Name: Les effets antihypertenseurs et les mécanismes de la décoction de Huotan Jiedu Tongluo chez les rats atteints d’hypertension de type H (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-17T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Découvrez les effets antihypertenseurs de la décoction Huotan Jiedu Tongluo chez les rats atteints d'hypertension de type H. Cette étude révèle que le traitement inhibe l'apoptose induite par le stress réticulaire.

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Ce travail a été soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de la province de Jilin (no. YDZJ202301ZYTS189).

Effets antihypertenseurs de Huotan Jiedu Tongluo chez les rats hypertendus de type H

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<li>Tian, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Huotan+Jiedu+Tongluo+decoction+inhibits+balloon-injury-induced+carotid+artery+intimal+hyperplasia+in+the+rat+through+the+perk-eif2%CE%B1-atf4+pathway+and+autophagy+mediation%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Huotan Jiedu Tongluo decoction inhibits balloon-injury-induced carotid artery intimal hyperplasia in the rat through the perk-eif2α-atf4 pathway and autophagy mediation.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536237(2021).</li>
<li>Simko, F., Pechanova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+roles+of+melatonin+and+chronotherapy+among+the+new+trends+in+hypertension+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pineal+Res%22%5BJournal%5D)">Potential roles of melatonin and chronotherapy among the new trends in hypertension treatment.</a> J Pineal Res. 47 (2), 127-133 (2009).</li>
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<li>Rodrigo, R., Passalacqua, W., Araya, J., Orellana, M., Rivera, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homocysteine+and+essential+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Homocysteine and essential hypertension.</a> J Clin Pharmacol. 43 (12), 1299-1306 (2003).</li>
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<li>dos Santos, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+that+folic+acid+deficiency+is+a+major+determinant+of+hyperhomocysteinemia+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Metab+Brain+Dis%22%5BJournal%5D)">Evidence that folic acid deficiency is a major determinant of hyperhomocysteinemia in Parkinson's disease.</a> Metab Brain Dis. 24 (2), 257-269 (2009).</li>
<li>Zhao, W., Gao, F., Lv, L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+of+hypertension+and+homocysteine+increases+the+risk+of+mortality+among+middle-aged+and+older+population+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">The interaction of hypertension and homocysteine increases the risk of mortality among middle-aged and older population in the United States.</a> J Hypertens. 40 (2), 254-263 (2022).</li>
<li>Woo, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperhomocyst%28e%29inemia+is+a+risk+factor+for+arterial+endothelial+dysfunction+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Hyperhomocyst(e)inemia is a risk factor for arterial endothelial dysfunction in humans.</a> Circulation. 96 (8), 2542-2544 (1997).</li>
<li>Lu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intervention+of+enalapril+maleate+and+folic+acid+tablet+on+the+expressions+of+the+grp78+and+chop+and+vascular+remodeling+in+the+vascular+smooth+muscle+cells+of+h-hypertensive+rats+with+homocysteine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Rev+Med+Pharmaco%22%5BJournal%5D)">The intervention of enalapril maleate and folic acid tablet on the expressions of the grp78 and chop and vascular remodeling in the vascular smooth muscle cells of h-hypertensive rats with homocysteine.</a> Eur Rev Med Pharmaco. 22 (7), 2160-2168 (2018).</li>
<li>López-García, P., Moreira, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+forces+for+the+origin+of+the+eukaryotic+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22BioEssays%22%5BJournal%5D)">Selective forces for the origin of the eukaryotic nucleus.</a> BioEssays. 28 (5), 525-533 (2006).</li>
<li>Minamino, T., Komuro, I., Kitakaze, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+as+a+therapeutic+target+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress as a therapeutic target in cardiovascular disease.</a> Circ Res. 107 (9), 1071-1082 (2010).</li>
<li>Chen, X., Cubillos-Ruiz, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+signals+in+the+tumour+and+its+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress signals in the tumour and its microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 21 (2), 71-88 (2021).</li>
<li>Ji, C., Kaplowitz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperhomocysteinemia%2C+endoplasmic+reticulum+stress%2C+and+alcoholic+liver+injury%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroentero%22%5BJournal%5D)">Hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and alcoholic liver injury.</a> World J Gastroentero. 10 (12), 1699-1708 (2004).</li>
<li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homocysteine+induces+programmed+cell+death+in+human+vascular+endothelial+cells+through+activation+of+the+unfolded+protein+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cells through activation of the unfolded protein response.</a> J Biol Chem. 276 (38), 35867-35874 (2001).</li>
<li>Cunard, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress%2C+a+driver+or+an+innocent+bystander+in+endothelial+dysfunction+associated+with+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Cur+Hypertens+Rep%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress, a driver or an innocent bystander in endothelial dysfunction associated with hypertension.</a> Cur Hypertens Rep. 19 (8), 64(2017).</li>
<li>Casas, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GRP78+at+the+centre+of+the+stage+in+cancer+and+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">GRP78 at the centre of the stage in cancer and neuroprotection.</a> Front Neurosci. 11, 177(2017).</li>
<li>Urano, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+of+stress+in+the+ER+to+activation+of+JNK+protein+kinases+by+transmembrane+protein+kinase+ire1%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Coupling of stress in the ER to activation of JNK protein kinases by transmembrane protein kinase ire1.</a> Science. 287 (5453), 664-666 (2000).</li>
<li>Borghi, A., Verstrepen, L., Beyaert, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRAF2+multitasking+in+tnf+receptor-induced+signaling+to+nf-%CE%BAb%2C+map+kinases+and+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">TRAF2 multitasking in tnf receptor-induced signaling to nf-κb, map kinases and cell death.</a> Biochem Pharmacol. 116, 1-10 (2016).</li>
<li>Wen, X. -R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butylphthalide+suppresses+neuronal+cells+apoptosis+and+inhibits+JNK-caspase3+signaling+pathway+after+brain+ischemia+%2Freperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Butylphthalide suppresses neuronal cells apoptosis and inhibits JNK-caspase3 signaling pathway after brain ischemia /reperfusion in rats.</a> Cell Mol Neurobiol. 36 (7), 1087-1095 (2016).</li>
<li>Jin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine-threonine+protein+kinase+activation+may+be+an+effective+target+for+reducing+neuronal+apoptosis+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Serine-threonine protein kinase activation may be an effective target for reducing neuronal apoptosis after spinal cord injury.</a> Neural Regen Res. 10 (11), 1830-1835 (2015).</li>
<li>Xu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen+and+propofol+combination+therapy+inhibits+endoplasmic+reticulum+stress+and+remarkably+attenuates+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+and+ogd+injury+in+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Estrogen and propofol combination therapy inhibits endoplasmic reticulum stress and remarkably attenuates cerebral ischemia-reperfusion injury and ogd injury in hippocampus.</a> Biomed Pharmacother. 108, 1596-1606 (2018).</li>
</ol>

Nous déclarons que la recherche a été menée en l’absence de toute relation commerciale ou financière qui pourrait être interprétée comme un conflit d’intérêts potentiel.

L’hypertension est l’un des troubles cardiovasculaires les plus courants qui touche un tiers de la population adulte et augmente le risque d’accident vasculaire cérébral, de maladie coronarienne et d’insuffisance cardiaque et rénale8. L’hypertension de type H est un type particulier d’hypertension qui fait référence à la cooccurrence de l’hypertension primaire et de l’augmentation des taux d’homocystéine et a attiré une large attention au fil des ans9. Au cours des dernières années, l’utilisation de l’EM orale combinée à des médicaments antihypertenseurs a montré une efficacité améliorée en termes de contrôle de la pression artérielle et d’abaissement des taux sanguins de Hcy, mais il existe encore de nombreuses contre-indications, effets secondaires, résistance aux médicaments et autres lacunes telles que maux de tête, étourdissements, fatigue, toux et hypotension. La médecine traditionnelle chinoise offre des avantages dans le traitement de l’hypertension de type H grâce à son approche personnalisée, en s’attaquant aux causes sous-jacentes et en fournissant des effets complémentaires avec moins d’effets secondaires, permettant une prise en charge efficace à long terme de la maladie. Dans cette étude, nous avons constaté que la formule de la médecine traditionnelle chinoise HTJDTLD avait des effets antihypertenseurs évidents sur l’hypertension de type H induite par la méthionine. Plus important encore, HTJDTLD a considérablement amélioré l’efficacité antihypertensive de l’EM, qui est le premier traitement approuvé de l’hypertension associée à une élévation de Hcy. Cependant, l’administration d’EM produit parfois des effets indésirables. 
Le niveau de Hcy, un acide aminé contenant du soufre formé lors du métabolisme de la méthionine, est élevé dans les maladies cardiovasculaires et neurodégénératives, notamment l’hypertension10, la maladie d’Alzheimer, la démence11 et la maladie de Parkinson12. Une étude antérieure a également indiqué que l’interaction entre l’hypertension et l’homocystéine affecte le risque de mortalité chez les personnes d’âge moyen et plus âgées13. Woo et al.14 ont rapporté que l’augmentation des niveaux de Hcy provoque un dysfonctionnement endothélial et est associée à la rigidité artérielle, qui est le résultat de la destruction des fibres d’élastine et de l’augmentation de la production de collagène. Dans cette étude, nous avons constaté que le taux de Hcy dans le plasma était significativement augmenté dans le groupe de traitement à la méthionine, ce qui était également combiné à une pression artérielle élevée et à des changements pathologiques artériels significatifs. Cependant, le traitement par HTJDTLD a considérablement abaissé la pression artérielle, soulagé les dommages pathologiques artériels et réduit les taux de Hcy. EM, une nouvelle préparation composée contenant à la fois de l’énalapril et de l’acide folique, a été le premier traitement approuvé de l’hypertension associée à une élévation deHcy 15. Il convient de noter que HTJDTLD a amélioré les effets antihypertenseurs, comme l’indique la diminution des niveaux de Hcy et l’atténuation des changements pathologiques.
Le réticulum endoplasmique (RE) est l’organite central pour la synthèse, le repliement et la modification des protéines sécrétées et transmembranaires16. La perturbation de la fonction normale du RE peut entraîner un stress du RE, qui a été associé à de nombreuses maladies et, plus récemment, à l’hypertension17,18. De plus, des rapports antérieurs ont indiqué que Hcy peut activer le stress RE en perturbant la formation de liaisons disulfure et en réduisant la viabilité endothéliale et la vasorelaxation19. Le stress du RE induit par HCY peut également provoquer une apoptose endothéliale20,21. Cependant, il n’a pas été étudié si HTJDTLD exerce des effets antihypertenseurs en régulant le stress du RE. Par conséquent, nous avons exploré les effets antihypertenseurs de HTJDTLD via la voie d’apoptose induite par le stress RE. Le GPR78, également connu sous le nom de Bip, est un chaperon majeur et est activé après le stress22 du RE. Il a également été prouvé que le facteur de nécrose tumorale associé au récepteur 2 (TRAF2) est associé à des réponses cellulaires à des signaux intrinsèques, tels que le stress RE23. TRAF2 initie des cascades de transduction du signal, conduisant à l’activation de la kinase N-terminale c-Jun (JNK) d’une manière dépendante de la cellule et du contexte24. La caspase-3, un exécuteur crucial de l’apoptose, joue un rôle central dans le processus apoptotique et peut être activée par diverses voies à travers divers types de cellules de mammifères25. La caspase-3, un exécuteur crucial de l’apoptose, joue un rôle central dans le processus apoptotique et peut être activée par diverses voies à travers divers types de cellules de mammifères26. La caspase-3 est impliquée dans l’apoptose médiée par le stress du RE et sert de membre commun ultime de différentes cascades apoptotiques27. Dans cette étude, nous avons détecté l’expression génique et protéique de GPR78, TRAF2, JNK et caspase 3 par qRT-PCR et western blot. Les résultats ont montré que le traitement à la méthionine augmentait significativement l’expression génique et protéique de GPR78, TRAF2, JNK et caspase 3, et que HTJDTLD inhibait significativement l’expression de ces gènes et protéines. Cependant, il existe encore certaines limites à l’utilisation exclusive de ces deux méthodes. Il peut être idéal d’évaluer le mécanisme d’action de HTJDTLD en utilisant l’inhibiteur de la voie de signal liée au SERS et en détectant l’apoptose cellulaire par cytométrie en flux. Nous continuerons d’améliorer notre protocole expérimental dans les études futures.
Nos résultats ont indiqué que HTJDTLD avait des effets antihypertenseurs chez les rats atteints d’hypertension de type H induite par la méthionine. Le mécanisme sous-jacent peut impliquer l’inhibition de l’apoptose induite par l’activation du stress du RE. Compte tenu de ses effets antihypertenseurs et de son mécanisme potentiel chez les rats atteints d’hypertension induite par la méthionine, HTJDTLD est très prometteur pour de futures applications thérapeutiques dans le traitement de l’hypertension.

L’hypertension, un facteur de risque majeur de crise cardiaque, d’accident vasculaire cérébral et d’insuffisance rénale, est devenue un défi de santé publique important qui touche 1 milliard de personnes dans le monde1. L’homocystéine (Hcy), un acide aminé contenant le groupe thiol, est un intermédiaire métabolique vital du métabolisme de la méthionine. L’hypertension avec des taux plasmatiques élevés de Hcy est définie comme une hypertension de type H, qui pourrait être un facteur de risque important pour l’apparition et la récurrence de maladies cardio-cérébrovasculaires telles que les accidents vasculaires cérébraux 2,3. Des études récentes ont rapporté que la co-résidence de l’hypertension de type H pourrait aggraver les effets secondaires des maladies cardiovasculaires et cérébrovasculaires4. Notamment, 75 % des patients en Chine souffrant d’hypertension de type H souffrent d’hypertension primaire, ce qui affecte gravement la qualité de vie5. À l’heure actuelle, le traitement de l’hypertension de type H comprend principalement la médecine occidentale. Cependant, il peut entraîner certains effets indésirables et une mauvaise observance et ne peut plus répondre aux besoins de prise en charge globale de l’hypertension de type H.
La médecine traditionnelle chinoise (MTC) est une ressource unique avec une histoire de plus de 2 000 ans en Chine. En raison du besoin non satisfait de contrôle de l’hypertension dans la médecine occidentale, les cliniciens ont commencé à considérer le rôle potentiel de la MTC dans la prévention et le traitement de l’hypertension de type H6. La décoction de Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) est une formule de médecine traditionnelle chinoise formulée par le professeur Yue Deng, s’appuyant sur sa vaste expertise clinique7. Au cours de plus de 20 ans d’application clinique, HTJDTLD a démontré une efficacité remarquable dans le traitement des maladies cardiovasculaires et cérébrovasculaires1. Cependant, il n’a pas été précisé si HTJDTLD a des effets thérapeutiques dans l’hypertension de type H. Par conséquent, nous avons cherché à explorer les effets antihypertenseurs et les mécanismes spécifiques de HTJDTLD chez les rats atteints d’hypertension de type H et à identifier des médicaments thérapeutiques potentiels pour le traitement de l’hypertension de type H.

<table><tbody><tr><td>Synthèse d’ADNc 1er brin SuperMix pour qPCR</td><td>Yeasen, Chine</td><td>11149ES</td><td>kit de synthèse d’ADNc&nbsp ;</td></tr><tr><td>Anticorps anti-bêta-actine</td><td>Bioss, Chine</td><td>bs-0061R</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-caspase-3</td><td>Bioss, Chine</td><td>bs-0081R</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-GPR78</td><td>Abcam, États-Unis</td><td>ab108513</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-JNK</td><td>Abcam, États-Unis</td><td>ab76572</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-p-JNK</td><td>Bioss, Chine</td><td>bsm-52462R</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps IgG anti-lapin</td><td>Bioss, Chine</td><td>bs-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps anti-TRAF2</td><td>Bioss, Chine</td><td>bs-22372R</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad CFX96 Système tactile&nbsp ;</td><td>Système de détection PCR en temps réel</td> <td>Bio-Rad</td><td>CFX96</td></tr><tr><td>ECL Western Blot Substrates</td><td>Merck, MA, USA</td><td>WBULP-10ML</td><td></td></tr><tr><td>Maléate d’énalapril comprimés d’acide folique</td><td>Yangzijiang Pharmaceutical Company, Chine</td><td>20040991</td><td></td></tr><tr><td>FastStart SYBR Green Master</td><td>Sigma</td><td>FSSGMMRO</td><td></td></tr><tr><td>Fructus Trichosanthis</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Aucun numéro de catalogue</td><td></td></tr><tr><td>Hirudo</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Sans numéro</td><td></td>de catalogue</tr><tr><td>Tensiomètre intelligent non invasif.</td><td>Beijing Softron Biotechnology company</td><td>BP-2010A</td><td></td></tr><tr><td>Lonicerae Japonicae Flos</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Aucun numéro</td><td></td>de catalogue</tr><tr><td>Méthionine</td><td>Sigma, États-Unis</td><td>M9500</td><td></td></tr><tr><td>Radix Angelicae Sinensis</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Aucun numéro de catalogue</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Glycyrrhizae</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Sans numéro</td><td></td>de catalogue</tr><tr><td>Radix et Rhizoma Nardostachyos</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Sans numéro</td><td></td>de catalogue</tr><tr><td>Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Sans numéro</td><td></td>de catalogue</tr><tr><td>Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Aucun numéro</td><td></td>de catalogue</tr><tr><td>Radix Scrophulariae</td><td>Le premier hôpital affilié de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Changchun, Chine</td><td>Aucun numéro</td><td></td> de catalogue</tr><tr><td>Rat Hcy ELISA Kits</td><td>Shanghai Meimian Industrial Company, Chine</td><td>MM-0293R2</td><td></td></tr><tr><td>Tampon RIPA</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnology company</td><td>P0013B</td><td></td></tr></tbody></table>

les effets antihypertenseurs et les mécanismes de la décoction de huotan jiedu tongluo chez les rats atteints d’hypertension de type h

The Antihypertensive Effects and Mechanisms of Huotan Jiedu Tongluo Decoction in Rats with H-Type Hypertension

L’hypertension de type H, qui est une forme spécifique d’hypertension caractérisée par des taux élevés d’homocystéine plasmatique (Hcy), est devenue un défi majeur de santé publique dans le monde entier. Cette étude a examiné les effets hypotenseurs et les mécanismes sous-jacents de la décoction de Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), une formule de médecine traditionnelle chinoise très efficace couramment utilisée pour traiter la sténose vasculaire. La méthionine a été utilisée pour induire l’hypertension de type H chez les rats, et le HTJDTLD a été administré par voie intragastrique. Ensuite, les pressions artérielles systolique et diastolique de l’artère caudale de rats ont été mesurées par manométrie caudale non invasive chez le rat. L’évaluation histologique de l’aorte a été réalisée par coloration à l’hématoxyline-éosine (HE). Le test immuno-enzymatique (ELISA) a été utilisé pour mesurer les niveaux de Hcy, et la réaction en chaîne par polymérase quantitative de la transcriptase inverse (qRT-PCR) et le western blot ont été utilisés pour déterminer les niveaux d’ARNm et de protéines de la protéine régulatrice du glucose 78 (GRP78), du facteur associé au récepteur du facteur de nécrose tumorale (TNF) (TRAF2), des kinases N-terminales c-Jun (JNK) et de la caspase-3. Les résultats ont montré que HTJDTLD abaissait significativement la pression artérielle, atténuait les lésions histopathologiques et diminuait les taux de Hcy après un traitement à la méthionine. De plus, HTJDTLD a inhibé de manière significative l’expression génique et protéique de GRP78, JNK, TRAF2 et caspase 3, qui sont principalement impliqués dans la voie d’apoptose induite par le stress du réticulum endoplasmique (RE). Dans l’ensemble, les résultats ont indiqué que HTJDTLD avait des effets antihypertenseurs efficaces chez les rats atteints d’hypertension de type H et ont révélé les mécanismes antihypertenseurs associés à l’inhibition de l’activation de la voie d’apoptose induite par le stress du RE.

Comme le montrent les tableaux 4 et 5, la pression artérielle systolique (TAS) et la pression artérielle diastolique (TAD) étaient significativement plus élevées dans le groupe MET que dans le groupe CON de 1 à 4 semaines. Après le traitement par HTJDTLD, la TAS et la TAD des rats étaient significativement plus faibles que celles du groupe MET. Notamment, l’utilisation combinée de HTJDTLD et d’EM a eu un effet antihypertenseur plus fort que le traitement HTJDTLD seul.
Selon la coloration HE et la coloration trichrome de Masson, l’endomètre de la paroi vasculaire aortique était incomplet et non lisse, et le milieu était considérablement épaissi. Il y avait une prolifération et une hypertrophie des cellules musculaires lisses, le nombre de couches d’arrangement a augmenté et les fibres ont été désordonnées dans le groupe MET par rapport à celles du groupe CON. Cependant, l’endomètre vasculaire s’est rétabli plus complètement et plus facilement, l’épaississement des milieux a été considérablement réduit et les lésions intimales dans les groupes MET + HTJDTLD + EM, MET + EM et MET + HTJDTLD ont été significativement soulagées (Figure 1 et Figure 2). De plus, la concentration de Hcy dans le groupe méthionine était 2 fois plus élevée que dans le groupe témoin. Cependant, les concentrations de Hcy dans les groupes MET + HTJDTLD + EM, MET + EM et MET + HTJDTLD étaient significativement plus faibles que celles du groupe MET. Notamment, la réduction la plus significative a été observée dans le groupe MET + HTJDTLD + EM, qui était environ 1 fois plus faible que celle du groupe MET (figure 3). Les résultats de l’expression de l’ARNm et des protéines ont montré que l’expression de GPR78, TRAF2, JNK, p-JNK et caspase-3 était manifestement régulée à la hausse après le traitement à la méthionine. Cependant, HTJDTLD, EM et la combinaison de HTJDTLD et EM ont inhibé de manière significative la régulation positive de GPR78, TRAF2, JNK et caspase-3. Notamment, l’application combinée de HTJDTLD et de EM a eu l’effet le plus significatif (figure 4 et figure 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig01.jpg"> Figure 1 : Coloration HE. Changements histologiques des tissus de l’aorte thoracique à partir de (A) groupe CON, (B) groupe MET, (C) MET + HTJDTLD + groupe EM, (D) groupe MET + EM et (E) groupe MET + HTJDTLD. Les noyaux sont colorés en bleu, tandis que le cytoplasme et la matrice extracellulaire présentent des degrés variables de coloration rose (100x). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig02.jpg"> Figure 2 : Coloration de Masson. (A) Groupe CON, (B) Groupe MET, (C) MET + HTJDTLD + groupe EM, (D) MET + groupe EM et (E) Groupe MET + HTJDTLD. Une coloration Masson des vaisseaux aortiques dans chaque groupe a été réalisée pour évaluer l’effet de HTJDTLD sur le dépôt et la fibrose (100x). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig03v2.jpg"> Figure 3 : Le niveau de Hcy. La concentration sérique de Hcy de chaque groupe a été détectée par ELISA. Les données ont été présentées sous forme de moyenne ± ET (n = 6, ET sont les suivants : CON : 236,5 nmol/L, MET : 185 nmol/L, MET + HTJDTLD + EM : 126,8 nmol/L, MET + EM : 124 nmol/L, MET + HTJDTLD : 325 nmol/L). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig04.jpg"> Figure 4 : L’expression de l’ARNm de GRP78, TRAF2, JNK et caspase-3. Après un traitement par MET, MET + EM + HTJDTLD et MET + EM, l’expression des gènes liés à l’ERS a été détectée par qRT-PCR. Les données ont été présentées sous forme de moyenne ± ET (n = 6, ET comme suit : GRP78 [CON : 0,12, MET : 0,13, MET + HTJDTLD + EM : 0,11, MET + EM : 0,17, MET + HTJDTLD : 0,12] ; TRAF2 [CON : 0,09, MET : 0,09, MET + HTJDTLD + EM : 0,07, MET + EM : 0,11, MET + HTJDTLD : 0,13] ; JNK [CON : 0,99, MET : 0,01, MET + HTJDTLD + EM : 0,03, MET + EM : 0,06, MET + HTJDTLD : 0,07 ; caspase-8 [CON : 0,06, MET : 0,10, MET + HTJDTLD + EM : 0,01, MET + EM : 0,13, MET + HTJDTLD : 0,03). * représente une différence significative par rapport au groupe CON, # représente une différence significative par rapport au groupe MET, Δ représente une différence significative par rapport au groupe MET + HTJDTLD, et ∇ représente une différence significative par rapport au groupe MET + EM. p &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig04large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig05.jpg"> Figure 5 : L’expression protéique de GRP78, TRAF2, JNK, p-JNK et Caspase-3. (A) Les échantillons de protéines ont été analysés par western blot avec des anticorps GRP78, TRAF2, JNK, p-JNK et Caspase-3. Le GAPDH a été utilisé comme témoin. (B) La quantification des protéines GRP78, RAF2, JNK, p-JNK et Caspase-3 a été déterminée par densitométrie et a été normalisée en GAPDH. Les données ont été présentées sous forme de moyenne ± d’écart-type (n = 6). * représente une différence significative par rapport au groupe CON, p &lt; 0,01. # représente une différence significative par rapport au groupe MET, Δ représente une différence significative par rapport au groupe MET + HTJDTLD, et ∇ représente une différence significative par rapport au groupe MET + EM. p &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig05large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Réaction de transcription inverse</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Composant</td>
			<td>Contenance (mL)</td>
		</tr><tr><td>ARN total</td>
			<td>2</td>
		</tr><tr><td>Digesteur d’ADNg Mix</td>
			<td>3</td>
		</tr><tr><td>SuperMix plus</td>
			<td>5</td>
		</tr><tr><td>Eau sans RNase</td>
			<td>10</td>
		</tr><tr><td colspan="2">Le programme de réaction était le suivant : 25 °C, 5 min ; 55 °C, 15 min ; 85 °C, 5 min.</td>
		</tr><tr><td>RT-PCR</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Composant</td>
			<td>Contenance (mL)</td>
		</tr><tr><td>Modèle</td>
			<td>2</td>
		</tr><tr><td>Amorce avant (10μM)</td>
			<td>0.4</td>
		</tr><tr><td>Amorce inversée (10μM)</td>
			<td>0.4</td>
		</tr><tr><td>Mélange qPCR vert</td>
			<td>10</td>
		</tr><tr><td>Eau sans nucléases</td>
			<td>7.2</td>
		</tr><tr><td colspan="2">Le programme de réaction était le suivant : pré-dénaturation 95 °C, 5 min ; dénaturation 95 °C, 10 s ; recuit/extension 60 °C, 45 s, pour un total de 40 cycles.</td>
		</tr></tbody></table>Tableau 1 : Volumes de réaction de transcription inverse.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Nom de base</td>
			<td>Séquence (5' à 3')</td>
		</tr><tr><td>GPR78-F</td>
			<td>CGTCGTATGTGGCCTTCACT</td>
		</tr><tr><td>GPR78-R</td>
			<td>ATTCCAAGTGCGTCCGATGA</td>
		</tr><tr><td>TRAF2-F</td>
			<td>GAAGGGAGCATTCCTAGACC</td>
		</tr><tr><td>TRAF2-R</td>
			<td>GAAGGGAGCATTCCTAGACC</td>
		</tr><tr><td>JNK-F</td>
			<td>GTCAGAATCCGAACGAGA</td>
		</tr><tr><td>JNK-R</td>
			<td>GTCTACGCAGGCAATCG</td>
		</tr><tr><td>Caspase-3-F</td>
			<td>GCGGTATTGAGACAGACAGTGGAAC</td>
		</tr><tr><td>Caspase-3-R</td>
			<td>GCGGTAGAGTAAGCATACAGGAAGTC</td>
		</tr></tbody></table>Tableau 2 : Liste des amorces.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Gel de séparation à 10 %, système de 5 mL :</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Composant</td>
			<td>Contenance (mL)</td>
		</tr><tr><td>H2O</td>
			<td>1.9</td>
		</tr><tr><td>30% acrylamide</td>
			<td>1.7</td>
		</tr><tr><td>1,5 mol/L de Tris-HCL (pH 8,8)</td>
			<td>1.3</td>
		</tr><tr><td>10 % FDS</td>
			<td>0.05</td>
		</tr><tr><td>10 % de persulfate d’ammonium</td>
			<td>0.05</td>
		</tr><tr><td>TEMED</td>
			<td>0.002</td>
		</tr><tr><td>Gel concentré à 5 %, système de 3 mL :</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Composant</td>
			<td>Contenance (mL)</td>
		</tr><tr><td>H2O</td>
			<td>2.1</td>
		</tr><tr><td>30% acrylamide</td>
			<td>0.5</td>
		</tr><tr><td>1,0 mol/L de Tris-HCL (pH 6,8)</td>
			<td>0.38</td>
		</tr><tr><td>10 % FDS</td>
			<td>0.03</td>
		</tr><tr><td>10 % de persulfate d’ammonium</td>
			<td>0.03</td>
		</tr><tr><td>TEMED</td>
			<td>0.003</td>
		</tr></tbody></table>Tableau 3 : Composition du gel de séparation et du gel concentré.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Groupe</td>
			<td>1 semaine</td>
			<td>2 semaine</td>
			<td>3 semaine</td>
			<td>4 semaine</td>
		</tr><tr><td>DUPER</td>
			<td>163,4 ± 6</td>
			<td>150,1 ± 7,0</td>
			<td>134,2 ± 9,9</td>
			<td>158,8 ± 10,2</td>
		</tr><tr><td>RENCONTRÈRENT</td>
			<td>192.1 ± 9.5##</td>
			<td>166.7 ± 12.8#</td>
			<td>177.3 ± 19.7##</td>
			<td>187 ± 23.6##</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD+EM</td>
			<td>165.4 ± 9.2##</td>
			<td>148,9 ± 11,1*</td>
			<td>134,5 ± 12,3**</td>
			<td>159,2 ± 19,6**</td>
		</tr><tr><td>MET+EM</td>
			<td>173 ± 9,1##</td>
			<td>149,9 ± 18,7*</td>
			<td>145 ± 12,5**</td>
			<td>162,4 ± 19,1**</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD</td>
			<td>176.7 ± 8.4##</td>
			<td>154,9 ± 22,8</td>
			<td>168,3 ± 10,2</td>
			<td>172,2 ± 17,4</td>
		</tr></tbody></table>Tableau 4 : Les changements de pression systolique. #p &lt; 0,05 et ##p &lt; 0,01 par rapport au groupe témoin, *p &lt;0,05 et **p &lt; 0,01 par rapport au groupe MET.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Groupe</td>
			<td>1 semaine</td>
			<td>2 semaine</td>
			<td>3 semaine</td>
			<td>4 semaine</td>
		</tr><tr><td>DUPER</td>
			<td>138,4 ± 13,8</td>
			<td>121,2 ± 12,5</td>
			<td>107 ± 19,7</td>
			<td>131,1 ± 16,3</td>
		</tr><tr><td>RENCONTRÈRENT</td>
			<td>147.9 ± 7.7#</td>
			<td>131 ± 11,9</td>
			<td>143.7 ± 19.6##</td>
			<td>146 ± 21.4##</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD+EM</td>
			<td>139,4 ± 10</td>
			<td>123,1 ± 18,5</td>
			<td>117,1 ± 9,6**</td>
			<td>129,2 ± 18,6**</td>
		</tr><tr><td>MET+EM</td>
			<td>140,9 ± 13,4</td>
			<td>119,6 ± 7,8</td>
			<td>123,6 ± 10,8**</td>
			<td>128 ± 25,2**</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD</td>
			<td>140,4 ± 11,3</td>
			<td>129,5 ± 11,1</td>
			<td>138,3 ± 15,1</td>
			<td>132,8 ± 16</td>
		</tr></tbody></table>Tableau 5 : Les changements de la pression diastolique.#p &lt; 0,05 et ##p &lt; 0,01 par rapport au groupe témoin, **p &lt; 0,01 par rapport au groupe MET.

Ici, nous présentons un protocole pour induire l’hypertension de type H et évaluons les effets antihypertenseurs de la décoction Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) administrée par voie intragastrique. Chez les rats atteints d’hypertension de type H, HTJDTLD a eu des effets antihypertenseurs efficaces, peut-être associés à l’inhibition de l’activation de la voie d’apoptose induite par le stress du réticulum endoplasmique (RE).

Les effets antihypertenseurs et les mécanismes de la décoction de Huotan Jiedu Tongluo chez les rats atteints d’hypertension de type H

H-type hypertension, which is a specific form of hypertension characterized by elevated plasma homocysteine (Hcy) levels, has become a major public health ...

L’hypertension de type H est devenue un défi de santé publique important pour l’homme. Il s’appuie principalement sur le traitement de la médecine occidentale, qui peut avoir des effets tristes. Notre recherche explore les effets antihypertenseurs et les mécanismes de la décoction Huotan Jiedu Tongluo, une formule de médecine traditionnelle chinoise, chez les rats atteints d’hypertension de type H.Notre étude a indiqué que la décoction de Huotan Jiedu Tongluo avait des effets antihypertenseurs chez les rats souffrant d’hypertension de type H. Le mécanisme sous-jacent peut impliquer l’inhibition de l’apoptose induite par l’activation du stress du RE, qui constitue une option de traitement efficace pour les patients. Nous ferons exploser les biomarqueurs potentiels pour le diagnostic précoce et le pronostic et développerons de nouveaux médicaments thérapeutiques pour l’hypertension de type H à l’avenir.

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