm) ont été anesthésiées à l’aide d’un sac de glace (−20 °C) avec de l’eau de mer. Lorsque la température de l’eau a atteint 4 °C, le sac de glace a été retiré de l’eau. L’eau de mer qui coule (température ambiante : 28 °C) a été utilisée pour récupérer de l’anesthésie immédiatement après l’ablation du pédon. La mortalité ne s’est pas produite pendant ou après le processus d’ablation du pédoncule oculaire. Le protocole d’ablation du pédoncule oculaire présenté ici a accéléré la maturation ovarienne des crabes de boue.

Maturation des gonades Des tissus ovariens blanc crème (ovaires immatures, stade 1) ont été trouvés chez 100 % des femelles disséquées (n = 6) avant d’effectuer l’ablation du pédoncule oculaire (Figure 2). Le taux de maturation des gonades des crabes femelles ablées par le pédoncule oculaire (n = 63; 31 femelles avec la technique de cautérisation et 32 femelles avec la technique chirurgicale) était plus élevé que chez les crabes femelles qui n’ont pas subi d’ablation du p...

Deux protocoles d’ablation du pédoncule oculaire (c.-à-d. des approches de cautérisation et de chirurgie) ont été effectués sur des crabes femelles anesthésiés. L’ablation oculaire des crabes de vase a accéléré la maturation des ovaires sans diminuer le taux de survie.

Ablation de la tige oculaire pour augmenter la maturation ovarienne chez les crabes de vase

Mud crabs (Scylla spp.) are commercially important crustacean species that can be found throughout the Indo-West Pacific region. During culture, the ...

Le protocole décrit minimise le stress lors de l’ablation oculaire des crabes de boue, réduisant ainsi l’occurrence de la mortalité due à l’ablation de la tige oculaire. L’efficacité du temps est la clé pour minimiser le stress des animaux. Assurez-vous que tout est préparé avant d’effectuer la procédure.Commencez par laver les crabes de vase femelles en bonne santé, actives et prématurées avec de l’eau du robinet chlorée pour éliminer les débris et les parasites. Faire tremper les crabes dans du formaldéhyde pendant 30 minutes. Assurer une aération continue et douce avec des pierres d’air pendant le traitement au formaldéhyde.Ensuite, utilisez de l’eau de mer courante pour laver les crabes afin d’éliminer tout formaldéhyde résiduel. Pour effectuer la cautérisation de la tige oculaire du crabe, commencez par chauffer la pointe d’une tige métallique avec un chalumeau jusqu’à ce que la tige soit rouge vif. Couvrez un crabe anesthésié avec une serviette en coton humide et tenez un œil du crabe avec une pince stérilisée.Appuyez sur la pointe en métal rouge chaud sur l’œil du crabe pendant environ 10 à 15 secondes jusqu’à ce que le pédoncule de couleur orange ou orange rougeâtre. Désinfectez les pinces avec de l’éthanol à 70 % et nettoyez-les avec du papier de soie stérile pour éviter toute contamination croisée entre les crabes. Après avoir effectué l’ablation sur tous les crabes, trempez la tige métallique dans l’eau du robinet.Pour effectuer une ablation chirurgicale, tenez le crabe anesthésié à l’aide de gants de coton épais et couvrez-le d’une serviette en coton humide. Utilisez des pinces stériles pour tenir un œil du crabe et coupez rapidement le pédoncule oculaire avec des ciseaux chirurgicaux. Après la chirurgie, préparez un réservoir aérien avec 20 parties par millier d’eau de mer filtrée avec une aération continue.Connectez un tuyau flexible avec le réservoir pour l’écoulement gravitationnel de l’eau. Placez le crabe dans un panier et soumettez-le à l’eau de mer qui coule du réservoir supérieur. Surveillez le crabe sous l’eau de mer qui coule jusqu’à ce qu’il puisse se déplacer spontanément.Placez les crabes individuellement dans un autre aquarium avec de l’eau de mer pendant 30 minutes pour une observation plus approfondie. Choisir au hasard les femelles nouvellement matures qui n’ont pas subi d’ablation du pédoncule oculaire. Après avoir enlevé la carapace supérieure et l’hépatopancréas, observer et identifier le stade de maturation de l’ovaire du crabe.Les stades de maturation ovarienne peuvent être identifiés en fonction de leur coloration, le premier stade immature étant translucide ou blanc crème, le stade deux précoce étant jaune à jaune clair, le stade trois pré-maturation étant jaune à orange clair et le stade quatre complètement mature étant de couleur orange foncé à rougeâtre. Le taux de maturation des gonades était plus élevé chez les femelles ablées par la tige oculaire que chez celles qui n’avaient pas été ablées. Le pourcentage le plus élevé d’ovaires de stade trois a été trouvé chez les crabes femelles ablés de la tige oculaire.L’analyse unidirectionnelle de la variance a montré des différences significatives entre les stades expérimentaux de maturation ovarienne des crabes femelles. Le groupe témoin avait une prévalence plus élevée de crabes femelles immatures par rapport aux groupes ablés. Seuls les groupes ablés ont été en mesure de produire des crabes femelles de stade quatre à partir d’un stade immature 30 jours après le traitement.Il est important de s’assurer que le pédoncule oculaire du crabe de vase a été complètement enlevé à la suite d’une cautérisation ou d’une technique chirurgicale. L’ablation oculaire permet aux producteurs de crustacés d’induire facilement la maturation ovarienne et la mue. Il permet également aux chercheurs d’étudier plus en détail le rôle de la tige oculaire dans la régulation de la reproduction du crabe de vase.

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Ablation de la tige oculaire pour augmenter la maturation ovarienne chez les crabes de vase

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