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PCR bloquante de type sauvage combinée au séquençage de Sanger pour la détection de mutations som...
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JoVE Journal Genetics
Wild-type Blocking PCR Combined with Sanger Sequencing for Detection of Low-frequency Somatic Mutation

PCR bloquante de type sauvage combinée au séquençage de Sanger pour la détection de mutations somatiques à basse fréquence

Full Text
1,462 Views
07:17 min
August 23, 2024

DOI: 10.3791/65647-v

Haixia Xu*1, Junyan Lu*2, Zhou Li1, Ran Chen1

1Kindstar Global Technology Inc., 2Yongzhou Central Hospital

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

Cet article présente l’application d’une méthode de détection à basse fréquence basée sur le séquençage de Sanger dans le lymphome angio-immunoblastique. Fournir une base pour l’application de cette méthode à d’autres maladies.

Transcript

Nous nous intéressons à la compréhension des mutations somatiques à basse fréquence dans les tissus cancéreux. Cet article présente l’application de la méthode de détection des mutations à basse fréquence basée sur notre séquençage de Sanger dans le test de lymphome angio-immunoblastique, fournissant une base pour l’application de cette méthode à d’autres tests de maladies. Il existe actuellement des méthodes de détection des mutations à basse fréquence telles que la PCR quantitative, la PCR numérique et le NGS.

Mais il n’y a pas de rapport sur la détection de la mutation basse fréquence IGHV7-3 basée sur le séquençage de Sanger, dont la limite de détection n’est que de 5 % à 20 %. Notre technique offre une sensibilité élevée, un faible coût et une grande flexibilité, ce qui en fait un choix idéal pour la détection de mutations à basse fréquence. Nous prévoyons de concevoir des amorces pseudogéniques ainsi que des amorces GCR multiplexes pour explorer leur application dans les maladies du sang.

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