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DOI: 10.3791/66275-v
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Les régions intrinsèquement désordonnées (IDR) sont des domaines protéiques flexibles qui modifient leur conformation en réponse aux changements environnementaux. Le transfert d’énergie par résonance de fluorescence d’ensemble (FRET) peut estimer les dimensions des protéines dans différentes conditions. Nous présentons une approche FRET pour évaluer la sensibilité structurelle de l’IDR dans les cellules vivantes de Saccharomyces cerevisiae sous stress hyperosmotique.
Nous visons à comprendre comment les régions intrinsèquement désordonnées détectent et réagissent aux changements dans les propriétés physico-chimiques de l’environnement. Nous combinons des techniques biophysiques, biochimiques, génétiques et de biologie cellulaire pour surveiller l’évolution de l’ensemble structurel des régions désordonnées dans les cellules vivantes. Les techniques de biophysique des protéines sont actuellement utilisées pour étudier la confirmation des RVI.
Il s’agit notamment de la résonance magnétique nucléaire, du dichroïsme circulaire, de la diffusion des rayons X aux petits angles et du FRET. La plupart de ces techniques ne peuvent être utilisées que in vitro. L’étude de la confirmation des RVI dans un contexte cellulaire est un défi avec des techniques coûteuses et chronophages.
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