Isolement sans marquage en deux étapes des mitochondries pour améliorer la découverte et la quantification des protéines

Notre laboratoire étudie les changements dans les mitochondries et le métabolisme énergétique et leur impact sur les processus sains et pathologiques tels que l’activation immunitaire, le cancer ou les troubles métaboliques. Notre objectif est d’aider à développer de nouveaux traitements pour une grande variété de troubles en fournissant une meilleure compréhension de la fonction mitochondriale et du métabolisme énergétique. Des outils tels que la protéomique basée sur la spectrométrie de masse, la métabolomique et les criblages génétiques CRISPR-Cas9 sont de plus en plus populaires pour identifier les mécanismes moléculaires de la fonction mitochondriale et du métabolisme énergétique dans des types et des environnements cellulaires spécifiques.

Contrairement à d’autres méthodes, notre protocole utilise deux étapes de purification, la centrifugation différentielle et la capture immunitaire pour l’isolement mitochondrial. Cela offre plusieurs avantages, comme une meilleure élimination des contaminants, et c’est aussi un outil puissant pour identifier de nouvelles protéines mitochondriales. Notre protocole donne un aperçu de la composition et, par conséquent, de la fonction mitochondriale dans différents types de cellules et environnements.

Cela peut nous aider à mieux comprendre les processus normaux comme l’activation immunitaire, mais aussi les processus pathologiques comme le cancer. Nous nous concentrerons sur les macrophages mitochondriaux. Nous testerons comment la composition des mitochondries change au cours de la réponse immunitaire pour mieux comprendre leur fonction.

Nos résultats pourraient conduire à un développement de médicaments avec, par exemple, des effets anti-inflammatoires.