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DOI: 10.3791/65538-v
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Ici, nous discutons d’un flux de travail pour préparer, disséquer, monter et imager des cerveaux d’explants vivants de larves du troisième stade de Drosophila melanogaster afin d’observer la dynamique cellulaire et subcellulaire dans des conditions physiologiques.
Nos recherches portent sur l’étude de l’impact de la division cellulaire asymétrique ou DCA sur la prolifération et la différenciation des cellules souches. Nous utilisons les cellules souches neurales ou les neuroblastes de la drosophile comme modèle pour comprendre les mécanismes, les régulations et les impacts de la division cellulaire asymétrique sur le développement et la neurogenèse. Les récents développements de l’intelligence artificielle ont fait des progrès majeurs dans la quantification et l’analyse d’images, ce qui a considérablement fait progresser le domaine de l’imagerie des cellules vivantes.
Maintenir la qualité de l’échantillon pour un film à long terme est un défi de longue date. Bien qu’il soit judicieux d’observer un échantillon pendant huit à 10 heures, les contraintes logistiques, telles que les exigences d’imagerie de l’échantillon et les outils d’imagerie disponibles, rendent la tâche difficile. Notre protocole aborde ce problème en démontrant l’imagerie à long terme sans impact sur la qualité de l’échantillon.
Notre technique pourrait être facilement adoptée et appliquée sur le terrain par les nouveaux arrivants. Avec un peu de temps et de pratique, on peut générer des films à court et à long terme, qui ont le potentiel de produire des données perspicaces et significatives.
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