Induction d’une pseudogrossesse chez les souris femelles sans avoir besoin de mâles vasectomisés avant le transfert d’embryons non chirurgical ou l’insémination artificielle
7 juillet 2023
La méthode de manipulation cervicale présentée peut induire une pseudogrossesse chez la souris sans avoir besoin de reproduire des femelles avec des mâles vasectomisés. L’induction de la pseudogrossesse est nécessaire pour le succès du transfert d’embryons non chirurgical et de l’insémination artificielle non chirurgicale, qui sont également présentés.
Notre principal objectif de recherche est le développement de techniques de procréation assistée qui apportent des raffinements et des réductions conformes aux 3R de l’expérimentation animale. Nous avons développé des procédures de transfert d’embryons non chirurgical et d’insémination artificielle non chirurgicale pour les souris et une procédure de transfert d’embryons non chirurgicale pour les rats. Avec l’ajout de la procédure de manipulation cervicale pour fournir des femelles pseudo gravides, nous créons des améliorations 3R et la reproduction assistée chez les rongeurs.
Les protocoles décrits ici fournissent des méthodes simplifiées pour récupérer les petits en utilisant des méthodes de transfert d’embryons non chirurgicales et l’insémination artificielle chez la souris. Le protocole de manipulation cervicale permet d’affiner les procédures produisant des receveuses pseudo-enceintes pour les techniques de procréation assistée. Il réduit le nombre de femelles nécessaires en tant que pseudo-femmes enceintes et élimine le besoin de mâles vasectomisés.
Les protocoles décrits ici peuvent être utilisés pour la gestion stratégique du vivarium. Les protocoles peuvent être utilisés avec la cryoconservation, la fécondation in vitro, la redérivation, la production de cohortes d’appariement d’âge et la production d’animaux génétiquement modifiés.
Aperçu
Cette étude présente une méthode de manipulation cervicale induisant une pseudogestation chez la souris, nécessaire pour réussir le transfert embryonnaire non chirurgical et l'insémination artificielle. Cette avancée réduit le besoin d'élevage et améliore le bien-être animal en respectant les principes des 3R.
Composantes clés de l'étude
Domaine de recherche
- Techniques de reproduction assistée
- Protection animale et les 3R
- Modèles rongeurs
Contexte général
- Problèmes actuels liés aux méthodes d'élevage des femelles pseudogestantes
- Importance de réduire le nombre d'animaux d'élevage
- Nécessité de procédures efficaces pour le transfert d'embryons chez les rongeurs
Méthodes utilisées
- Manipulation cervicale pour induire une pseudogestation
- Souris (souche CD1)
- Transfert embryonnaire non chirurgical et techniques d'insémination artificielle
Résultats principaux
- La manipulation cervicale crée avec succès des femelles pseudogestantes sans nécessiter de mâles vasectomisés.
- Des protocoles optimisés améliorent la récupération des petits par des techniques non chirurgicales.
- Les méthodes sont utiles pour la cryoconservation, la fécondation in vitro et la production d'animaux génétiquement modifiés.
Conclusions
- L'étude démontre une méthode efficace pour produire des souris femelles pseudogestantes, améliorant ainsi la reproduction assistée.
- Les résultats sont importants pour accroître l'efficacité de la gestion des animaleries et pour offrir de meilleures normes de bien-être dans la recherche.
Questions fréquemment posées
Pertinence industrielle pour les cadres
L'induction efficace de la pseudogestation chez les souris femelles est essentielle pour des protocoles de reproduction assistée évolutifs et reproductibles en recherche préclinique. La technique standardisée de manipulation cervicale élimine le besoin de mâles vasectomisés, simplifiant ainsi les opérations en animalerie et soutenant les principes des 3R. Cette avancée améliore la fiabilité et la prévisibilité de la génération de receveuses pseudogestantes pour le transfert d'embryons et l'insémination artificielle, influant directement sur l'allocation des ressources et le rendement expérimental.
Applications stratégiques en recherche et développement en biopharmaceutique
Début de la découverte et validation de la cible
- Permet une génération rapide de cohortes de receveuses pour des modèles animaux génétiquement modifiés et appariés par âge.
- Facilite les protocoles de redérivation et de cryoconservation en assurant une disponibilité rapide de femelles pseudogestantes.
- Réduit la variabilité biologique en standardisant la préparation des receveuses dans les différentes expériences.
Élaboration de tests et criblage
- Facilite la préparation de modèles animaux validés pour le criblage phénotypique en aval et les tests fonctionnels.
- Améliore la reproductibilité et la reproductibilité à grande échelle des protocoles de transfert d'embryons et d'insémination artificielle.
- Permet des résultats quantitatifs constants pour évaluer les paramètres reproductifs et développementaux.
Recherche translationnelle et préclinique
- S'aligne sur la continuité translationnelle en permettant la production de modèles génétiquement modifiés pour les études de maladies.
- Réduit les goulots d'étranglement opérationnels dans la génération de modèles précliniques et l'expansion des cohortes.
- Permet une avancée ajustée aux risques en minimisant les échecs procéduraux et l'utilisation d'animaux.
Intégration des pipelines et des flux de travail
Ce protocole de manipulation cervicale s'intègre dans la continuité de la reproduction assistée, depuis la découverte précoce jusqu'au développement de modèles précliniques et à la gestion des cohortes.
- Biologie de la découverte : Simplifie les tests d'hypothèses et la validation de modèles en assurant une préparation fiable des receveuses.
- Criblage : Normalise la préparation des modèles animaux pour des tests reproductifs et développementaux à haut débit.
- Analytique : Fournit des données quantitatives sur la gestation et la taille des portées afin d'orienter la conception expérimentale et la planification des ressources.
- Recherche translationnelle : Permet une continuité dans la génération et le maintien de modèles animaux pertinents pour les maladies.
- Réutilisation en entreprise : Offre une capacité réutilisable et non chirurgicale pour diverses applications de reproduction assistée dans plusieurs programmes de recherche.
Impact opérationnel et organisationnel
- Valeur scientifique : Accroît la confiance prédictive dans les résultats reproductifs et réduit l'ambiguïté mécanistique dans la génération de modèles.
- Valeur opérationnelle : Renforce la standardisation, la reproductibilité et l'évolutivité des flux de travail en reproduction assistée.
- Valeur stratégique : Améliore la prise de décision « aller/non-aller » et l'efficacité du capital en réduisant l'utilisation d'animaux et la complexité des procédures.
- Impact sur le portefeuille : Favorise la priorisation et l'avancement, ajustées au risque, des modèles génétiquement modifiés et pertinents pour les maladies.
Considérations relatives à la mise en œuvre
- Nécessite une expertise technique en matière de synchronisation de l'œstrus et de manipulation cervicale.
- Suppose l'accès à un équipement de base tel que des pipettes, des spéculums et un microscope pour l'évaluation cytologique.
- Exige une standardisation entre les équipes afin d'assurer la reproductibilité et de minimiser la variabilité.
- Peut être adapté à différentes souches de souris et potentiellement à d'autres modèles de rongeurs moyennant une optimisation du protocole.
- Ses limites incluent la nécessité d'une stadification précise de l'œstrus et d'une formation adéquate de l'opérateur pour maximiser l'efficacité.
