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DOI: 10.3791/65851-v
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Nous décrivons un protocole pour obtenir des fibres dissociées enzymatiquement de différentes longueurs et types à partir de six muscles de souris adultes : trois d’entre eux déjà décrits (fléchisseur des doigts court, extenseur des doigts long, soléaire) et trois d’entre eux dissociés avec succès pour la première fois (extenseur de l’hallucis long, péronier long, péronier des doigts quarti).
Dans cette étude, nous décrivons une méthode pour isoler des fibres de différentes longueurs et types de six muscles des membres postérieurs de souris. Nous avons également testé l’adéquation des fibres pour des expériences physiologiques traitant de l’étude du mécanisme de couplage excitation-contraction. Pendant des années, l’obtention de fibres musculaires longues a été un défi, limitant la portée de nombreuses études dans le domaine.
Nous montrons maintenant qu’il est possible d’obtenir des fibres maigres avec des fléchisseurs de souris, des extenseurs et des evertors d’une longueur allant jusqu’à six millimètres. À titre d’exemple, l’obtention de fibres à partir de six muscles différents nous a permis de montrer que la cinétique transitoire du calcium, connue sous le nom de morphologie de type II, peut être généralisée aux types IIB et IIX, quel que soit l’emplacement ou la fonction de leur source musculaire. Nous pensons que le modèle de fibres isolées enzymatiquement convient à une variété d’approches expérimentales avec différents types de technologies qui nous permettent de répondre à des questions mécanistes dans le domaine de la biochimie, de la physiologie, de la biophysique, de la biologie cellulaire et de la biologie moléculaire.
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