Name: Conservation du don de porcs après mort circulatoire (DDC) par perfusion et transplantation hépatique orthotopique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 25 s
Description: Découvrez la préservation hépatique par perfusion à température variable chez le porc pour améliorer les greffes de foies DDC. Cette méthode optimise la qualité des organes et minimise les dommages ischémiques.

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<meta charset="utf8"></head><body>Préservation orthotopique du foie de porc par perfusion mécanique

<ol><li>de Goeij, F., Schlegel, A., Muiesan, P., Guarrera, J. V., Dutkowski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+oxygenated+machine+perfusion+protects+from+cholangiopathy+in+donation+after+circulatory+death+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Hypothermic oxygenated machine perfusion protects from cholangiopathy in donation after circulatory death liver transplantation.</a> Hepatology. 74 (6), 3525-3528 (2021).</li>
<li>Dutkowski, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolving+trends+in+machine+perfusion+for+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Evolving trends in machine perfusion for liver transplantation.</a> Gastroenterology. 156 (6), 1542-1547 (2019).</li>
<li>Parente, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+perfusion+techniques+for+liver+transplantation%3A+A+meta-analysis+of+the+first+seven+randomized-controlled+trials%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Machine perfusion techniques for liver transplantation: A meta-analysis of the first seven randomized-controlled trials.</a> J Hepatol. 79 (5), 1201-1213 (2023).</li>
<li>Schlegel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+DCD+liver+transplantation+using+organs+treated+by+hypothermic+oxygenated+perfusion+before+implantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Outcomes of DCD liver transplantation using organs treated by hypothermic oxygenated perfusion before implantation.</a> J Hepatol. 70 (1), 50-57 (2019).</li>
<li>Zhang, Z. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+machine+perfusion+protects+against+liver+ischemia-reperfusion+injury+during+reduced-size+liver+transplantation+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Transplant%22%5BJournal%5D)">Normothermic machine perfusion protects against liver ischemia-reperfusion injury during reduced-size liver transplantation in pigs.</a> Ann Transplant. 24, 9-17 (2019).</li>
<li>Minor, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+reconditioning+by+gaseous+oxygen+improves+survival+after+liver+transplantation+in+the+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Hypothermic reconditioning by gaseous oxygen improves survival after liver transplantation in the pig.</a> Am J Transplant. 11 (12), 2627-2634 (2011).</li>
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<li>Fu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+partial+liver+transplantation+without+veno-venous+bypass%3A+an+effective+model+for+small-for-size+liver+graft+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Porcine partial liver transplantation without veno-venous bypass: an effective model for small-for-size liver graft injury.</a> Transplant Proc. 43 (5), 1953-1961 (2011).</li>
<li>Brockmann, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequence+of+reperfusion+influences+ischemia%2Freperfusion+injury+and+primary+graft+function+following+porcine+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Sequence of reperfusion influences ischemia/reperfusion injury and primary graft function following porcine liver transplantation.</a> Liver Transpl. 11 (10), 1214-1222 (2005).</li>
<li>Spetzler, V. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+porcine+liver+procurement+and+orthotopic+transplantation+using+an+active+porto-caval+shunt%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Technique of porcine liver procurement and orthotopic transplantation using an active porto-caval shunt.</a> J Vis Exp. (99), e52055(2015).</li>
<li>Ceresa, C., Nasralla, D., Pollok, J. M., Friend, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+perfusion+of+the+liver%3A+applications+in+transplantation+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Machine perfusion of the liver: applications in transplantation and beyond.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 19 (3), 199-209 (2022).</li>
<li>Martins, P. N., Buchwald, J. E., Mergental, H., Vargas, L., Quintini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+normothermic+machine+perfusion+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Surg%22%5BJournal%5D)">The role of normothermic machine perfusion in liver transplantation.</a> Int J Surg. 82, 52-60 (2020).</li>
<li>Brüggenwirth, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+dual+hypothermic+oxygenated+machine+preservation+%28DHOPE-PRO%29+in+liver+transplantation%3A+Study+protocol+for+a+stage+2%2C+prospective%2C+dual-arm%2C+safety+and+feasibility+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Open+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Prolonged dual hypothermic oxygenated machine preservation (DHOPE-PRO) in liver transplantation: Study protocol for a stage 2, prospective, dual-arm, safety and feasibility clinical trial.</a> BMJ Open Gastroenterol. 9 (1), 000842(2022).</li>
<li>Mergental, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+discarded+livers+following+viability+testing+with+normothermic+machine+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Transplantation of discarded livers following viability testing with normothermic machine perfusion.</a> Nat Commun. 11 (1), 2939(2020).</li>
<li>Nasralla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized+trial+of+normothermic+preservation+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation.</a> Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).</li>
<li>Melandro, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viability+criteria+during+liver+ex-situ+normothermic+and+hypothermic+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Medicina+%28Kaunas%29%22%5BJournal%5D)">Viability criteria during liver ex-situ normothermic and hypothermic perfusion.</a> Medicina (Kaunas). 58 (10), 1434(2022).</li>
<li>Warmuzińska, N., Łuczykowski, K., Bojko, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+and+emerging+trends+in+donor+graft-quality+assessment+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Review of current and emerging trends in donor graft-quality assessment techniques.</a> J Clin Med. 11 (3), 487(2022).</li>
<li>OuYang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+ex+vivo+liver+viability+using+a+nuclear+magnetic+resonance+relaxation+time-based+assay+in+a+porcine+machine+perfusion+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the ex vivo liver viability using a nuclear magnetic resonance relaxation time-based assay in a porcine machine perfusion model.</a> Sci Rep. 11 (1), 4117(2021).</li>
<li>Sampaziotis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholangiocyte+organoids+can+repair+bile+ducts+after+transplantation+in+the+human+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cholangiocyte organoids can repair bile ducts after transplantation in the human liver.</a> Science. 371 (6531), 839-846 (2021).</li>
<li>van Leeuwen, O. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+high-risk+donor+livers+after+ex+situ+resuscitation+and+assessment+using+combined+hypo-+and+normothermic+machine+perfusion%3A+A+prospective+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Transplantation of high-risk donor livers after ex situ resuscitation and assessment using combined hypo- and normothermic machine perfusion: A prospective clinical trial.</a> Ann Surg. 270 (5), 906-914 (2019).</li>
<li>van Leeuwen, O. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+hypothermic+and+normothermic+machine+perfusion+enables+safe+transplantation+of+high-risk+donor+livers%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Sequential hypothermic and normothermic machine perfusion enables safe transplantation of high-risk donor livers.</a> Am J Transplant. 22 (6), 1658-1670 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Respirateur d’anesthésie</td><td>Mindray,Shenzhen</td><td>WATO EX-20&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Analyseur biochimique automatique</td><td>&nbsp ; MNCHIP, Chine</td><td>&nbsp ; Celercare V5</td><td></td></tr><tr><td>Bama cochons miniatures femelles&nbsp ;</td><td>Pearl Lab Animal Sci & Tech Co,Ltd (Guangdong, Chine).&nbsp ;</td><td></td><td>40-45 kg&nbsp ;</td></tr><tr><td>Analyseur de gaz du sang&nbsp ;</td><td>&nbsp ; Moniteur ECG Abbott</td><td>i-STAT300</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Shenzhen Ericon Medical Equipment Co., LTD Chine</td><td>M-9000S</td><td></td></tr><tr><td>Glace flocon de neige entièrement automatique</td><td>Changshu Shenghai Electric Co., Ltd. Chine</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Perfusat en NMP</td><td></td><td></td><td>5 % Albumine sérique humaine 100-150 mL, Sang total 1,2-1,5 L, 2,5 % NaHCO3 21 mL, 10 % CaCL2 7 mL Héparine 5000 U Céfoxlétain 1 g, Métronidazole 500 mg, Taurocholate de sodium 5 g, Insuline à courte durée d’action 72 U, Solution totale de nutrition parentérale 250-500 mL.</td></tr><tr><td>Cathéter Potal</td><td>Technologie Jinxin,Shunde,Chine</td><td></td><td>Cathéter veineux portail pour canule personnalisée de diamètre interne variable (6-8,5 mm)</td></tr><tr><td>Centrifugeuse de réfrigération&nbsp ;</td><td>hermo Fisher Scientific - CN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>La carte de test des gaz du sang CG8/CG4</td><td>&nbsp ; Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>La carte de test CHEM 8</td><td>&nbsp ; Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Le dispositif de perfusion de machine hépatique ex vivo</td><td>Devocean Medical Instrument Co., Ltd, Guangdong, Chine</td><td>DEVOCEAN-LIVER 2000</td><td>Il s’agit d’un dispositif de perfusion de machine hépatique ex vivo biomimétique multimode, à température contrôlée, capable de préserver le foie à l’extérieur du corps pendant 24 heures</td></tr><tr><td>UW Solution de stockage à froid. &nbsp ;</td><td>Bridge to Life, Ltd., États-Unis</td><td>Le foie Belzer UW</td><td>du groupe SCS a été conservé dans la solution de stockage frigorifique UW.</td></tr><tr><td>Solution de perfusion de machines UW</td><td>Bridge to Life, Ltd., États-Unis</td><td>Belzer MPS</td><td>· Adénine (base libre) 0,68 g, Chlorure de calcium (dihydraté) 0,068 g Dextrose (+) 1,80 g Glutathion (réduit) 0,92 g, HEPES (acide libre) 2,38 g, Hydroxyéthylamidon 50,0 g, Gluconate de magnésium 1,13 g, Mannitol 5,4 g, Phosphate de potassium (monobasique) 3,4 g, Ribose, D(-) 0,75 g, Gluconate de sodium 17,45 g, Hydroxyde de sodium 0,70 g, Eau stérile pour injection à 1000 mL</td></tr><tr><td>Extracteur sous vide</td><td>SMAF</td><td>DYX-2A</td><td></td></tr></tbody></table>

conservation du don de porcs après mort circulatoire (ddc) par perfusion et transplantation hépatique orthotopique

Preservation of Porcine Donation after Circulatory Death (DCD) Liver by Perfusion and Orthotopic Liver Transplantation

Les foies DCD ont subi une procédure DHOPE-NMP comme mesure de protection avant d’être transplantés chez les porcs receveurs. La procédure de DHOPE-NMP a été la suivante : les foies DCD (n = 8) avec 30 min WIT ont été conservés dans DHOPE pendant 8 h au premier stade, suivis d’un transfert en mode NMP pendant 6 h supplémentaires. Par la suite, ces greffons ont été utilisés pour la LT chez les receveurs porcins. L’image schématique décrivant les groupes et le protocole est illustrée à la figure 1. La représentation schématique des principales étapes de la procédure de transplantation est illustrée à la figure 2A-D. À titre de mesure comparative, des greffons hépatiques (n = 8) avec une WIT de 30 minutes due à la mort cardiaque et conservés en SCS pendant 8 h ont été transplantés directement chez des porcs receveurs en tant que groupe témoin. Il a été observé que trois des porcs du receveur témoin sont morts dans les 36 heures suivant la transplantation (figure supplémentaire 1). Le temps de réveil de ces porcs dans le groupe témoin a été prolongé, et pendant la période d’observation, ils ont montré une diminution de l’appétit et une baisse de vitalité. Cinq des porcs témoins receveurs ont survécu jusqu’à la fin de la période de suivi, le jour 5 après la transplantation. Cependant, dans le groupe qui a subi l’étude DHOPE-NMP, six porcs receveurs sur huit ont survécu pendant 5 jours. Un porc du groupe DHOPE-NMP est mort des suites d’une fuite de bile 3 jours après la transplantation, tandis qu’un autre est mort d’un arrêt cardiaque 24 heures après OLTx. Des échantillons de sang ont été prélevés à 24 heures d’intervalle après l’opération dans la veine profonde à demeure, et des tests d’ALT et de bilirubine totale ont été effectués (figures 3A, B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65879/65879fig01.jpg"> Figure 1 : Vue d’ensemble du protocole. La procédure de conservation des greffons hépatiques DCD avec WIT de 30 min dans le groupe SCS (conservé dans la solution UW Cold Storage) et le groupe DHOPE-NMP avant d’être transplantés chez les porcs receveurs est décrite ici. (A) Image représentative d’une greffe de foie connectée au DHOPE à 4 °C. (B) Greffe de foie connectée au NMP à 37 °C. (C) Schéma décrivant la procédure, les paramètres et les groupes d’animaux. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65879/65879fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65879/65879fig02.jpg"> Figure 2 : Représentation schématique d’un modèle OLTx porcin à l’aide de MP. (A) L’artère hépatique et la veine porte du foie du donneur sont connectées à des canules attachées à l’appareil MP, et le flux de bile est surveillé en temps réel. (B) Le foie du receveur est isolé et une canule spécialisée est insérée dans l’extrémité de la veine porte du receveur. (C) Une fois que le foie du donneur est correctement positionné, la veine cave suprahépatique est anastomosée. En même temps, la veine cave inférieure infrahépatique est clampée et la canule de la veine porte du donneur est connectée à la canule de l’extrémité receveuse correspondante pour rétablir le flux sanguin veineux porte. (D) La veine cave inférieure infrahépatique est anastomosée, puis l’artère hépatique et le canal biliaire sont anastomosés. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65879/65879fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65879/65879fig03.jpg"> Figure 3 : Évaluation de la bilirubine totale et de l’ALT après OLTx porcin dans le groupe SCS (n = 5) et le groupe DHOPE-NMP (n = 6). (A,B) Analyse de la bilirubine totale et de l’ALT après OLTx porcin aux points temporels indiqués. Les données représentent la moyenne ± écart-type. L’ANOVA à deux facteurs a été utilisée pour analyser les différences entre les deux groupes. Groupe DHOPE-NMP c. Groupe SCS : *P &lt; 0,05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65879/65879fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
Figure supplémentaire 1 : Courbe de survie de Kaplan-Meier d’OLTx porcins suivant le groupe SCS (n = 8) et le groupe DHOPE-NMP (n = 8). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65879/Supplementary%20Figure%201.zip" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.</a>
Figure supplémentaire 2 : Évaluation de la pression de la veine porte (pression PV), du lactate sérique et de l’ALT pendant la NMP après 8 h de traitements DHOPE (n = 6) ou SCS (n = 6). (A-C) Analyse de la pression PV, du lactate et de l’ALT pendant la NMP aux points temporels indiqués. Les données représentent la moyenne ± écart-type. L’ANOVA à deux facteurs a été utilisée pour analyser les différences entre les deux groupes. Groupe DHOPE vs. Groupe SCS : *P &lt; 0,05, **P &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65879/Supplementary%20Figure%202.zip" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.</a>

Conservation du don de porcs après mort circulatoire (DDC) par perfusion et transplantation hépatique orthotopique

Conventional static cold storage (SCS) exacerbates ischemic injury in the DCD liver, leading to severe complications for transplant recipients. To address ...

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Research

Recherche

JoVE Journal

Bioengineering

Bioingénierie

L’étude de la physiologie des organes animaux peut être réalisée en réalisant un système de perfusion expérimental ex vivo. L’ajout d’un rein porcin, en tant qu’organe homéostatique, à notre modèle de perfusion hépatique ex vivo précédemment développé peut être une étape principale pour obtenir un meilleur environnement physiologique.

Étapes de l’expérience foie-rein porcin autologue perfusé ex vivo

Greffons marginaux, tels que les foies gras, les greffes de donneurs plus âgés, ou des foies prélevés après la mort cardiocirculatoire (DDC) tolèrent, stockage statique classique froide mal. Nous avons développé un nouveau modèle de subnormothermic ex vivo perfusion du foie pour la conservation, l'évaluation et la réparation des greffes de foie marginaux avant la transplantation.

Technique de Subnormothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Foie de perfusion pour l&#39;entreposage, de l&#39;évaluation et de réparation des marginaux greffes du foie

La recherche expérimentale sur les animaux joue un rôle central dans le développement de la pratique clinique de la transplantation. Le modèle de transplantation hépatique orthotopique porcine (OLTx) ressemble beaucoup aux conditions humaines et est fréquemment utilisé dans la recherche clinique. Le protocole suivant contient toutes les informations nécessaires pour un modèle OLTx porcin fiable utilisant un shunt porto-caval-jugulaire actif.

Technique de porc approvisionnement du foie et la transplantation orthotopique utilisant un Active Porto-Caval Shunt

Ce protocole montre une approche simple et flexible pour l'évaluation de nouveaux agents de conditionnement ou de stratégies pour augmenter la faisabilité du don cardiaque après la mort circulatoire.

Modèle préclinique du don cardiaque après la mort circulatoire

Le protocole combine une technique de récupération rapide de refroidissement pulmonaire avec une perfusion régionale normothermique abdominale pour l’obtention de greffes abdominales chez des donneurs asystoles contrôlés, ce qui est une méthode sûre et utile pour élargir le bassin de donneurs.

Obtention d’un rétablissement rapide des poumons combinée à une perfusion régionale normamique abdominale dans le cadre d’un don contrôlé après une mort circulatoire

Le protocole décrit un modèle de don de gros animaux (porcins) après mort circulatoire, suivi d’une perfusion régionale normothermique thoraco-abdominale qui simule étroitement le scénario clinique de la transplantation cardiaque et a le potentiel de faciliter les études et les stratégies thérapeutiques.

Modèle de don chez les grands animaux après mort circulatoire et perfusion régionale normamère pour l’évaluation cardiaque

Dans ce protocole, un modèle de transplantation hépatique orthotopique porcine après entreposage statique à froid d’organes de donneurs pendant 20 h sans pontage veino-veineux pendant la greffe est décrit. L’approche utilise une technique chirurgicale simplifiée avec minimisation de la phase hépatique et une gestion sophistiquée du volume et du vasopresseur.

Transplantation hépatique porcine sans pontage veino-veineux comme modèle de donneur à critères étendus

Le modèle porcin de perfusion hépatique normothermique (NMP), décrit ici, peut être utilisé avec succès pour étudier la NMP en tant que stratégie de préservation, outil d’évaluation de la viabilité et plate-forme pour la réparation d’organes. Il a une grande valeur translationnelle, mais il est techniquement difficile et demande beaucoup de main-d’œuvre.

Perfusion hépatique isolée normomère porcine

Le protocole décrit ici un modèle porcin haute fidélité de transplantation cardiaque après un don après mort circulatoire en utilisant la perfusion ex vivo de l’allogreffe.

Un modèle porcin haute-fidélité de transplantation cardiaque orthotopique après don après mort circulatoire

Une méthode pour rapidement et complètement éliminer les composants cellulaires à partir d'un coeur de porc intacte grâce à une perfusion rétrograde est décrite. Cette méthode permet d'obtenir un site spécifique de la matrice extracellulaire cardiaque échafaudage qui a le potentiel pour être utilisé dans de multiples applications cliniques.

Procédure de décellularisation de coeur de porc par perfusion coronaire rétrograde

Découvrez la préservation hépatique par perfusion à température variable chez le porc pour améliorer les greffes de foies DDC. Cette méthode optimise la qualité des organes et minimise les dommages ischémiques.

Conservation du don de porcs après mort circulatoire (DDC) par perfusion et transplantation hépatique orthotopique

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