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Protocole de dosage de cisaillement pour la détermination des propriétés d’un matériau unicellulaire
Protocole de dosage de cisaillement pour la détermination des propriétés d’un matériau unicellulaire
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JoVE Journal Cancer Research
Shear Assay Protocol for the Determination of Single-Cell Material Properties

Protocole de dosage de cisaillement pour la détermination des propriétés d’un matériau unicellulaire

Full Text
2,409 Views
08:19 min
May 19, 2023

DOI: 10.3791/65333-v

Luke J. Holen*1, Killian Onwudiwe*1, Julian Najera1, Maksym Zarodniuk1, John D. Obayemi2, Winston O. Soboyejo2, Meenal Datta1

1Department of Aerospace and Mechanical Engineering,University of Notre Dame, 2Departments of Mechanical and Biomedical Engineering,Worcester Polytechnic Institute

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole décrit la quantification des propriétés mécaniques des lignées cellulaires cancéreuses et non cancéreuses in vitro. Les différences conservées dans la mécanique des cellules cancéreuses et normales peuvent agir comme un biomarqueur qui peut avoir des implications dans le pronostic et le diagnostic.

Les caractéristiques physiques du cancer sont des sujets relativement nouveaux et passionnants dans la recherche sur le cancer. Notre recherche vise à caractériser spécifiquement les propriétés mécaniques des cellules cancéreuses et non cancéreuses afin de mieux comprendre les mécanismes physiques par lesquels les cellules cancéreuses survivent aux forces de cisaillement dans le corps et envahissent le système immunitaire. Le développement récent de ma période de recherche est l’utilisation de dispositifs microfluidiques et de techniques à haut débit pour étudier à plus grande échelle, la déformabilité cellulaire et les propriétés viscoélastiques des cellules, ainsi que dans l’identification de nouveaux biomarqueurs tels que la régulation des protéines du cytosquelette et des protéines de la matrice extracellulaire pour le diagnostic précoce du cancer.

Les défis expérimentaux actuels impliqués dans ce domaine sont la complexité du microenvironnement tumoral, le débit de mise à l’échelle, la traduction clinique, la normalisation et la reproductibilité, et l’intégration des données multimodales. Ainsi, certaines des conclusions importantes que j’ai établies dans ce domaine à partir de mes recherches antérieures et de mes recherches actuelles sont que les cellules cancéreuses peuvent être distinguées des cellules normales en fonction de leurs réponses aux facteurs de stress mécaniques. Et la mesure dans laquelle la résistance aux facteurs de stress mécaniques dépend de l’intégrité structurelle, qui est dictée dans une mesure raisonnable par la présence de protéines cytosquelettiques comme l’actine filamenteuse et d’autres protéines structurelles dans la cellule.

Notre protocole offre une approche simple, reproductible et non destructive pour caractériser mécaniquement les cellules cultivées. Cela contraste avec d’autres techniques comme l’AFM et les pincettes optiques, qui nécessitent un certain niveau d’expertise technique pour effectuer une expérience dans un débit relativement faible. Dans le cadre de l’utilisation de la technique de l’acide de cisaillement, fera grandement progresser la caractérisation mécanique unicellulaire et contribuera également à de nombreux domaines transversaux tels que le diagnostic des maladies rares, le diagnostic et les soins personnalisés et la surveillance des interactions médicamenteuses unicellulaires.

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