Procédé modifié de cathétérisme intrathécal chez le rat

Le cathétérisme intrathécal a été largement appliqué dans les expériences sur les animaux, en particulier celles sur la douleur neuropathique. Cependant, les méthodes traditionnelles présentent encore plusieurs limites. Bien que certains chercheurs aient tenté d’améliorer les méthodes traditionnelles, les méthodes disponibles doivent encore être modifiées.

Dans le présent document, nous présentons une méthode modifiée pour le cathétérisme intrathécal chez le rat qui représente une approche simple, pratique et fiable pour l’administration intrathécale répétitive de médicaments. Préparez un tube PE10 de 15 centimètres de long. Insérez un fil d’acier inoxydable de 20 centimètres de long avec deux extrémités polies dans le tube PE10 comme support et marquez le tube à deux centimètres d’une extrémité.

Coupez la pointe pointue d’une aiguille 22G et scellez l’extrémité distale avec une paire de pinces. Coupez un cathéter épidural en fragments d’un centimètre. Insérez ensuite ces fragments dans l’aiguille 22G sans pointe tranchante et scellez l’extrémité distale à l’aide d’une paire de pinces droites chauffées.

Cet appareil s’appelait le capuchon d’étanchéité du tube. Préparez une bande antiallergique de 0,3 centimètre multipliée par 0,5 centimètre avec une paire de ciseaux. Préparez les instruments pour le cathétérisme intrathécal, qui a été stérilisé avant la chirurgie.

Inclus des pinces dentées, des ciseaux, un appareil de gavage, un manche de scalpel et des lames numéro 10. Stérilisez le tube PE10 et le fil-guide avec de l’éthanol pendant environ deux heures. Anesthésier les rats avec 3 % d’isoflurane à un débit de trois litres par minute.

Placez un rat sur la table d’opération et la patte arrière a été coupée avec une paire de pinces. L’absence de mouvement du pôle postérieur en réponse à la stimulation a confirmé le succès de l’anesthésie. Une analgésie adéquate a été administrée par injection intramusculaire pour un milligramme par kilogramme de méloxicam avant le cathétérisme intrathécal.

Enlève les poils sur la région de la colonne lombaire du dos et sur la zone entre deux oreilles avec un rasoir. Placez un tube de centrifugation sous l’abdomen du rat à la jonction taille-hanche. Stérilisez les sites chirurgicaux avec une solution de povidodoiode et une solution d’éthanol trois fois.

Couvrez le rat d’un pansement aseptique et exposez les sites chirurgicaux. Ensuite, lavez-vous avec une solution saline normale avant la chirurgie. Déterminez l’emplacement de l’espace intervertébral entre L5 et L6, en localisant l’apophyse vertébrale de L6 au milieu entre les crêtes iliaques bilatérales gauche et droite.

Fixez la peau avec le pouce gauche et l’index de l’opérateur, puis faites une incision médiane de trois à quatre centimètres de long, juste au-dessus de l’apophyse épineuse entre L4 et S1. Séparez brutalement les tissus sous-cutanés à l’aide d’une paire de ciseaux. Localisez à nouveau l’espace intervertébral entre L5 et L6. Serrez et soulevez l’apophyse dorsale L5 à l’aide d’une paire de pinces dentées pour élargir l’espace intervertébral.

Ensuite, il sépare brutalement les muscles autour du corps vertébral avec une paire de ciseaux dans le haut de la L6, l’apophyse dorsale a été complètement exposée. Lorsque l’apophyse dorsale L5 est soulevée à l’aide d’une pince dentée et que l’espace intervertébral est élargi par une autre paire de pinces, nettoyez l’espace intervertébral L5 à six avec une boule de coton jusqu’à ce que la zone en V inversé soit complètement exposée. Percez la colonne vertébrale avec une aiguille 23G dans la zone du V inversé, juste sous le haut de l’apophyse dorsale L6.

Insérez avec précaution le tube PE10 contenant du fil d’acier inoxydable dans un canal rachidien au site de ponction, en l’inclinant de 30 degrés vers la queue. L’angle d’insertion a été ajusté jusqu’à ce que le tube PE10 puisse être inséré avec succès sans aucune résistance. Lorsque la zone marquée du tube PE10 atteint le muscle postérieur, le cathétérisme est arrêté.

Retire lentement le fil en acier inoxydable du tube PE10, puis connecte le tube PE10 à une seringue, à travers laquelle 20 microlitres de solution saline normale sont injectés. Après le retrait de la seringue, il se peut que la solution saline se soit écoulée de façon continue du tube PE10, ce qui indique que le tube PE10 est inséré avec succès dans l’espace sous-arachnoïdien. Une fois que le PE10 deux a été confirmé comme étant dégagé, suturez les muscles d’un côté du corps vertébral avec une suture quatre zéro et faites un nœud.

Attachez ensuite la suture autour du tube PE10 et faites un autre nœud. Ne coupez pas la suture et ne suturez pas les muscles de l’autre côté. Attachez à nouveau la suture autour du tube PE10.

Faites un troisième nœud et coupez la suture. Faites une incision de 0,5 centimètre de long à un centimètre juste en dessous du point médian entre les oreilles. Séparez brutalement les tissus sous-cutanés à l’aide d’une paire de ciseaux.

Et insérez un tube de gavage en métal à travers l’incision vers la queue. Jusqu’à ce que la pointe soit visible dans l’incision lombaire. Insérez l’extrémité distale du tube PE10 dans le tube de gavage jusqu’à ce que le tube PE10 sorte de l’autre extrémité du tube de gavage.

Puis retire doucement le gavage. Lorsqu’il est confirmé que le tube PE10 n’est pas obstrué, suturez les muscles restants autour de l’incision lombaire avec quatre points de suture zéro. Attache la suture autour du tube PE10 et fait un autre nœud.

Fixez à nouveau le tube PE10. Suturez la peau, en évitant d’endommager le tube PE10, puis suturez la peau du cou avec quatre points de suture zéro. Attachez la suture autour du tube PE10 et faites un nœud pour fixer le tube PE10.

Une fois que le tube PE10 est à nouveau dégagé, scellez l’extrémité extracorporelle du tube PE10 avec un capuchon d’étanchéité. Le tube PE10 a été séché avec un morceau de tissu et une bande antiallergique a été attachée autour du tube PE10 à plusieurs reprises pour empêcher la rétraction du tube PE10 pendant le mouvement du rat. Après l’opération, le rat est rentré dans sa cage et l’a surveillé de près pendant la récupération de l’anesthésie jusqu’à ce qu’il reprenne conscience.

Une fois que le rat est complètement réveillé, retirez le capuchon d’étanchéité et injectez 20 microlitres de lidocaïne à 2 % dans le tube PE10 à raison de 0,2 microlitre par seconde à l’aide d’une seringue Hamilton, suivie de l’injection de 10 microlitres de solution saline normale. Scellez le tube PE10 avec un capuchon d’étanchéité. Placez un rat sur la table et observez attentivement.

La paralysie des membres inférieurs après injection intrathécale de lidocaïne indique un cathétérisme réussi. La paralysie des membres postérieurs dure généralement environ 30 minutes. Surveillez de près le rat pendant la période de récupération jusqu’à ce que la fonction des membres soit complètement rétablie.

Une paraplégie complète des deux membres inférieurs des rats après injonction intrathécale de lidocaïne indiquait un cathétérisme réussi. Comparaison du taux de réussite du cathétérisme entre nos méthodes modifiées et la méthode précédemment rapportée. Le taux de réussite du cathétérisme intrathécal pour notre méthode modifiée était de 95 %, ce qui était supérieur au taux de 88 % atteint avec la méthode rapportée par Hou et al.

Comparaison du taux de cathéter à longue demeure entre notre méthode modifiée et la méthode précédemment rapportée. Dans une étude menée par Storkson et al. Le taux de cathéter à longue demeure deux, cinq et sept jours après le cathétérisme intrathécal était respectivement de 95 %, 90 % et 85 % pour notre méthode.

En conclusion, la méthode modifiée de cathétérisme intrathécal peut servir d’outil utile pour l’administration intrathécale répétitive et l’administration de médicaments et représente un moyen simple, pratique et fiable de raccourcir la durée des expériences.