Name: Évaluation de la cytotoxicité des métabolites des pesticides triazoles typiques dans les plantes (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-22T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Découvrez une méthode innovante pour évaluer la cytotoxicité des métabolites de pesticides triazoles dans les plantes. Ce protocole combine culture de cals végétaux et tests sur lignées cellulaires humaines.

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<meta charset="utf8"></head><body>Estimation de la cytotoxicité intégrale du métabolite des pesticides triazoles dans les plantes

<ol><li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake+of+halogenated+organic+compounds+%28HOCs%29+into+peanut+and+corn+during+the+whole+life+cycle+grown+in+an+agricultural+field%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Uptake of halogenated organic compounds (HOCs) into peanut and corn during the whole life cycle grown in an agricultural field.</a> Environ Pollut. 263, 114400(2020).</li>
<li>Wu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trace+metals+in+e-waste+lead+to+serious+health+risk+through+consumption+of+rice+growing+near+an+abandoned+e-waste+recycling+site%3A+Comparisons+with+PBDEs+and+AHFRs%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Trace metals in e-waste lead to serious health risk through consumption of rice growing near an abandoned e-waste recycling site: Comparisons with PBDEs and AHFRs.</a> Environ Pollut. 247, 46-54 (2019).</li>
<li>Liu, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tetrabromobisphenol-A%2FS+and+nine+novel+analogs+in+biological+samples+from+the+Chinese+Bohai+Sea%3A+Implications+for+trophic+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Tetrabromobisphenol-A/S and nine novel analogs in biological samples from the Chinese Bohai Sea: Implications for trophic transfer.</a> Environ Sci Technol. 50 (8), 4203-4211 (2016).</li>
<li>Awasthi, A. K., Zeng, X., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+pollution+of+electronic+waste+recycling+in+India%3A+A+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Environmental pollution of electronic waste recycling in India: A critical review.</a> Environ Pollut. 211, 259-270 (2016).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+accumulation+and+transformation+of+brominated+and+organophosphate+flame+retardants%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Pollut%22%5BJournal%5D)">Plant accumulation and transformation of brominated and organophosphate flame retardants: A review.</a> Environ Pollut. 288, 117742(2021).</li>
<li>Sandermann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Higher+plant+metabolism+of+xenobiotics%3A+the+%27green+liver%27+concept%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogenetics%22%5BJournal%5D)">Higher plant metabolism of xenobiotics: the 'green liver' concept.</a> Pharmacogenetics. 4, 225-241 (1994).</li>
<li>Zhang, J. J., Yang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolism+and+detoxification+of+pesticides+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Metabolism and detoxification of pesticides in plants.</a> Sci Total Environ. 790, 148034(2021).</li>
<li>Debenest, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecotoxicity+of+a+brominated+flame+retardant+%28tetrabromobisphenol+A%29+and+its+derivatives+to+aquatic+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Phys+C%22%5BJournal%5D)">Ecotoxicity of a brominated flame retardant (tetrabromobisphenol A) and its derivatives to aquatic organisms.</a> Comp Biochem Phys C. 152 (4), 407-412 (2010).</li>
<li>McCormick, J. M., Van Es, T., Cooper, K. R., White, L. A., Haggblom, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbially+mediated+O-methylation+of+bisphenol+A+results+in+metabolites+with+increased+toxicity+to+the+developing+zebrafish+%28Danio+rerio%29+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Microbially mediated O-methylation of bisphenol A results in metabolites with increased toxicity to the developing zebrafish (Danio rerio) embryo.</a> Environ Sci Technol. 45 (15), 6567-6574 (2011).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+metabolic+pathways+of+2%2C4%2C6-tribromophenol+in+rice+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Multiple metabolic pathways of 2,4,6-tribromophenol in rice plants.</a> Environ Sci Technol. 53 (13), 7473-7482 (2019).</li>
<li>Hou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycosylation+of+tetrabromobisphenol+A+in+pumpkin%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Glycosylation of tetrabromobisphenol A in pumpkin.</a> Environ Sci Technol. 53 (15), 8805-8812 (2019).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidating+the+metabolism+of+2%2C4-Dibromophenol+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Elucidating the metabolism of 2,4-Dibromophenol in plants.</a> J Vis Exp. (192), e65089(2023).</li>
<li>Zucco, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Inter-laboratory+study+to+evaluate+the+effects+of+medium+composition+on+the+differentiation+and+barrier+function+of+Caco-2+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Atla-Altern+Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">An Inter-laboratory study to evaluate the effects of medium composition on the differentiation and barrier function of Caco-2 cell lines.</a> Atla-Altern Lab Anim. 33, 603-618 (2005).</li>
<li>Eisenbrand, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+in+vitro+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methods of in vitro toxicology.</a> Food Chem Toxicol. 40, 193-236 (2002).</li>
<li>Sambuy, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Caco-2+cell+line+as+a+model+of+the+intestinal+barrier%3A+influence+of+cell+and+culture-related+factors+on+Caco-2+cell+functional+characteristics%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The Caco-2 cell line as a model of the intestinal barrier: influence of cell and culture-related factors on Caco-2 cell functional characteristics.</a> Cell Biol Toxicol. 21, 1-26 (2005).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uptake%2C+translocation%2C+and+subcellular+distribution+of+three+triazole+pesticides+in+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Pollut+Res%22%5BJournal%5D)">Uptake, translocation, and subcellular distribution of three triazole pesticides in rice.</a> Environ Sci Pollut Res. 29 (17), 25581-25590 (2022).</li>
<li>Satapute, P., Kamble, M. V., Adhikari, S. S., Jogaiah, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+triazole+pesticides+on+tillage+soil+microbial+populations+and+metabolic+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Influence of triazole pesticides on tillage soil microbial populations and metabolic changes.</a> Sci Total Environ. 651, 2334-2344 (2019).</li>
<li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+possible+but+unrecognized+risk+of+acceptable+daily+intake+dose+triazole+pesticides+exposure-bile+acid+disturbance+induced+pharmacokinetic+changes+of+oral+medication%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">A possible but unrecognized risk of acceptable daily intake dose triazole pesticides exposure-bile acid disturbance induced pharmacokinetic changes of oral medication.</a> Chemosphere. 322, 138209(2023).</li>
<li>Louis, K. S., Siegel, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+analysis+using+trypan+blue%3A+manual+and+automated+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods.</a> Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Acide 2,4-dichlorophénoxyacétique</td><td>WAKO</td><td>1 mg/L</td><td></td></tr><tr><td>20 % H2O2</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>10011218-500ML</td><td></td></tr><tr><td>6-benzylaminopurine</td><td>WAKO</td><td>0,5 mg/L</td><td></td></tr><tr><td>75 % éthanol</td><td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>1269101-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>Plaque à 96 puits</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acetonitrile</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubateur de climat artificiel</td><td>Ningbo DongNan Lab Equipment Co., Ltd</td><td>RDN-1000A-4</td><td></td></tr><tr><td>Autoclaves</td><td>STIK</td><td>MJ-Series</td><td></td></tr><tr><td>Caco-2 cellules</td><td>Nuoyang Biotechnology Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Réactifs CCK8</td><td>Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Chine</td><td>G021-1-3</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2</td><td>incubateur Labtrip</td><td>HWJ-3-160</td><td></td></tr><tr><td>Diméthyl sulfoxyde</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>D8371</td><td></td></tr><tr><td>Diniconazole, 98.7 %</td> <td>J& K Scientific</td><td>83657-24-3</td><td></td></tr><tr><td>Eagle’s medium modifié de Dulbecco</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>11965-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>balance électronique</td><td>Shanghai Precision Instrument Co., Ltd</td><td>FA1004B</td><td></td></tr><tr><td>Sérum bovin fœtal</td><td>Cellmax</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre à fluorescence</td><td>Tecan</td><td>Infinite M200</td><td></td></tr><tr><td>Flusilazole, 98,5 %</td><td>J& K Scientific</td><td>85509-19-9&nbsp ; &nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Lyophilisateur</td><td>SCIENTZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Broyeur de tissus à haut débit</td><td>SCIENTZ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé</td><td>Leica Biosystems</td><td>DMi1</td><td></td></tr><tr><td>Système Milli-Q Millipore</td><td></td><td>MS1922801-4L</td><td></td></tr><tr><td>Murashige & Skoog medium</td><td>HOPEBIO</td><td>HB8469-7</td><td></td></tr><tr><td>Concentrateur de soufflage d’azote</td><td>AOSHENG</td><td>MD200-2</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>P1022-500 mL</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine Liquide</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>P1400-100 mL</td><td></td></tr><tr><td>Propiconazole, 100 %</td><td>J& K Scientific</td><td>60207-90-1&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Recherche plus</td><td>Eppendorf</td><td>10-1000 &mu ; </td><td></td>L</tr><tr><td>Graines de carotte Little Finger (Daucus carota var. sativus)</td><td>Shouguang Seed Industry Co., Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubateurs secouants</td><td>Shanghai bluepard instruments Co.,Ltd.</td><td>THZ-98AB</td><td></td></tr><tr><td>Tébuconazole, 100 %</td> <td>J& K Scientific</td><td>107534-96-3</td><td></td></tr><tr><td>Solution trypsine-EDTA</td><td>Solarbio Life Sciences</td><td>T1300-100 mL</td><td></td></tr><tr><td>Échographe</td><td>ZKI</td><td>UC-6</td><td></td></tr><tr><td>Stérilisé par UV super clean</td><td>bench AIRTECH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vortex instrument</td><td>Wuxi Laipu Instrument Equipment Co., Ltd</td><td>BV-1010</td><td></td></tr></tbody></table>

Évaluation de la cytotoxicité des métabolites des pesticides triazoles typiques dans les plantes

Assessing Cytotoxicity of Metabolites of Typical Triazole Pesticides in Plants

La figure 1 représente le schéma de la méthode proposée pour la production, l’extraction et l’évaluation de la cytotoxicité des métabolites de pesticides dans les callosités de la carotte. Dans la figure 2, les courbes cinétiques d’absorption et de métabolisme des pesticides testés, à partir desquelles nous pouvons constater que les concentrations de pesticides dans les milieux de culture ont diminué de façon exponentielle, tandis que celles dans les callosités ...

Various organic pollutants have been released into the environment because of anthropogenic activities. These pollutants can be taken up by crop plants, ...

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Ce manuscrit décrit comment les taux de métabolisme des herbicides peuvent être quantifiés efficacement à l’aide de feuilles excisées d’une mauvaise herbe dicotylédones, réduisant ainsi la variabilité et éliminant tout effet confondant possible de l’absorption ou de la translocation de l’herbicide généralement observé dans les essais sur la plante entière.

Mesurer les taux de métabolisme dans l&#39;herbicide Mauvaises herbes dicotylédones avec un dosage excisés Feuille

Les protocoles sont décrits pour évaluer la toxicité des chimies de moustiques adultes et immatures pour développement en tant que de nouvelles classes de larvicides et adulticides, endectocides. Les protocoles permettent à haut débit stable des chimies multiples à la dose de monopoint et évaluation ultérieure par dosage réponse dose pour déterminer la toxicité au contact ou par ingestion.

Protocoles pour tester la toxicité des nouvelles chimies insecticides aux moustiques

Ce travail présente un protocole pour établir une culture de suspension cellulaire dérivée de feuilles de thé(Camellia sinensis L.) qui peut être utilisée pour étudier le métabolisme des composés externes qui peuvent être pris par l'ensemble de la plante, tels que les insecticides.

Étude sur le métabolisme de six insecticides systémiques dans une culture de suspension cellulaire nouvellement établie dérivée du thé (Camellia Sinensis L.) feuilles

Il est souvent nécessaire d'évaluer la cytotoxicité potentielle d'un ensemble de composés sur les cellules cultivées. Ici, nous décrivons une stratégie pour dépister de façon fiable les composés toxiques dans un format de 96 puits.

Une stratégie visant à identifier les composés qui affectent la croissance et la survie des cellules mammifères cultivées à un débit faible à modéré

Le protocole décrit un essai rapide, à haut débit, fiable, peu coûteux et impartial pour déterminer efficacement la viabilité cellulaire. Cet essai est particulièrement utile lorsque les mitochondries des cellules ont été endommagées, ce qui interfère avec d’autres analyses. L’essai utilise le comptage automatisé des cellules tachées de deux teintures nucléaires – Hoechst 33342 et iodure de propidium.

Un essai automatisé de coloration nucléaire différentielle pour la détermination précise de la cytotoxicité mitocan

Ici, nous décrivons un essai biologique utilisant le bromure de 3-(4′,5′-diméthylthiazol-2′-yl)-2,5-diphényltétrazolium (MTT) pour tester les oximes spirocycliques précédemment synthétisés.

Synthèse hétérocyclique spinocyclique fonctionnalisée et dosage de cytotoxicité

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Essais de cytotoxicité avec des lignées cellulaires de poisson zèbre

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Élucider le métabolisme du 2,4-dibromophénol chez les plantes

Les composés thiophénésulfonamides sont des inhibiteurs puissants et spécifiques des régulateurs de détection du quorum Vibrio LuxR/HapR qui bloquent leur activité in vivo, empêchant ainsi la transcription des gènes de virulence, de motilité et de biofilms. Ce protocole détaille comment ces composés sont synthétisés, modélisés in silico et testés in vivo pour leur activité contre LuxR/HapR.

Synthèse et dosage d’inhibiteurs de détection du quorum de Vibrio

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Découvrez une méthode innovante pour évaluer la cytotoxicité des métabolites de pesticides triazoles dans les plantes. Ce protocole combine culture de cals végétaux et tests sur lignées cellulaires humaines.

Évaluation de la cytotoxicité des métabolites des pesticides triazoles typiques dans les plantes

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