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Agrobacterium tumefaciens-Médié par le génie génétique des microalgues vertes, Chlor...
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JoVE Journal Bioengineering
Agrobacterium tumefaciens-Mediated Genetic Engineering of Green Microalgae, Chlorella vulgaris

Agrobacterium tumefaciens-Médié par le génie génétique des microalgues vertes, Chlorella vulgaris

Full Text
4,735 Views
08:00 min
October 27, 2023

DOI: 10.3791/65382-v

M. Reza Roushan1, Chuchi Chen1, Parisa Ahmadi1, Valerie C. A. Ward1

1Department of Chemical Engineering,University of Waterloo

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole décrit l’utilisation de la transformation médiée par Agrobacterium tumefaciens (AMT) pour intégrer le(s) gène(s) d’intérêt dans le génome nucléaire de la microalgue verte Chlorella vulgaris, conduisant à la production de transformants stables.

Le champ de la recherche s’est concentré sur le développement et l’optimisation d’un protocole de transformation de la chlorella vulgaris. Nous avons cherché à créer une souche transgénique stable de chlorella vulgaris à l’aide d’Agrobacterium tumefaciens et d’un plasmide spécifique, pCAMBIA1302, qui leur a permis d’insérer un gène d’intérêt et le potentiel d’applications biotechnologiques. Ingénierie métabolique et biologie synthétique, microscopie et imagerie, édition de gènes CRISPR-Cas9, bioinformatique, modélisation informatique, télédétection et imagerie satellitaire, nanotechnologie, bioprocédés et traitement en aval.

Cette étude présente un protocole optimisé de transformation du milieu d’Agrobacterium tumefaciens pour la microalgue chlorella vulgaris à l’aide d’un plasmide et d’un marqueur spécifiques. Il jette les bases de l’amélioration des microalgues par la technologie, en surmontant les limites précédentes des outils de transformation fiables pour C. vulgaris.

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Transformation médiée par Agrobacterium Tumefaciens Génie génétique Microalgues vertes Chlorella vulgaris Protocole AMT Gène rapporteur Protéine fluorescente verte (mGFP5) Marqueur de résistance aux antibiotiques Hygromycine B Sélection des mutants Milieu de tris-acétate-phosphate (TAP) Transformation stable Cassette d’ADN-T Colonies transgéniques PCAMBIA1302 Vecteur d’expression végétale

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