Name: Effet antagoniste de Jiawei Shengjiang San sur un modèle de rat de néphropathie diabétique : lié à la voie de signalisation EGFR/MAPK3/1 (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-10T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: Découvrez la pharmacologie de réseau et le docking moléculaire pour étudier le mécanisme d'action du Jiawei Shengjiang San dans le traitement de la néphropathie diabétique chez le rat.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Jiawei Shengjiang San s’attaquera à la néphropathie diabétique à l’aide de la pharmacologie en réseau

<table><tbody><tr><td>2&fois ; SYBR Green qPCR Master Mix&nbsp ;</td><td>Servicebio, Wuhan, Chine</td><td>G3320-05</td><td></td></tr><tr><td>Quantification des protéines urinaires (UTP) sur 24 heuresNanjing</td> <td>Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>3,3'-Diaminobenzidine</td><td>Shanghai Huzheng Biotech, Chine</td><td>91-95-2</td><td></td></tr><tr><td>Instrument d’analyse biochimique automatique</td><td>Hitachi, Japon</td><td>7170A</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol anhydre</td><td>Biosharp, Tianjin, Chine</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps primaires BAX&nbsp ;</td><td>Affinity, États-Unis</td><td>AF0120</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps primaires BCL-2 du rat.</td><td>Affinity, USA</td><td>AF6139</td><td>Rat</td></tr><tr><td>BX53</td><td>microscope Olympus, Japon</td><td>BX53</td><td></td></tr><tr><td>Substitut de chloroforme</td><td>ECOTOP, Guangzhou, Chine</td><td>ES-8522</td><td></td></tr><tr><td>Desmond software&nbsp ;</td><td>New York, NY, États-Unis</td><td>Lancement 2019-1</td><td></td></tr><tr><td>Bain d’eau numérique à température constante</td><td>Changzhou Jintan Liangyou Instrument, Chine</td><td>DK-8D</td><td></td></tr><tr><td>EGFR Anticorps primaires&nbsp ;</td><td>Affinity, États-Unis</td><td>AF6043</td><td>Rat</td></tr><tr><td>Embed-812 RESIN</td><td>Shell Chemical, États-Unis</td><td>14900</td><td></td></tr><tr><td>Glycémie à jeun (FBG)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Analyseur d’étiquettes enzymatiques à longueur d’onde complète de type FC</td><td>Multiskan ; Thermo, États-Unis n</td><td>/a</td><td></td></tr><tr><td>gapdh&nbsp ; Anticorps primaires&nbsp ;</td><td>Affinity, États-Unis</td><td>AF7021</td><td></td></tr><tr><td>Protéine sérique glyquée de rat (GSP)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Microscope électronique à transmission</td><td>Hitachi, Japon</td><td>H-7650</td><td></td></tr><tr><td>Solution de coloration à l’hématoxyline/éosine (HE)</td><td>Servicebio, États-Unis</td><td>G1003</td><td></td></tr><tr><td>Image-Pro Plus</td><td>MEDIA CYBERNETICS, ÉTATS-UNIS</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Instrument d’amplification PCR en temps réel</td><td>Applied Biosystems, États-Unis</td><td>iQ5&nbsp ;</td><td></td></tr><tr><td>Comprimés d’irbésartan</td>, <td>Hangzhou, Sanofi Pharmaceuticals</td><td>, N/A</td><td></td></tr><tr>,<td>Isopropanol</td><td>, Biosharp, Tianjin, Chine</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp ; Granules JWSJS</td><td>Guangdong Yifang Pharmaceutical</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Kodak Image Station 2000 MM imaging system</td><td>Kodak, USA</td><td>IS2000</td><td></td></tr><tr><td>Cholestérol de basse densité (LDL-C)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>MAPK3/1Anticorps primaires&nbsp ;</td><td>Affinity, États-Unis</td><td>AF0155</td><td>Centrifugeuse</td></tr><tr><td>médicale</td><td>pour rats Hunan Xiangyi Développement d’instruments de laboratoire, Chine&nbsp ;</td><td>TGL-16K</td><td></td></tr><tr><td>Mini système de transfert trans-transfert</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Système d’électrophorèse Mini-PROTÉEN</td><td>Bio-Rad, États-Unis</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre NanoVue Plus</td><td>Healthcare Bio-Sciences AB, Suède</td><td>111765</td><td></td></tr><tr><td>p-EGFR Anticorps primaires&nbsp ;</td><td>Affinity, États-Unis</td><td>AF3044</td><td>Rat</td></tr><tr><td>Solution de coloration périodique à l’acide de Schiff (PAS)</td><td>Servicebio, États-Unis</td><td>G1008</td><td></td></tr><tr><td>p-MAPK3/1 Anticorps primaires&nbsp ;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF1015</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps secondaires</td> <td>du rat&nbsp ; Santa Cruz, États-Unis</td><td>sc-2357</td><td>Rabbit</td></tr><tr><td>Streptozotocin</td><td>Sigma, États-Unis</td><td>S0130</td><td></td></tr><tr><td>SureScript First-Strand cDNcn</td><td>Kit GeneCopeia, États-Unis</td><td>QP056T</td><td></td></tr><tr><td>TriQuick Reagent</td><td>Solarbio, Pékin, Chine</td><td>R1100</td><td></td></tr><tr><td>Ultra-Clean Workbench</td><td>Suzhou Purification Equipment, Chine</td><td>SW-CJ-1F&nbsp ;</td><td></td></tr></tbody></table>

effet antagoniste de jiawei shengjiang san sur un modèle de rat de néphropathie diabétique : lié à la voie de signalisation egfr/mapk3/1

Antagonistic Effect of Jiawei Shengjiang San on a Rat Model of Diabetic Nephropathy: Related to EGFR/MAPK3/1 Signaling Pathway

Suite au protocole, 90 principes actifs de JWSJS ont finalement été obtenus à partir de l’analyse après criblage et déduplication selon les normes établies de OB et DL. Ceux-ci comprenaient 20 types d’Hedysarum Multijugum Maxim, 23 types d’Epimrdii Herba, 15 types de Smilacis Glabrae Rhixoma, 16 types de Radix Rhei et Rhizome, quatre types de Curcumaelongae Rhizoma, 15 types de Cigadae Periostracum et six types de composants de Bombyx Batryticatus . Étant donné qu’il y a beaucoup de matières actives dans le JWSJS, seulement 20 sont répertoriés (voir le tableau 1). Après déduplication, 396 cibles correspondant aux principes actifs du JWSJS ont finalement été obtenues.
Après avoir recherché des gènes liés à la maladie, 3035 gènes cibles liés à l’ADN ont finalement été obtenus après fusion et déduplication. Les cibles correspondantes de la DN ont été comparées et analysées avec les cibles des ingrédients actifs des médicaments. L’intersection a été déterminée, ce qui a donné lieu à 227 cibles d’intersection du JWSJS et du DN. Un diagramme de Wayne a ensuite été dessiné (voir la figure 1A). Le diagramme de réseau « médicament-ingrédient-cible » a été construit à l’aide du logiciel Cytoscape 3.8.0 (voir Figure 1B), et une analyse topologique a été effectuée. Chaque nœud a été classé de haut en bas en fonction de la valeur du degré. Les cinq principaux composants du médicament étaient la quercétine, l’acide palmitoléique, la lutéoline, le kaempférol et la naringénine, et les cinq principales cibles étaient PTGS2, PTGS1, NCoA2, AR et ESR1.
Ensuite, un réseau PPI pour les cibles d’intersection JWSJS et DN a été développé (196 nœuds et 1714 arêtes avec une valeur moyenne de degré de 17,4). De plus, sept cibles clés qui pourraient être les cibles clés du JWSJS pour le traitement de la DN ont été obtenues après trois criblages : MAPK14, TP53, MAPK3, MYC, HIF1A, ESR1 et MAPK1 (voir Figure 1C).
Ensuite, une analyse d’enrichissement en GO a été effectuée pour spéculer sur les caractéristiques biologiques de la cible du JWSJS dans le traitement de la DN. Parmi BP, CC et MF, les dix entrées enrichies les plus importantes sont tracées dans la figure 1D. Les résultats montrent que JWSJS pourrait réguler la prolifération, la différenciation et l’apoptose cellulaires en se liant à des facteurs de transcription et à des protéines kinases dans les radeaux membranaires et les microdomaines membranaires, entraînant ainsi un effet thérapeutique sur la DN. Les trente principales voies enrichies sont représentées à la figure 1E. Les résultats montrent que le traitement JWSJS de la DN pourrait agir sur 181 voies de signalisation, impliquant principalement les lipides et l’athérosclérose, la voie de signalisation PI3K-Akt, la cancérogenèse chimique, l’hépatite, le cancer de la prostate, l’apoptose, la voie de signalisation HIF-1 et la voie de signalisation TNF.
Pour explorer davantage les cibles des 30 premières voies enrichies en KEGG, nous avons utilisé le logiciel Cytoscape 3.8.0 pour construire une carte de réseau de relation de relation de voie de signalisation KEGG pour la DN traitée par JWSJS. MAPK1, MAPK3, EGFR et AKT1 se sont avérés être des cibles de plusieurs voies agissant ensemble (voir Figure 1F), suggérant que ces protéines pourraient jouer un rôle central dans la médiation des effets de JWSJS sur la DN.
Pour valider davantage les cibles potentielles de JWSJS dans le traitement de la DN, nous avons ensuite examiné trois cibles clés, MAPK1, MAPK3 et EGFR, avec des valeurs de haut degré dans le réseau PPI et le réseau de voies de signalisation KEGG. Ceux-ci ont été amarrés moléculairement avec de la quercétine, de l’acide palmitoléique et de la lutéoline, les trois principaux composants des noyaux de JWSJS pour le traitement de la DN. Les conditions de dépistage de l’ID PDB sont les suivantes : (1) Être dérivé de l’homme ; (2) Résolution conformationnelle ≤ 2,5Å, c’est-à-dire aussi petite que possible ; (3) La séquence conformationnelle doit être aussi complète que possible, c’est-à-dire que le complexe structurel doit avoir des informations sur les ligands des petites molécules ; et (4) la valeur du pH cristallin doit être aussi proche que possible de la plage physiologique normale du corps humain35. Enfin, les ID PDB de MAPK1, MAPK3 et EGFR étaient 4QTA, 4QTB et 7JXQ.
Pour vérifier la fiabilité du logiciel AutoDock au système d’amarrage dans cette étude36, nous avons d’abord réamarré les trois protéines de MAPK1, Mapk3 et EGFR. La conformation des ligands dans la structure cristalline d’origine des trois protéines cibles a été superposée aux ligands après l’amarrage (Figure 2A). Les valeurs de l’écart quadratique moyen (RMSD) entre la conformation du ligand après l’amarrage et la structure cristalline d’origine ont ensuite été calculées. Les valeurs RMSD étaient respectivement de 1,129, 1,201 et 1,877 Å, toutes ≤ 2Å. Cela a montré que la méthode d’amarrage était fiable et pouvait être utilisée pour la prochaine vérification d’amarrage moléculaire. Pour comparer et déclarer le potentiel inhibiteur des composants de base, les ligands originaux de MAPK1, MAPK3 et EGFR ont ensuite été utilisés comme témoins. L’analyse d’amarrage a permis de prédire avec succès l’énergie de liaison entre la lutéoline, l’acide palmitoléique et la quercétine et les trois cibles principales. Ceux-ci étaient tous négatifs et inférieurs à -637 ; voir tableau 2. Il convient de noter que l’amarrage moléculaire entre la lutéoline et MAPK1 a la taille de cavité la plus élevée et l’énergie de liaison la plus faible. Dans l’ensemble, les résultats d’amarrage moléculaire ont montré que la lutéoline, l’acide palmitoléique et la quercétine avaient une bonne activité de liaison avec trois cibles principales (Figure 2B,C).
Le RMSD est utilisé pour quantifier les changements de déplacement moyens d’un groupe sélectionné d’atomes par rapport à un référentiel. Pendant ce temps, le RMSF caractérise efficacement les altérations localisées le long de la chaîne protéique. Le graphique RMSD (Figure 2D) montre que les valeurs RMSD des composés lutéoline-MAPK1 et quercétine-MAPK3 se sont stabilisées en 5 ns. Le complexe lutéoline-EGFR a montré une RMSD fluctuante allant de 0 à 35 ns ; cette valeur s’est stabilisée à 35 ns jusqu’à la fin de la simulation MD de 100 ns. Tous les complexes ont interagi de manière stable à la fin de la simulation MD de 100 ns. La valeur RMSF a été évaluée à partir de la trajectoire de simulation MD : les atomes du site actif et de la chaîne principale qui fluctuaient de manière minimale impliquaient un changement conformationnel minimal, suggérant que le composé principal mentionné est solidement ancré dans la cavité de la poche de liaison de la protéine cible. Les résultats de RMSF ont montré des fluctuations limitées dans les structures complexes.
Enfin, nous vérifions les résultats ci-dessus in vivo. Nous avons d’abord observé que le poids des rats dans le groupe modèle diminuait de manière significative, et que le GSP, LDL-C, UTP et FBG augmentaient significativement (P &lt; 0,05). Le poids corporel des rats a augmenté de manière significative dans le groupe irbésartan et dans chaque groupe JWSJS par rapport au groupe modèle. La GSP, la LDL-C, l’UTP et la FBG ont diminué à des degrés divers (P &lt; 0,05 ; voir tableau 3).
Ensuite, la coloration HE a montré que les glomérules du groupe normal avaient une taille normale. Ils étaient de structure régulière et claire et avaient une membrane basale lisse, des tubules rénaux bien disposés et aucune infiltration de cellules inflammatoires. Dans le groupe modèle, les glomérules étaient hypertrophiques, la membrane basale était épaissie et la matrice mésangiale était augmentée. L’interstitium était infiltré de cellules inflammatoires. Les manifestations pathologiques de chaque groupe d’administration ont été atténuées à des degrés divers par rapport au groupe modèle (voir figure 3A).
La coloration PAS a montré que le groupe modèle avait des volumes glomérulaires accrus, une membrane basale épaissie et une matrice mésangiale accrue par rapport au groupe normal. Ces manifestations pathologiques ont été significativement atténuées par chaque groupe d’administration (voir Figure 3B). En utilisant la microscopie électronique à transmission, nous avons constaté que la membrane basale glomérulaire du groupe modèle était épaissie par rapport au groupe normal. La matrice mésangiale s’est développée et les processus du pied des podocytes ont été largement fusionnés. Les manifestations microscopiques des rats dans chaque groupe d’administration ont été atténuées à des degrés divers par rapport au groupe modèle (voir la figure 3C).
Enfin, les expressions de l’EGFR total, du p-EGFR, de MAPK3/1 et du p-MAPK3/1 ont été détectées pour voir si elles changeaient chez les rats DN traités par JWSJS. Il n’y a pas eu de changement significatif dans l’expression totale de l’EGFR et de MAPK3/1 dans les groupes modèles par rapport au groupe normal. L’expression de p-EGFR, p-MAPK3/1 et BAX a augmenté de manière significative, et l’expression de BCL-2 a diminué de manière significative. Par rapport au groupe modèle, l’expression de p-EGFR, de p-MAPK3/1 et de BAX a été significativement réduite, et l’expression de BCL-2 a été significativement régulée à la hausse à des degrés divers dans les tissus rénaux de rat dans chaque groupe de dosage (Figure 3D, E). Ce résultat a été confirmé par immunohistochimie (Figure 3F,G). Cette étude a montré que le JWSJS pouvait protéger les reins chez les rats DN en régulant l’expression des protéines p-EGFR, p-MAPK3/1, BAX et BCL-2 et en réduisant l’apoptose cellulaire. De plus, la qPCR a été utilisée pour évaluer les niveaux d’expression de MAPK3, MAPK1 et de l’ARNm EGFR dans divers groupes. Les résultats ont révélé que l’expression relative dans le groupe DN était significativement plus élevée par rapport au groupe témoin, ainsi qu’aux groupes Irbésartan, JWSJS-L, JWSJS-M et JWSJS-H. Cette constatation corrobore encore les premiers résultats (figure 3H).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig01.jpg"> Figure 1 : La pharmacologie du réseau a clarifié les cibles potentielles du JWSJS et les voies de signalisation dans la néphropathie diabétique. (A) Diagramme de Venn des cibles croisées du JWSJS et de la néphropathie diabétique. Le vert représente le nombre de cibles thérapeutiques des composants du JWSJS, et le violet représente le nombre de cibles pertinentes du DN. La partie sécante représente le nombre de cibles sécantes (c’est-à-dire le nombre de cibles de JWSJS pour DN). (B) Schéma de réseau « médicament-ingrédient-cible » du JWSJS dans le traitement de la DN. Le bleu clair représente les cibles pertinentes du JWSJS pour le traitement par DN. Le fuchsia représente l’ingrédient actif de Bombyx Batryticatus. Le vert représente les principes actifs d’Hedysarum Multijugum Maxim. Le bleu foncé représente les principes actifs de Radix Rhei et Rhizome. Le rouge représente les principes actifs de Cicadae Periostracum. Le violet représente les ingrédients actifs d’Epimrdii Herba. Le jaune représente les principes actifs de Smilacis Glabrae Rhixoma. Le bleu ciel représente les principes actifs du rhizomae Curcumaelongae. (C) Réseau PPI de cibles d’intersection JWSJS et DN. (D) Les 10 gènes les plus significatifs identifiés par l’analyse ontologique des gènes cibles du traitement impliqués dans le traitement de la DN par le JWSJS. (E) Les 30 gènes les plus significatifs identifiés par l’analyse de la voie des gènes cibles du traitement impliqués dans le traitement de la DN par le JWSJS. (F) Le réseau de relations de la voie de signalisation KEGG dans le traitement de la DN par le JWSJS. Les icônes jaunes représentent les voies de signalisation. Les icônes bleues représentent les objectifs d’action. Un graphique plus grand implique que plus de voies y sont connectées. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig02.jpg"> Figure 2 : Visualisation des trajectoires d’amarrage moléculaire et de dynamique moléculaire du JWSJS dans le traitement de la néphropathie diabétique. (A) Les conformations du ligand dans la structure cristalline d’origine des trois complexes protéiques cibles 7JXQ (a), 4QTA (b) et 4QTB (c) sont comparées aux conformations du ligand après l’amarrage. Le vert, l’orange et le rose sont respectivement les protéines cibles EGFR, MAPK1 et MAPK3. L’or est la molécule de ligand d’origine, et le bleu est la molécule de ligand après l’amarrage. (B) Visualisation d’amarrage moléculaire 3D du JWSJS dans le traitement de la néphropathie diabétique. Le vert, l’orange et le rose sont les protéines cibles 7JXQ, 4QTA et 4QTB, respectivement. 1a-3a représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA et 4QTB avec l’inhibiteur d’origine (en bleu). 1b-3b représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA, 4QTB et lutéoline (jaune). 1c-3c représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA, 4QTB et de l’acide palmitoléique (fuchsia). 1d-3d représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA, 4QTB et quercétine (violet). (C) Visualisation d’amarrage moléculaire 2D du JWSJS dans le traitement de la néphropathie diabétique. 1a-3a représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA et 4QTB avec l’inhibiteur d’origine. 1b-3b représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA, 4QTB et lutéoline. 1c-3c représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA, 4QTB et de l’acide palmitoléique. 1d-3d représente le diagramme d’interaction de 7JXQ, 4QTA, 4QTB et quercétine. (D) Analyse RMSD et RMSF des trajectoires de dynamique moléculaire de (a) la lutéoline et la protéine cible 7JXQ, (b) la lutéoline et la protéine cible 4QTA, et (c) la quercétine et les complexes de protéine cible 4QTB. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig03.jpg"> Figure 3 : Le JWSJS atténue les lésions rénales et supprime l’activation de la voie de signalisation EGFR/MAPK3/1 dans des expériences in vivo. (A) coloration HE et (B) coloration périodique à l’acide Schiff (PAS) des tissus rénaux de rat dans différents groupes (amplification, 200x ; n = 10). (C) Microscopie électronique à transmission du tissu rénal chez différents groupes de rats (grossissement, 5000x ; n = 3). (D) EGFR, p-EGFR, MAPK3/1, p-MAPK3/1, BAX et BCL-2 dans le tissu rénal du rat d’un diabétique par western blot (n = 3). (E) Analyse statistique de l’expression de p-EGFR, p-MAPK3/1, BAX et BCL-2. (F) Analyse immunohistochimique de l’expression de p-EGFR ET de p-MAPK3/1 dans les six groupes (n = 6). (G) Analyse statistique de l’expression de p-EGFR ET de p-MAPK3/1. (H) analyse qPCR de l’expression de l’ARNm MAPK3, MAPK1 et EGFR dans six groupes. *P &lt; 0,05 par rapport au contrôle. **P &lt; 0,01 par rapport au contrôle. ▲P &lt; 0,05 par rapport à DN. ▲▲P &lt; 0,01 par rapport <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig03large.jpg" target="_blank">à DN. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
Tableau 1 : Informations sur certaines matières actives du JWSJS. Il donne des détails sur chaque composant et leurs caractéristiques ou propriétés. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%201.zip" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.</a>
Tableau 2 : Tableau des résultats d’amarrage des cibles principales et des principaux ingrédients actifs du JWSJS. Le tableau présente les résultats des études d’amarrage des cibles principales et des principaux composants actifs du JWSJS. Ce tableau montre comment ces constituants interagissent avec leurs cibles respectives, ce qui peut donner un aperçu du mécanisme d’action du JWSJS. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%202.zip" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.</a>
Tableau 3 : Effet du JWSJS sur le poids corporel et les indices biochimiques chez les rats atteints de néphropathie diabétique (exprimé en moyenne ±écart-type, n = 10). Par rapport au groupe normal : * P &lt; 0,05. Par rapport au groupe de modèles : # P &lt; 0,05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%203.zip" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.</a>

Effet antagoniste de Jiawei Shengjiang San sur un modèle de rat de néphropathie diabétique : lié à la voie de signalisation EGFR/MAPK3/1

We aimed to delve into the mechanisms underpinning Jiawei Shengjiang San's (JWSJS) action in treating diabetic nephropathy and deploying network ...

antagonistic-effect-jiawei-shengjiang-san-on-rat-model-diabetic

Research

Recherche

JoVE Journal

Medicine

Médecine

Le présent protocole décrit l’établissement d’un modèle animal de néphropathie membraneuse (MN) et comment l’inhibition de Kemeng Fang réduit l’apoptose des podocytes du rat MN en activant la voie de signalisation PI3K/AKT.

Mécanisme de l’inhibition de Kemeng Fang de l’apoptose des podocytes chez les rats atteints de néphropathie membraneuse par la voie de signalisation PI3K/AKT

Rupture de la barrière hémato-encéphalique facilite la prestation de certains médicaments vers le cerveau. Mannitol livré intra-artérielle se rétrécit cellules entourant les vaisseaux sanguins afin de perturber physiquement la barrière.

Modèle Rat de rupture de la barrière hémato-encéphalique pour permettre ciblée Therapeutics neurovasculaire

Osteoarthritis (OA), ou d'une maladie dégénérative des articulations, est une condition débilitante associée à la douleur qui reste partiellement contrôlée par des analgésiques disponibles. Les modèles animaux sont développés pour améliorer notre compréhension des mécanismes de la douleur liée OA. Nous décrivons ici la méthodologie pour le modèle monoïodacétate de la douleur arthrose chez la souris.

Le modèle monoïodacétate de douleur arthrosique chez la souris

Le modèle de lésion carotidienne par ballonnet de rat décrit ci-dessous permet aux chercheurs d’évaluer des médicaments ou des traitements qui annulent l’hyperplasie artérielle induite par une lésion. La préparation préopératoire détaillée, l’intervention chirurgicale et les soins postopératoires de l’animal sont décrits.

A Rat carotidienne Balloon Modèle de lésion pour tester Therapeutics Rénovation Anti-vasculaires

Cellules souches dérivées d’adipeux (ASCs) sont facilement isolées et récoltées dans la graisse des rats normaux. Feuilles de NCP peuvent être créés à l’aide de la cellule-fiche technique et peuvent être transplantés dans Zucker rats gras diabétiques présentant pleine épaisseur défauts avec OS exposé de l’épiderme et ensuite recouvert d’une double couche de peau artificielle.

Création et la Transplantation d’une feuille adipeux dérivées de cellules souches (ASC) dans un modèle de cicatrisation diabétique

Ici, nous décrivons une procédure optimisée et axée sur les Langendorff pour l’isolement des cardiomyocytes auriculaires cellule unique d’un modèle de rat de métabolique associés au syndrome d’une insuffisance cardiaque avec fraction d’éjection préservée. Une régulation manuelle de la pression intraluminale des cavités cardiaques est mis en œuvre pour produire des myocytes fonctionnellement intactes adaptés aux études couplage excitation-contraction.

Isolement des Cardiomyocytes auriculaires d’un modèle de Rat de métaboliques liées Syndrome une insuffisance cardiaque avec Fraction d’éjection préservée

La technique de myographe fil est utilisée pour étudier les fonctions des muscles lisses vasculaires et les nouveaux médicaments écran. Nous rapportons un protocole détaillé permettant de mesurer la contractilité isométrique de l’artère mésentérique de souris et de dépistage des nouveaux décontractants de muscle lisse vasculaire.

Mesure de la contractilité isométrique de l’artère mésentérique de souris à l’aide de fil myographie

Nous décrivons une intervention chirurgicale utilisée pour induire une ischémie périphérique chez les lapins atteints d’hyperlipidémie et de diabète. Cette chirurgie agit comme un modèle préclinique pour les conditions rencontrées dans la maladie des artères périphériques chez les patients. L’angiographie est également décrite comme un moyen de mesurer l’étendue de l’ischémie introduite et la récupération de la perfusion.

Modèle préclinique d’ischémie des membres postérieurs chez les lapins diabétiques

Le but de ce protocole est d’évaluer si différentes formulations artificielles de larme peuvent protéger les cellules épithéliales cornéennes humaines contre la dessiccation utilisant un modèle in vitro. Après exposition aux formulations artificielles de larmes et à la dessiccation, les cellules épithéliales cornéennes humaines sont évaluées pour l’activité métabolique.

Effet des formulations de larmes artificielles sur l’activité métabolique des cellules épithéliales cornéennes humaines après exposition à la dessiccation

L’objectif de ce protocole est de développer un système modèle pour l’effet de l’hyperoxie sur les communautés microbiennes des voies respiratoires de la fibrose kystique.  Le milieu d’expectorations artificielles émule la composition des expectorations, et les conditions de culture hyperoxique modélisent les effets de l’oxygène supplémentaire sur les communautés microbiennes pulmonaires.

Conception et développement d’un modèle pour étudier l’effet de l’oxygène supplémentaire sur le microbiome des voies respiratoires de la fibrose kystique

Découvrez la pharmacologie de réseau et le docking moléculaire pour étudier le mécanisme d'action du Jiawei Shengjiang San dans le traitement de la néphropathie diabétique chez le rat.

Effet antagoniste de Jiawei Shengjiang San sur un modèle de rat de néphropathie diabétique : lié à la voie de signalisation EGFR/MAPK3/1 (Vidéo) | JoVE Journal

Effet antagoniste de Jiawei Shengjiang San sur un modèle de rat de néphropathie diabétique : lié à la voie de signalisation EGFR/MAPK3/1

Explorer plus de vidéos