Name: Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-08-11T14:40:00.000+00:00
Duration: 5 min 32 s
Description: Découvrez le modèle d'occlusion transitoire de l'artère cérébrale moyenne chez la souris pour étudier l'AVC ischémique. Cette méthode combine IRM et tests comportementaux pour évaluer la progression des lésions et l'efficacité des agents neuroprotecteurs.

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Etude financée par la subvention PID2020-113202RB-I00 financée par le Ministerio de Ciencia e Innovación (MCIN)/Agencia Estatal de Investigación (AEI), Gobierno de España/10.13039/501100011033 et le Fonds européen de développement régional (FEDER). Une façon de faire l’Europe ». NCC et MAR ont bénéficié de bourses prédoctorales (PRE2021-099481 et PRE2018-085737, respectivement) financées par MCIN/AEI/ 10.13039/501100011033 et par le Fonds social européen (FSE) Investir dans votre avenir. Nous remercions Francisca Ruiz-Jaén et Leonardo Márquez-Kisinousky pour leur soutien technique. Nous remercions le soutien de l’installation d’imagerie IRM de l’Institut d’Investigation Biomèdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS). Le programme des Centres de Conscience de Catalogne (CERCA) de la Generalitat de Catalunya soutient l’IDIBAPS.

Le travail sur les animaux a été réalisé conformément aux lois catalane et espagnole (Real Decreto 53/2013) et aux directives européennes, avec l’approbation du Comité Esthétique d’Expérimentation Animale (CEEA) de l’Université de Barcelone et des organismes de réglementation locaux de la Generalitat de Catalunya. Les études sont rapportées conformément aux lignes directrices d’ARRIVE. Cette procédure est conçue pour être réalisée chez des souris adultes, à partir de l’âge de 8 semaines, sans limite d’âge. Des exemples d’intervention chirurgicale développée chez des souris C57BL/6 âgées de 10 à 12 semaines sont fournis ici. Les différences anatomiques en fonction de la souche de la souris doivent être prises en compte.
1. Préparation des animaux
<ol><li>Avant de commencer l’intervention chirurgicale, rassemblez et stérilisez tout le matériel et les outils nécessaires. Installez la table d’opération avec tout le matériel chirurgical nécessaire (répertorié dans le tableau des matériaux).</li>
	<li>Anesthésier l’animal par inhalation d’isoflurane dans un mélange d’oxygène et de protoxyde d’azote (30%/70%).</li>
	<li>Administrer de la buprénorphine (voir le tableau des matériaux) par voie sous-cutanée à une dose de 0,05 mg/kg de poids corporel pour procurer une analgésie et soulager la douleur et l’inconfort. REMARQUE : L’analgésie est obligatoire, mais différents protocoles sont acceptés. Les signes de douleur et d’inconfort doivent également être contrôlés pendant les premiers jours suivant l’ACM (voir étape 4). Appliquer des solutions correctives si nécessaire.</li>
	<li>Placer l’animal dans une boîte d’induction d’anesthésie (voir le tableau des matériaux) avec 5 % d’isoflurane jusqu’à ce qu’il atteigne un état d’anesthésie profonde (perte de réflexe lors de la ponction de la patte et du réflexe oculaire).</li>
	<li>Positionnez la souris sur la table d’opération et diminuez le taux d’isoflurane à 1,5 %, délivré par le masque facial. Appliquez une pommade vétérinaire pour éviter la sécheresse oculaire pendant la procédure.</li>
	<li>Maintenir la température corporelle à 37 ± 0,5 °C contrôlée par une sonde rectale reliée à un coussin chauffant (voir le tableau des matériaux).</li>
	<li>Rasez la partie ventrale du cou et la tête (calvaria) avec un rasoir électrique. Enlevez soigneusement les débris de fourrure et désinfectez les zones de la peau trois fois en mouvements circulaires avec un désinfectant à base d’iode et d’alcool à 70%. .</li>
</ol>2. Évaluation du débit sanguin cérébral (CBF) avec débitmétrie laser Doppler (LDF)
<ol><li>À l’aide de ciseaux, faites une incision sur la peau de la tête, en direction de la suture sagittale, des oreilles jusqu’à la zone entre les yeux.</li>
	<li>Rétractez la peau et retirez le périoste sur le côté droit du crâne.</li>
	<li>Trouvez les coordonnées (2,5 mm latérales de Bregma) et fixez le support Doppler (voir tableau des matériaux) à l’aide de cyanoacrylate. Une fois la colle sèche, connectez la sonde Doppler et vérifiez que la lecture du signal est correcte.</li>
</ol>3. Occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne (tMCAo)
<ol><li>Retournez la souris en position couchée sur le dos et fixez-la à la table d’opération avec du ruban adhésif médical.</li>
	<li>Faites une incision médiane sur le cou. Tirez latéralement la peau et les glandes salivaires vers l’arrière à l’aide d’écarteurs (voir le tableau des matériaux) pour exposer le territoire carotidien.</li>
	<li>Identifier l’anatomie vasculaire de l’artère carotide commune (ACC), de l’ICA et de l’ECA, ainsi que les différentes artères qui en sont dérivées (maxillaire et linguale, thyroïde supérieure, occipitale et ptérygopalatine) (Figure 1A).</li>
	<li>Détachez les artères principales du tissu conjonctif adjacent afin qu’elles puissent être manipulées. REMARQUE : Faites particulièrement attention à ne pas endommager les nerfs, en particulier le nerf vague, qui est parallèle à l’ACC.</li>
	<li>Enroulez une suture de soie 6-0 (voir le tableau des matériaux) autour de l’ECA au niveau de la bifurcation maxillaire/linguale. Fixez fermement un nœud pour interrompre définitivement la circulation.</li>
	<li>Passez une deuxième suture autour de la même artère, entre le premier nœud et la bifurcation de l’ACC, et gardez ce nœud lâche.</li>
	<li>Placez un troisième fil autour du CCA et faites un nœud coulant qui peut être facilement dénoué. REMARQUE : Cela peut également être effectué avec un clip vasculaire, mais le fil permet plus de mouvement et de flexibilité. A ce stade, il est possible d’observer une première diminution du CBF dans le signal LDF.</li>
	<li>Placez une pince vasculaire (voir le tableau des matériaux) en interrompant la circulation sanguine de l’ICA.</li>
	<li>Faites une petite incision dans l’ECA, près de la zone où se trouve le nœud serré.</li>
	<li>Insérez le monofilament jusqu’à ce que le revêtement épais ait complètement pénétré dans la lumière artérielle.</li>
	<li>Serrez le deuxième nœud pour maintenir le monofilament à l’intérieur de l’artère et éviter que la pression exercée par le sang ne le pousse vers l’extérieur (Figure 1B).</li>
	<li>Retirez le clip vasculaire de l’ICA.</li>
	<li>Coupez l’ECA sous le premier nœud et faites pivoter la souche pour l’orienter dans la direction de l’ICA (Figure 1C).</li>
	<li>Faites avancer le monofilament via l’ICA jusqu’au point où le MCA se ramifie. REMARQUE : L’occlusion se traduit par une chute brutale du flux sanguin dans la lecture du LDF. On considère qu’une occlusion est réussie lorsque la baisse du CBF est supérieure à 70 % par rapport à la valeur basale. Si les systèmes de mesure du CBF ne sont pas disponibles, le point d’occlusion peut être noté par la résistance à l’avancement, qui chez les souris adultes est généralement d’environ 11 mm de la bifurcation de l’ACC.<ol><li>Si l’anesthésie est poursuivie pendant la période d’occlusion, surveillez la souris et gardez-la sous observation constante pendant 45 min.</li>
		<li>Dans le cas où la souris est réveillée pendant la période d’occlusion, suturez la peau du cou avec plusieurs points de suture. Sans débrancher la sonde LDF, placez la souris dans la boîte à température contrôlée, permettant la récupération après l’anesthésie. REMARQUE : Il est courant que la souris présente un comportement d’encerclement spontané pendant cette période, ce qui indique une occlusion réussie.</li>
		<li>Après 40 min, anesthésier à nouveau la souris en suivant les mêmes procédures d’anesthésie et de désinfection que celles indiquées aux points 1.4, 1.5 et 1.7. Replacez-le sur la table d’opération et retirez les points de suture du cou.</li>
	</ol></li>
	<li>Après 45 min d’occlusion, desserrez le nœud qui maintient le monofilament en place. Tirez lentement et doucement sur le filament et vérifiez que la recanalisation tissulaire se produit.</li>
	<li>Retirez le filament et serrez le nœud pour éviter la perte de sang.</li>
	<li>Défaire le nœud de l’ACC. Assurez-vous qu’il n’y a pas de dommages à la paroi artérielle.</li>
	<li>Retirez les écarteurs et repositionnez les muscles, les glandes et la peau. Suturez la peau (6-0) et appliquez un désinfectant.</li>
	<li>Débranchez la sonde Doppler et détachez le support. Suturer et désinfecter la peau de la tête.</li>
	<li>Pendant la période de récupération de l’anesthésie, laissez la souris dans une cage munie d’un chauffage pour maintenir la température. Gardez-le sous observation constante jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli de l’anesthésie. Une fois récupérée, la souris peut être replacée dans sa cage. NOTE : Il est fortement recommandé d’utiliser un logement à enrichissement social. Cependant, ne mélangez jamais des souris opérées avec des souris non opérées dans la même cage sans aucune séparation physique afin d’éviter toute agression.</li>
</ol>4. Soins postopératoires
<ol><li>Surveillez périodiquement les animaux en suivant les procédures et les règlements établis conformément à la réglementation locale. Fournir un traitement analgésique selon le calendrier approprié pour minimiser la douleur après la chirurgie. NOTA : Dans la présente étude, le même analgésique qu’au début de l’intervention (buprénorphine 0,05 mg/kg de poids corporel) a été appliqué 6 h et 24 h après la chirurgie.</li>
	<li>Pratiquer l’euthanasie lorsque les paramètres de supervision l’indiquent, en suivant les protocoles approuvés par l’établissement.</li>
	<li>Surveillez quotidiennement le poids des animaux. Fournir de la nourriture molle aux animaux pendant les premiers jours suivant la chirurgie. De plus, hydratez-les par injection sous-cutanée de solution saline (200 μL) immédiatement après la chirurgie et périodiquement par la suite s’il est observé que la souris ne s’hydrate pas d’elle-même. Disposez la nourriture et l’eau de manière à ce qu’elles soient facilement accessibles à l’animal.</li>
	<li>Une fois l’étude in vivo terminée, anesthésiez les souris, euthanasiez-les et retirez le tissu cérébral pour une analyse histopathologique plus approfondie (si nécessaire).</li>
</ol>

Un modèle d’ischémie cérébrale transitoire par occlusion de l’artère cérébrale moyenne

<ol><li>Siddiqi, A. Z., Wadhwa, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+acute+stroke%3A+current+practices+and+future+horizons%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Revascularization+Medicine%22%5BJournal%5D)">Treatment of acute stroke: current practices and future horizons.</a> Cardiovascular Revascularization Medicine. 49, 56-65 (2023).</li>
<li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+cerebral+ischemia+in+the+rat%3A+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Focal cerebral ischemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 1, 53-60 (1981).</li>
<li>Koizumi, J., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+A+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+Journal+of+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese Journal of Stroke. 8, 1-8 (1986).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, R., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li>
<li>Hossmann, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+ischemia%3A+Models%2C+methods%2C+and+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Cerebral ischemia: Models, methods, and outcomes.</a> Neuropharmacology. 55, 257-270 (2008).</li>
<li>Seto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+ischemic+stroke+in+awake+freely+moving+mice+reveals+that+isoflurane+anesthesia+can+mask+the+benefits+of+a+neuroprotection+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroenergetics%22%5BJournal%5D)">Induction of ischemic stroke in awake freely moving mice reveals that isoflurane anesthesia can mask the benefits of a neuroprotection therapy.</a> Frontiers in Neuroenergetics. 6, 1(2014).</li>
<li>Díaz-Marugan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poststroke+lung+infection+by+opportunistic+commensal+bacteria+is+not+mediated+by+their+expansion+in+the+gut+microbiota%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Poststroke lung infection by opportunistic commensal bacteria is not mediated by their expansion in the gut microbiota.</a> Stroke. 54 (7), 1875-1887 (2023).</li>
<li>Xie, L., Kang, H., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+transient+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+awake+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+Sciences%22%5BJournal%5D)">A novel model of transient occlusion of the middle cerebral artery in awake mice.</a> Journal of Natural Sciences. 2 (2), e176(2016).</li>
<li>Arbaizar-Rovirosa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aged+lipid-laden+microglia+display+impaired+responses+to+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Aged lipid-laden microglia display impaired responses to stroke.</a> EMBO Molecular Medicine. 15 (2), e17175(2023).</li>
<li>Orsini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+mannose-binding+lectin+confers+long-lasting+protection+with+a+surprisingly+wide+therapeutic+window+in+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Targeting mannose-binding lectin confers long-lasting protection with a surprisingly wide therapeutic window in cerebral ischemia.</a> Circulation. 126 (12), 1484-1494 (2012).</li>
<li>Majid, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+vulnerability+to+permanent+focal+cerebral+ischemia+among+3+common+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Differences in vulnerability to permanent focal cerebral ischemia among 3 common mouse strains.</a> Stroke. 31, 2707-2714 (2000).</li>
<li>Rogers, D. C., Campbell, C. A., Stretton, J. L., Mackay, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+motor+impairment+and+infarct+volume+after+permanent+and+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Correlation between motor impairment and infarct volume after permanent and transient middle cerebral artery occlusion in the rat.</a> Stroke. 28, 2060-2065 (1997).</li>
<li>Hedna, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+Laser+Doppler+flowmetry+in+predicting+outcome+in+murine+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+and+Interventional+Neurology%22%5BJournal%5D)">Validity of Laser Doppler flowmetry in predicting outcome in murine intraluminal middle cerebral artery occlusion stroke.</a> Journal of Vascular and Interventional Neurology. 8 (3), 74-82 (2015).</li>
<li>Yin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+speckle+contrast+imaging+for+blood+flow+monitoring+in+predicting+outcomes+after+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Laser speckle contrast imaging for blood flow monitoring in predicting outcomes after cerebral ischemia-reperfusion injury in mice.</a> BMC Neuroscience. 23, 80(2022).</li>
<li>Thakkar, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+relevance+of+elevated+blood+pressure+after+ischemic+stroke+in+the+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Therapeutic relevance of elevated blood pressure after ischemic stroke in the hypertensive rats.</a> Hypertension. 75 (3), 740-747 (2020).</li>
<li>Yu, X., Feng, Y., Liu, R., Chen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+protects+mice+against+ischemic+stroke+by+modulating+macrophage+polarization+through+upregulation+of+interferon+regulatory+factor-4%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inflammation+Research%22%5BJournal%5D)">Hypothermia protects mice against ischemic stroke by modulating macrophage polarization through upregulation of interferon regulatory factor-4.</a> Journal of Inflammation Research. 14, 1271-1281 (2021).</li>
<li>Denorme, F., Portier, I., Kosaka, Y., Campbell, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+exacerbates+ischemic+stroke+outcome+independent+of+platelet+glucose+uptake%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thrombosis+and+Haemostasis%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia exacerbates ischemic stroke outcome independent of platelet glucose uptake.</a> Journal of Thrombosis and Haemostasis. 19, 536-546 (2021).</li>
</ol>

Les auteurs ne déclarent aucun conflit d’intérêts.

La procédure tMCAo intraluminale est le modèle le plus couramment utilisé d’ischémie cérébrale focale avec reperfusion dans la recherche fondamentale. À l’heure actuelle, les souris sont le modèle animal privilégié en raison de la disponibilité de souches génétiquement modifiées. Cependant, il est essentiel de reconnaître que les souris génétiquement modifiées et leurs antécédents génétiques peuvent avoir un impact sur la vascularisation du cerveau. La présence d’une circulation collatérale et d’anastomoses entre différe...

L’accident vasculaire cérébral est une maladie dévastatrice qui touche environ 15 millions de personnes dans le monde chaque année, selon l’OMS. Environ un tiers des patients succombent à la maladie, tandis qu’un autre tiers souffre d’une invalidité permanente. L’accident vasculaire cérébral est une pathologie complexe impliquant divers types de cellules, telles que les cellules immunitaires neurales et périphériques, le système vasculaire et les réponses systémiques1. Le réseau complexe de réactions déclenchées par un accident vasculaire cérébral au niveau du système ne peut actuellement pas être reproduit à l’aide de modèles in vitro . Ainsi, les modèles animaux expérimentaux sont essentiels pour approfondir les mécanismes de la maladie et pour développer et tester de nouvelles thérapies. À l’heure actuelle, la reperfusion tissulaire précoce est la seule intervention approuvée, soit par thrombolyse avec activateur du plasminogène de type tissulaire (tPA), soit par thrombectomieendovasculaire 1.
Les occlusions de l’artère cérébrale moyenne (ACM) sont fréquentes chez les patients victimes d’un AVC. Par conséquent, des modèles d’occlusion transitoire de MCA (tMCAo) chez les rongeurs ont été initialement développés chez le rat 2,3,4. De nos jours, les souris génétiquement modifiées sont les animaux les plus couramment utilisés dans les modèles expérimentaux d’AVC. Dans cette étude, nous décrivons un modèle mini-invasif de tMCAo intraluminal chez la souris. L’approche est réalisée par l’artère carotide au niveau du cou, sans craniectomie.
La durée de la période d’occlusion est un facteur critique qui détermine l’étendue de la lésion ischémique. Même de courtes occlusions de 10 minutes peuvent provoquer une mort neuronale sélective sans infarctus apparent, tandis que des occlusions plus longues, généralement d’une durée de 30 à 60 minutes, entraînent un certain degré d’infarctus cérébral. Contrairement aux branches proximales et distales de l’ACM qui alimentent le cortex et possèdent des collatérales, les artères lenticulo-striatales qui irriguent le striatum n’ont pas de collatérales5. En conséquence, il y a une plus grande réduction du flux sanguin dans le striatum que dans le cortex après tMCAo. Ainsi, les occlusions de 30 min ou moins affectent généralement le striatum mais pas le cortex, tandis que les occlusions plus longues, à partir de 45 min, génèrent souvent une lésion ischémique dans l’ensemble du territoire de l’ACM, y compris le striatum et le cortex dorsolatéral.
Pour assurer le bien-être des souris, nous administrons des analgésiques avant l’intervention et utilisons l’anesthésie pendant la chirurgie. Néanmoins, l’anesthésie peut potentiellement introduire des altérations artificielles dans la physiologie de la souris et affecter certaines mesures de résultats6. L’intervention chirurgicale, lorsqu’elle est effectuée par du personnel expérimenté, dure généralement environ 15 minutes pour induire le MCAo. Par la suite, la durée totale sous anesthésie dépend de la période d’occlusion. Pour les expériences où la minimisation de l’anesthésie est cruciale, une étape alternative de la procédure consiste à arrêter l’anesthésie pendant la période d’occlusion et à la limiter uniquement aux étapes chirurgicales d’insertion et de retrait du filament occlusant le MCA. Cette approche permet de réduire la durée de l’anesthésie et de minimiser ses effets artifiques potentiels sur le modèle expérimental 7,8. Par conséquent, la méthode d’induction de l’ischémie focale transitoire est présentée par occlusion intraluminale du MCA avec deux variantes : avec la souris anesthésiée pendant toute la période d’occlusion ou avec la souris éveillée pendant cette période. Dans les deux cas, une chirurgie simulée doit être réalisée en parallèle de l’intervention effectuée sur les souris ischémiques. De plus, des données sur l’évaluation des résultats sont fournies, mesurées par des tests comportementaux et une IRM à différents moments après la reperfusion. Enfin, les principaux facteurs à prendre en compte lors de la mise en œuvre de la procédure expérimentale sont discutés.

<table><tbody><tr><td>6/0 suture&nbsp ;</td><td>Arago</td><td></td><td>Ligatures vasculaires</td></tr><tr><td>6/0 suture avec aiguille incurvée</td><td>Arago</td><td></td><td>Sutures cutanées</td></tr><tr><td>9 mg/mL Saline</td><td>Fresenius Kabi</td><td>CN616003 EC</td><td>Pour l’hydratation</td></tr><tr><td>Système d’anesthésie</td><td>SurgiVet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Écarteurs émoussés, 1 mm de large</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>18200-09</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfine</td><td>Buprex</td><td></td><td>Pour soulagement de la douleur</td></tr><tr><td>Pince d’application de pinces</td><td>Outils de science fine</td><td>S& T CAF4</td><td></td></tr><tr><td>Dumont mini pince</td><td>Outils de sciences fines</td><td>M3S 11200-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinces</td><td>Outils de sciences fines</td><td>91106-12</td><td></td></tr><tr><td>Colle</td><td>Loctite</td><td></td><td>Pour coller la sonde LDF sur le crâne</td></tr><tr><td>Appareil de mesure de la force de préhension</td><td>IITC Life Science Inc.</td><td>#2200</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>B-Braun</td><td>CN571105.8</td><td></td></tr><tr><td>LDF Perimed Perimed Perimed</td><td>Periflux</td><td>System 5000</td><td></td></tr><tr><td>LDF Supports de sonde</td><td>Perimed</td><td>PH 07-4</td><td></td></tr><tr><td>Bande</td><td></td><td></td><td></td>médicale</tr><tr><td>Aimant IRM</td><td>Bruker BioSpin, Ettlingen, Allemagne</td><td></td><td>BioSpec 70/30 scanner horizontal pour animaux&nbsp ;</td></tr><tr><td>Porte-aiguille avec coupe-suture</td><td>Outils pour les sciences fines</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>Filament de nylon</td><td>Doccol</td><td>701912PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>Cage de récupération avec coussin</td><td></td><td></td><td></td>chauffant</tr><tr><td>Ciseaux Sirgical</td><td>Outils pour les sciences fines</td><td>91401-12</td><td></td></tr><tr><td>Kit de cauterisateur pour petits récipients</td><td>Outils pour les sciences fines</td><td>18000-00</td><td></td></tr><tr><td>Stéréomicroscope et lumière froide</td><td>Leica</td><td>M60</td><td></td></tr><tr><td>Pince à suture</td><td>Fine Science Tools</td><td>18025-10</td><td></td></tr><tr><td>Thermostat, sonde rectale et tapis de souris</td><td>Letica Science Instruments</td><td>LE 13206</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort Vannas (tranchant de 4 mm)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15019-10</td><td></td></tr><tr><td>Pinces vasculaires</td><td>Fine Science Tools</td><td>00396-01</td><td></td></tr></tbody></table>

modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’avc

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

L’AVC est l’une des principales causes de décès ou d’invalidité chronique dans le monde. Néanmoins, les traitements optimaux existants se limitent aux thérapies de reperfusion pendant la phase aiguë de l’AVC ischémique. Pour mieux comprendre la physiopathologie de l’AVC et développer des approches thérapeutiques innovantes, les modèles in vivo d’AVC chez les rongeurs jouent un rôle fondamental. La disponibilité d’animaux génétiquement modifiés a particulièrement favorisé l’utilisation de souris comme modèles expérimentaux d’AVC.
Chez les patients victimes d’un AVC, l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (ACM) est un phénomène fréquent. Par conséquent, le modèle expérimental le plus répandu implique l’occlusion intraluminale de l’ACM, une technique peu invasive qui ne nécessite pas de craniectomie. Cette procédure consiste à insérer un monofilament à travers l’artère carotide externe (ECA) et à le faire progresser à travers l’artère carotide interne (ICA) jusqu’à ce qu’il atteigne le point de ramification de l’ACM. Après une occlusion artérielle de 45 min, le monofilament est retiré pour permettre la reperfusion. Tout au long du processus, le flux sanguin cérébral est surveillé pour confirmer la réduction lors de l’occlusion et la récupération ultérieure lors de la reperfusion. Les résultats neurologiques et tissulaires sont évalués à l’aide de tests comportementaux et d’études d’imagerie par résonance magnétique (IRM).

Il existe différentes approches pour évaluer le résultat de la procédure tMCAo. Des méthodes de neuroimagerie (IRM) in vivo et des tests comportementaux sont utilisés ici.
Les souris développent des lésions ischémiques dans le cerveau, affectant principalement le territoire alimenté par le MCA ipsilatéral à l’occlusion, comme le striatum et le cortex dorsolatéral. Plusieurs méthodes existent pour déterminer l’étendue de la lésion, notamment la coloration tissulaire au chlorure de 2,3,...

Ce protocole décrit le modèle d’ischémie cérébrale focale transitoire chez la souris par occlusion intraluminale de l’artère cérébrale moyenne. De plus, des exemples d’évaluation des résultats sont présentés à l’aide de l’imagerie par résonance magnétique et de tests comportementaux.

Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

Le modèle d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne est largement utilisé pour simuler un accident vasculaire cérébral ischémique chez la souris. Ce modèle permet d’étudier la progression temporelle des lésions ischémiques, d’évaluer l’efficacité des agents neuroprotecteurs et d’explorer le rôle de gènes et de voies spécifiques dans la pathologie de l’AVC dans le but final de trouver de nouveaux traitements potentiels. La mise en œuvre de techniques de neuroimagerie telles que l’IRM permet de faire un meilleur diagnostic, d’améliorer l’évaluation des résultats et de réduire le nombre d’animaux nécessaires dans chaque étude.Ce protocole offre une explication claire et détaillée de la technique la plus couramment utilisée pour induire l’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne. De plus, il met en œuvre la technique en introduisant la modification de précision du retrait de l’anesthésie pendant le temps d’occlusion, réduisant ainsi l’effet néfaste d’un temps d’anesthésie prolongé.

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L'occlusion filamenteux de l'artère cérébrale moyenne est un modèle commun pour l'étude de l'AVC ischémique chez la souris.

Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

Nous démontrons dans la vidéo un procédé pour produire une occlusion de l'artère cérébrale moyenne chez des souris adultes en utilisant un monofilament intraluminale. Nous montrons aussi comment évaluer l'étendue de l'infarctus cérébral par le chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium (TTC) coloration.

Modèle murin d&#39;occlusion artère cérébrale moyenne

Cette vidéo décrit la procédure de développement d’un AVC transitoire dans un modèle murin en utilisant l’occlusion à base de filaments recouverts de silicium de l’artère cérébrale moyenne. Le modèle développé imite l’AVC humain, aidant ainsi à étudier de nouvelles stratégies thérapeutiques pour traiter l’AVC.

Modèle d’AVC transitoire basé sur l’insertion de filaments : une intervention chirurgicale pour effectuer l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne dans le cerveau murin

Nous décrivons une méthode hautement reproductible pour l'occlusion permanente d'un important vaisseau sanguin cérébral des rongeurs. Cette technique peut être accompli avec très peu de dommages périphérique, la perte de sang minime, un taux élevé de survie à long terme, et le volume de l'infarctus cohérent en rapport avec la population clinique humaine.

Permanent occlusion des vaisseaux cérébraux<em&gt; Via</em&gt; Double ligature et Transection

Différents modèles murins de l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne (MCAO) sont largement utilisés dans les recherches sur le cerveau expérimentale. Ici, nous démontrons le modèle de transcrânienne OAMC distale permanente qui produit infarctus cortical cohérente d'une taille correspondant à des dommages imposée par la majorité des accidents ischémiques cérébraux humains.

Modélisation des maladies chez les souris: Coagulation permanente de l&#39;artère cérébrale moyenne distale

Afin de comprendre la physiopathologie de la course, il est important d'utiliser des modèles fiables. Ce document décrira l'un des modèles de course les plus fréquemment utilisés chez la souris, appelé le modèle milieu occlusion de l'artère cérébrale (MCAo) (également appelé le filament intraluminal ou d'un modèle de suture) avec reperfusion.

Approche chirurgicale pour Occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris

L’AVC néonatal est une cause importante de lésions cérébrales précoces nécessitant un modèle translationnel avec des modèles de lésions focales cohérents et une reproductibilité élevée afin de permettre l’étude. Cette étude décrit la procédure chirurgicale détaillée pour créer une lésion d’ischémie-reperfusion focale unilatérale non hémorragique chez les rongeurs équivalents à terme.

Transitoire cérébrale moyenne Artère Occlusion Modèle de l&#39;AVC néonatale chez les rats P10

Différents modèles d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAo) sont utilisés dans la recherche expérimentale sur les accidents vasculaires cérébraux. Ici, un modèle expérimental d’AVC de MCAo transitoire via l’artère carotide externe (ECA) est décrit, qui vise à imiter l’AVC humain, dans lequel le thrombus cérébrovasculaire est enlevé en raison d’une lyse spontanée du caillot ou d’un traitement.

Modélisation de l’AVC chez la souris: occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide externe

Ce protocole démontre un modèle unique d’AVC chez la souris avec un infarctus de taille moyenne et un excellent taux de survie. Ce modèle permet aux chercheurs en AVC préclinique de prolonger la durée de l’ischémie, d’utiliser des souris âgées et d’évaluer les résultats fonctionnels à long terme.

Un modèle modifié d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne transcrânienne pour étudier les résultats de l’AVC chez des souris âgées

Le protocole actuel décrit un modèle de rat d’occlusion/reperfusion de l’artère cérébrale moyenne qui préserve la structure anatomique des vaisseaux cérébraux sans causer de dommages.

Un modèle chez le rat d’occlusion/reperfusion de l’artère cérébrale moyenne sans endommager la structure anatomique des vaisseaux cérébraux

Ce protocole décrit le processus de préparation à la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide commune.

Préparation d’un modèle modifié pour la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne

Découvrez le modèle d'occlusion transitoire de l'artère cérébrale moyenne chez la souris pour étudier l'AVC ischémique. Cette méthode combine IRM et tests comportementaux pour évaluer la progression des lésions et l'efficacité des agents neuroprotecteurs.

Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC

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