Préparation d’échantillons pour la cryotomographie in situ de cellules de mammifères

L’objectif de cette recherche est de développer une méthodologie de préparation d’échantillons qui soit à la fois accessible et reproductible de manière fiable. En y parvenant, la puissance de la cryotomographie électronique cellulaire directe peut être utilisée pour répondre à une grande variété de questions biologiques. Les défis de la préparation du réseau sont considérables.

Les cellules ne se fixent pas facilement aux grilles et la manipulation peut endommager la couche de carbone, entraînant la perte de zones de grille imageables. De plus, la prévalence des protubérances cellulaires minces est réduite sans attention aux conditions de préparation appropriées des échantillons. Les protocoles actuels nécessitent généralement des équipements spécialisés pour résoudre les principaux goulots d’étranglement de l’ensemencement, tels que le micro-motif et les supports imprimés en 3D pour la fixation et la manipulation des cellules, respectivement.

Ce protocole offre des solutions plus accessibles, tout en conservant la flexibilité nécessaire à l’utilisation de ces outils spécialisés pour les applications en aval.