Génération de podocytes dérivés de patients à partir de biopsies cutanées

Ce manuscrit décrit un protocole en deux étapes pour générer des podocytes spécifiques au patient à partir de fibroblastes dermiques via une reprogrammation épisomique en cellules souches pluripotentes induites par l’homme (CSPhi) et une différenciation ultérieure en podocytes.

Nous décrivons un protocole de génération de podocytes humains par reprogrammation épisomique des fibroblastes dermiques en cellules souches pluripotentes induites par l’homme. Ces cellules ressemblent beaucoup mieux aux podocytes in vivo qu’aux podocytes immortalisés en termes de processus alimentaires des podocytes et d’expression du marqueur spécifique des podocytes. Les podocytes sont des cellules différenciées en phase terminale.

Par conséquent, ces cellules ne prolifèrent plus et l’analyse primaire des podocytes en culture cellulaire est limitée. Même si le problème du nombre limité de cellules a été surmonté par l’utilisation de podocytes immortalisés conditionnellement, ces podocytes présentent un phénotype et un comportement dédifférenciés, ce qui remet en question leur utilisation en recherche fondamentale. Avec l’aide de cellules souches pluripotentes induites, les podocytes peuvent être générés in vitro dans un nombre cellulaire presque illimité avec une morphologie typique des podocytaires comprenant des processus alimentaires distincts et l’expression du marqueur spécifique du podocyte.

Lors de l’utilisation des cellules souches spécifiques au patient pour se différencier en podocytes, il est possible d’étudier les altérations spécifiques de la maladie de la cellule ex vivo. Dans le cas, la biopsie cutanée initiale a été prise sur un patient atteint d’une maladie génétique des podocytaires. Les podocytes générés avec notre protocole sont des cellules malades personnalisées porteuses de la mutation du patient.

Ainsi, ces cellules représentent un modèle ex vivo amélioré pour étudier les maladies podocytaires et les substances thérapeutiques potentielles dans une approche individualisée.