Name: Mise en place d’un modèle murin expérimental de l’endométriome pour étudier l’infertilité associée (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-05T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 7 s
Description: Découvrez la mise en place d'un modèle murin expérimental de l'endométriome utilisant des souris C57BL/6J pour étudier les mécanismes de l'infertilité associée. Cette méthode offre un outil précieux pour la recherche en médecine reproductive.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Développement d’un nouveau modèle de souris simulant l’endométriome

<table><tbody><tr><td>Seringue de 1 cc avec aiguille de 25 G</td><td>BD Biosciences</td><td>301320</td><td></td></tr><tr><td>Boîte de culture tissulaire de 10 mm</td><td>FAUCON</td><td>353001</td><td></td></tr><tr><td>10 % de formol tamponné</td><td>Fisher Scientific</td><td>SF100-4</td><td></td></tr><tr><td>10x tampon salin tamponné au phosphate (PBS)</td><td>Fisher Scientific</td><td>AM9625</td><td></td></tr><tr><td>Aiguille de 30 g</td><td>BD Biosciences</td><td>305107</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Suture non résorbable en soie tressée noire</td><td>Ethicon Inc.</td><td>W500H</td><td></td></tr><tr><td>70 % d’éthanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lames de microscope adhésives</td><td>Marienfeld</td><td>810401</td><td></td></tr><tr><td>Buprénorphine injectable&nbsp ;</td><td>Med-Vet International</td><td>RXBUPRENOR5</td><td></td></tr><tr><td>Coton-tige à double tête</td><td>SANYO Co., LTD.</td><td>HUBY-340</td><td></td></tr><tr><td>Pinces fines</td><td>Outils scientifiques fins</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Kétamine</td><td>Alfasan International b.v</td><td>2203095-08</td><td></td></tr><tr><td>Microtubes</td><td>Corning&nbsp ;</td><td>MCT-150-C</td><td></td></tr><tr><td>Porte-aiguille</td><td>Société Excelta</td><td>Référence 2827-NH-35-SE-ND</td><td></td></tr><tr><td>Pommade ophtalmique</td><td>Principaux produits pharmaceutiques</td><td>10033691</td><td></td></tr><tr><td>Kit de coloration périodique à l’acide Schiff (PAS)&nbsp ;</td><td>Abcam</td><td>AB150680</td><td></td></tr><tr><td>Gants stériles non poudrés</td><td>Fisher Scientific</td><td>19020558</td><td></td></tr><tr><td>Traitement/encastrement de cassettes</td><td>Fisher Scientific</td><td>Référence 15-197-700A</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel taille 3</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-079-657</td><td></td></tr><tr><td>Petite pince dentelée semi-courbée</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5135</td><td></td></tr><tr><td>Petits ciseaux chirurgicaux</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5850</td><td></td></tr><tr><td>Microscope optique standard</td><td></td><td></td><td>Pour l’évaluation des frottis de cytologie vaginale et l’analyse histologique.</td></tr><tr><td>Lames de scalpel en acier #10</td><td>B.Braun</td><td>Réf. BB510</td><td></td></tr><tr><td>Gaze stérile</td><td>MEDICOM</td><td>Le HMWS 077</td><td></td></tr><tr><td>Boîtes de Pétri en verre pyrex stérilisé</td><td>Corning</td><td>70160-101</td><td></td></tr><tr><td>Coussin électrique thermorégulé&nbsp ;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>VICRYL RAPIDE (polyglactin 910) Suture résorbable</td><td>Ethicon Inc.</td><td>N° W9918</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine&nbsp ;</td><td>Alfasan International b.v</td><td>2110333-10</td><td></td></tr></tbody></table>

mise en place d’un modèle murin expérimental de l’endométriome pour étudier l’infertilité associée

Establishment of an Experimental Mouse Model of Endometrioma to Study its Related Infertility

La mise en place réussie d’OMA Sur les 12 souris soumises au protocole de transplantation, 10 présentaient des lésions caractéristiques de l’OMA, tant au niveau anatomique macroscopique qu’histologique, ce qui se traduit par un taux de réussite de 83 %. L’examen macroscopique a révélé des lésions remplies de liquide adhérentes aux ovaires, rappelant les présentations cliniques de l’OMA (Figure 2). L’examen histopathologique, comme illustré à la figure 3, a confirmé la réussite de l’implantation du tissu endométrial ectopique. De plus, l’infiltration de lésions endométriosiques a induit une atrésie massive des follicules à côté des implants, indiquant son interférence avec le milieu ovarien.
Spécificité du modèle La validité du modèle était essentielle à sa spécificité pour l’endométriose ovarienne. Après un examen approfondi, aucun implant endométriosique externe n’a été identifié dans un autre organe pelvien ou abdominal, ce qui souligne la précision du modèle et son potentiel en tant qu’outil robuste pour étudier l’endométriome et l’infertilité qui y est associée.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66240/66240fig01.jpg"> 
Figure 1 : Génération d’un modèle d’endométriome. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66240/66240fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66240/66240fig02.jpg"> 
Figure 2 : Anatomie macroscopique de l’endométriome. Par rapport au groupe témoin fictif, la croissance kystique ectopique de l’endomètre était visible en association avec la morphologie ovarienne 4 semaines après la transplantation dans le groupe OMA en morphologie. Contour pointillé bleu : lésion endométriosique. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66240/66240fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66240/66240fig03.jpg"> 
Figure 3 : Coupe histologique colorée d’une lésion de l’endomètre à partir du modèle murin. Par rapport au groupe témoin fictif, la croissance kystique ectopique de l’endomètre était visible en association avec l’ovaire 4 semaines après la transplantation dans le groupe OMA en histologie. Les flèches noires indiquent les follicules atrétiques. Barres d’échelle = 0,5 mm. Abréviation : OMA = endométriome. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66240/66240fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

Mise en place d’un modèle murin expérimental de l’endométriome pour étudier l’infertilité associée

Endometrioma (OMA), a subtype of endometriosis characterized by the formation of endometriotic cysts in the ovaries, affects 17-44% of individuals ...

La portée de notre recherche est axée sur la compréhension des mécanismes sous-jacents à l’infertilité associée à l’endométriome. Nous visons à combler le manque de connaissances en développant un modèle murin qui simule l’endométriome et en étudiant son impact sur la fertilité. Dans le domaine de la recherche sur l’endométriose, les développements récents comprennent des progrès dans la compréhension des mécanismes moléculaires sous-jacents à l’endométriose, l’identification de nouveaux marqueurs pour le diagnostic et le traitement, et le développement de modèles innovants pour étudier des sous-types spécifiques comme l’endométriome. Ces développements contribuent à améliorer les connaissances et les stratégies thérapeutiques potentielles pour l’endométriose. Les défis expérimentaux actuels dans la recherche sur l’endométriome comprennent l’absence d’un modèle animal fiable, une compréhension limitée de la pathogenèse et de l’impact sur la fertilité, et la nécessité d’études de récidive et de tests de diagnostic. Le modèle murin de l’endométriome et l’intégration des résultats permettent de relever ces défis et de faire progresser le domaine.Notre protocole offre des avantages distincts par rapport aux autres techniques. Il se concentre spécifiquement sur l’imitation de l’endométriome alors qu’aucun autre sous-type n’a été établi par cette méthode. Avec un taux de réussite élevé, il permet des modifications génétiques et reproduit des caractéristiques reproductives similaires à celles de l’homme, ce qui en fait un outil précieux pour étudier l’infertilité liée à l’endométriome. Nos résultats ont ouvert la voie à une nouvelle ère de la recherche sur l’endométriose. En comblant une lacune de longue date, notre modèle promet des perspectives transformatrices, révolutionnant notre compréhension, notre traitement et potentiellement notre prévention de l’endométriome. En intégrant les résultats d’études sur la récidive et de diagnostic, notre recherche améliore le contexte plus large de la recherche sur l’endométriose et des soins aux patientes.[Narrateur] Après avoir recueilli la litière contenant des phéromones mâles, introduisez-les dans la cage de la souris femelle pendant 48 heures. Versez 10 millilitres de PBS dans une boîte de Pétri et plongez-y une extrémité d’un coton-tige pour absorber le liquide. Sortez délicatement une souris de sa cage et placez-la sur le couvercle. Insérez délicatement le coton-tige humidifié dans le vagin et tournez doucement l’écouvillon à 45 degrés par rapport à l’axe long du corps de l’animal. Après avoir collecté les cellules des parois lumineuses vaginales, retirez soigneusement l’écouvillon. Roulez doucement l’embout de l’écouvillon sur une lame de verre propre et pré-étiquetée pour transférer les cellules collectées. Examinez la lame au microscope pour détecter la présence de cellules épithéliales cornifiées indiquant le stade de l’œstrus. Pour commencer, désinfectez la région abdominale de la souris femelle au stade de l’œstrus euthanasiée par donneur avec de l’éthanol à 70 %. Utilisez des ciseaux chirurgicaux stériles pour faire une incision d’un centimètre le long de la ligne médiane du péritoine, exposant la couche musculaire. Ensuite, utilisez une autre paire de ciseaux pour couper la couche musculaire et révéler la cavité pelvienne. Fermez les pointes de la pince et soulevez doucement les intestins à l’aide de la partie centrale émoussée. Après avoir localisé l’utérus, disséquez stérilement toute la corne utérine, en veillant à l’ablation des deux cornes utérines. Placez les tissus excisés dans une boîte de Pétri contenant du PBS et retirez les tissus adipeux en excès. À l’aide d’un scalpel stérile, disséquez minutieusement les tissus en morceaux cubes d’un millimètre. Ajoutez périodiquement du PBS pour garder les tissus humides. Placez la souris receveuse anesthésiée en position couchée sur une planche chirurgicale stérile. Identifiez le site chirurgical en manipulant doucement les pattes arrière pour sentir une proéminence osseuse sous la peau. Désinfectez la zone chirurgicale avec un tampon à 70 % d’éthanol, puis avec de la bétadine. À l’endroit choisi, faites une incision latérale précise entre trois et cinq millimètres. Stabiliser l’ovaire à l’aide d’une pince à main non dominante et injecter 100 microlitres de PBS dans la bourse ovarienne en observant une légère séparation. Faites une petite fente dans la bourse et, à l’aide d’une micro-pince, transplantez les fragments de tissu utérin cubiques d’un millimètre. Après la chirurgie, suturez les couches musculaires avec des sutures résorbables et la peau avec des sutures non résorbables. Après quatre semaines, retirez la souris receveuse transplantée de la cage d’hébergement. Faites une incision médiane sur la souris receveuse euthanasiée et exposez la cavité abdominale pour l’inspection des organes. Inspectez soigneusement la cavité abdominale à la recherche de lésions endométriosiques externes. Ensuite, extrayez les ovaires avec des lésions visibles pour la photographie. Fixez les ovaires avec des lésions dans du formol tamponné neutre à 10 %. Après avoir sectionné et monté les sections de tissu sur une lame, placez la solution de xylène de la lame pour éliminer la paraffine. Réhydratez les sections de tissu en plaçant la lame dans une série de concentrations décroissantes d’éthanol. Traitez des coupes de tissus avec de l’acide périodique à 1 % pendant cinq à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, rincez abondamment la lame à l’eau distillée pour éliminer tout acide périodique résiduel. Maintenant, colorez des sections de tissu avec une solution de décalage pendant 15 minutes. Rincez la lame à l’eau chaude du robinet pour enlever l’excès de tache, puis à l’eau distillée. Contre-colorez les sections de tissu avec de l’hématoxyline de Mayer pendant deux à trois minutes. Rincez la lame à l’eau courante du robinet avant d’appliquer le réactif bleuissant pendant 30 secondes. Après avoir rincé la lame à l’eau distillée, déshydratez les sections en augmentant les concentrations d’éthanol. Immergez les sections dans du xylène pour les rendre transparentes. Appliquez un support de montage sur les sections et placez doucement une lamelle en évitant les bulles d’air. Après le séchage, examinez la lame au microscope optique pour détecter la présence de glandes endométriales, de stroma et de kystes hémorragiques confirmant l’endométriose dans l’ovaire. Par rapport au groupe témoin fictif, la croissance kystique ectopique de l’endomètre était visible en association avec la morphologie ovarienne quatre semaines après la transplantation dans le groupe endométrial. Un examen histopathologique plus approfondi a confirmé l’implantation réussie du tissu endométrial ectopique dans le groupe endométrial.

establishment-an-experimental-mouse-model-endometrioma-to-study-its

Research

Recherche

JoVE Journal

Medicine

Médecine

Une description de l'induction chirurgicale de l'endométriose chez les souris et les rats par auto-transplantation de tissu utérin à la cascade de l'artère mésentère intestinal.

Modèle murin d&#39;endométriose chirurgicalement induite par Auto-transplantation de tissu utérin

Nous présentons ici un protocole pour vivre-imagerie des fragments de l’endomètre humains fluorescent étiquetés greffés chez des souris. La méthode permet d’étudier les effets des médicaments de choix sur la taille de la lésion endometriotic grâce à la surveillance et la quantification de la fluorescence émise par le journaliste fluorescent en temps...

Surveillance non invasive de la taille de la lésion dans un modèle murin hétérologues d’endométriose

De nombreux modèles de rongeurs de l’endométriose sont limités par la complexité technique, la reproductibilité et/ou le besoin d’animaux immunodéprimés ou de souris rapporteures spéciales. Nous présentons un système simplifié d’induction des lésions en utilisant n’importe quelle souris expérimentale avec un système de notation objectif vérifiable indépendamment et sans exigence d’ovariectomie ou de chirurgie de survie.

Un modèle murin syngénique de l’endométriose utilisant des souris à cycle naturel

Ce protocole décrit des méthodologies pour établir des organoïdes épithéliaux de l’endomètre de souris pour l’expression génique et les analyses histologiques.

Établissement d’organoïdes endométriaux 3D à partir de l’utérus de souris

L’établissement de la grossesse est un processus dynamique impliquant une diaphonie embryonnaire et utérine complexe. Les contributions précises de l’environnement utérin maternel à ces processus restent un domaine de recherche actif. Ici, des protocoles détaillés sont fournis pour aider à concevoir des modèles animaux in vivo pour répondre à ces questions de recherche.

Méthodes d’étude des contributions utérines à l’établissement de la grossesse dans un modèle murin ovariectomisé

Ce protocole décrit des méthodologies permettant d’établir un modèle in vitro simple et efficace d’implantation embryonnaire pour évaluer les molécules pertinentes affectant le processus d’implantation embryonnaire.

Etablissement d’un modèle d’implantation embryonnaire in vitro

Cet article décrit un protocole détaillé pour produire un endomètre mince fiable et reproductible avec un taux de mortalité très faible et des adhérences intra-utérines minimales en injectant de l’éthanol à 95 % dans l’utérus de la souris en 1 à 3 minutes.

Etablissement d’un modèle murin d’endomètre mince

La perte d'intégrité péritonéale fournit un nouveau paradigme à comprendre et à traiter l'infection chronique la douleur pelvienne chez les femmes atteintes des formes bénignes de l'endométriose et peut être facilement détectés en utilisant peropératoire l'instillation de de teinture au moment de la laparoscopie.

Détection peropératoire de l&#39;endométriose subtil: un nouveau paradigme pour la détection et le traitement de la douleur pelvienne associée à la perte de l&#39;intégrité péritonéale

Dans les procédés de culture standards cellules sont retirées de leur environnement physiologique et cultivées sur la surface en plastique d'un plat. Pour étudier le comportement de cellules primaires de moelle osseuse humaine, nous avons créé un système de culture en 3-D, où les cellules sont cultivées dans des conditions récapitulant le microenvironnement du tissu natif.

A Tissue Culture Modèle tridimensionnel pour étudier primaire moelle osseuse humaine et de ses affections malignes

Nous avons développé un nouveau modèle ex vivo pour étudier l'action des hormones dans le sein humain. Il est basé sur les microstructures de tissu isolé à partir d'échantillons de tissus mammaires chirurgicales qui conservent l'architecture des tissus, des interactions intercellulaires, et la signalisation paracrine.

Une<em&gt; Ex vivo</em&gt; Modèle pour étudier action hormone dans le sein humain

Découvrez la mise en place d'un modèle murin expérimental de l'endométriome utilisant des souris C57BL/6J pour étudier les mécanismes de l'infertilité associée. Cette méthode offre un outil précieux pour la recherche en médecine reproductive.

Mise en place d’un modèle murin expérimental de l’endométriome pour étudier l’infertilité associée

Explorer plus de vidéos