Name: Mise en place d’un modèle murin de xénogreffe dérivé d’un patient avec des tissus d’ostéosarcome humain (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-22T14:10:00.000+00:00
Duration: 2 min 35 s
Description: Découvrez comment établir un modèle de xénogreffe dérivé de patient pour l'ostéosarcome humain chez la souris immunodéficiente. Cette méthode permet d'étudier la croissance tumorale, la résistance aux médicaments et la métastase.

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<meta charset="utf8"></head><body>Protocole pour les modèles murins PDX d’ostéosarcome : étude de la croissance et de la résistance aux médicaments

<ol><li>Saraf, A. J., Fenger, J. M., Roberts, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma%3A+accelerating+progress+makes+for+a+hopeful+future%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma: accelerating progress makes for a hopeful future.</a> Front Oncol. 8, 4(2018).</li>
<li>Ligon, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathways+of+immune+exclusion+in+metastatic+osteosarcoma+are+associated+with+inferior+patient+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunother+Cancer%22%5BJournal%5D)">Pathways of immune exclusion in metastatic osteosarcoma are associated with inferior patient outcomes.</a> J Immunother Cancer. 9 (5), e001772(2021).</li>
<li>Miwa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+and+emerging+targets+in+immunotherapy+for+osteosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oncol%22%5BJournal%5D)">Current and emerging targets in immunotherapy for osteosarcoma.</a> J Oncol. 2019, 7035045(2019).</li>
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<li>Ritter, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Osteosarcoma.</a> Ann Oncol. 21, 320-325 (2010).</li>
<li>Lowery, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Broad+spectrum+activity+of+the+checkpoint+kinase+1+inhibitor+prexasertib+as+a+single+agent+or+chemo+potentiator+across+a+range+of+preclinical+pediatric+tumor+models%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Broad spectrum activity of the checkpoint kinase 1 inhibitor prexasertib as a single agent or chemo potentiator across a range of preclinical pediatric tumor models.</a> Clin Cancer Res. 25 (7), 2278-2289 (2019).</li>
<li>Hingorani, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trastuzumab+deruxtecan%2C+antibody-drug+conjugate+targeting+Her2%2C+is+effective+in+pediatric+malignancies%3A+a+report+by+the+pediatric+preclinical+testing+consortium%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Trastuzumab deruxtecan, antibody-drug conjugate targeting Her2, is effective in pediatric malignancies: a report by the pediatric preclinical testing consortium.</a> Mol Cancer Ther. 21 (8), 1318-1325 (2022).</li>
<li>Brennecke, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CXCR4+antibody+treatment+suppresses+metastatic+spread+to+the+lung+of+intratibial+human+osteosarcoma+xenografts+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Metastasis%22%5BJournal%5D)">CXCR4 antibody treatment suppresses metastatic spread to the lung of intratibial human osteosarcoma xenografts in mice.</a> Clin Exp Metastasis. 31 (3), 339-349 (2014).</li>
<li>Pan, B., Wei, X., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models+in+hepatopancreatobiliary+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models in hepatopancreatobiliary cancer.</a> Cancer Cell Int. 22 (1), 41(2022).</li>
<li>Tentler, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+tumor+xenografts+as+models+for+oncology+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Patient-derived tumor xenografts as models for oncology drug development.</a> Nat Rev Clin Oncol. 9 (6), 338-350 (2012).</li>
<li>Yoshida, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+patient-derived+tumor+xenograft+models+and+tumor+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Applications of patient-derived tumor xenograft models and tumor organoids.</a> J Hematol Oncol. 13 (1), 4(2020).</li>
<li>Stitzlein, R. N., Wojcik, J., Sebro, R. A., Balamuth, N. J., Weber, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Team+approach%3A+Osteosarcoma+of+the+distal+part+of+the+femur+in+adolescents%5BTitle%5D)+AND+%22JBJS+Rev%22%5BJournal%5D)">Team approach: Osteosarcoma of the distal part of the femur in adolescents.</a> JBJS Rev. 5 (12), 5(2017).</li>
<li>Kai, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formalin+fixation+on+Her-2+and+PD-l1+expression+in+gastric+cancer%3A+A+pilot+analysis+using+the+same+surgical+specimens+with+different+fixation+times%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Clin+Cases%22%5BJournal%5D)">Formalin fixation on Her-2 and PD-l1 expression in gastric cancer: A pilot analysis using the same surgical specimens with different fixation times.</a> World J Clin Cases. 7 (4), 419-430 (2019).</li>
<li>Yang, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+protocol+to+prepare+paraffin-embedded+whole+tick+histology+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Ticks+Tick+Borne+Dis%22%5BJournal%5D)">A practical protocol to prepare paraffin-embedded whole tick histology sections.</a> Ticks Tick Borne Dis. 14 (4), 102162(2023).</li>
<li>Chang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrine+inhibits+prostate+cancer+via+activation+of+the+unfolded+protein+response%2Fendoplasmic+reticulum+stress+signaling+and+reversal+of+epithelial+to+mesenchymal+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med+Rep%22%5BJournal%5D)">Matrine inhibits prostate cancer via activation of the unfolded protein response/endoplasmic reticulum stress signaling and reversal of epithelial to mesenchymal transition.</a> Mol Med Rep. 18 (1), 945-957 (2018).</li>
<li>de Alava, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ewing+sarcoma%2C+an+update+on+molecular+pathology+with+therapeutic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Pathol+Clin%22%5BJournal%5D)">Ewing sarcoma, an update on molecular pathology with therapeutic implications.</a> Surg Pathol Clin. 10 (3), 575-585 (2017).</li>
<li>Hidalgo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models%3A+An+emerging+platform+for+translational+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models: An emerging platform for translational cancer research.</a> Cancer Discov. 4 (9), 998-1013 (2014).</li>
<li>Eoh, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+clinical+features+and+outcomes+in+epithelial+ovarian+cancer+according+to+tumorigenicity+in+patient-derived+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res+Treat%22%5BJournal%5D)">Comparison of clinical features and outcomes in epithelial ovarian cancer according to tumorigenicity in patient-derived xenograft models.</a> Cancer Res Treat. 50 (3), 956-963 (2018).</li>
<li>Stewart, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+utility+of+patient-derived+xenografts+to+determine+biomarkers+of+prognosis+and+map+resistance+pathways+in+EGFR-mutant+lung+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Clinical utility of patient-derived xenografts to determine biomarkers of prognosis and map resistance pathways in EGFR-mutant lung adenocarcinoma.</a> J Clin Oncol. 33 (22), 2472-2480 (2015).</li>
<li>Kresse, S. H., Meza-Zepeda, L. A., Machado, I., Llombart-Bosch, A., Myklebost, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+xenograft+models+of+human+sarcoma+show+nonrandom+loss+of+aberrations%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Preclinical xenograft models of human sarcoma show nonrandom loss of aberrations.</a> Cancer. 118 (2), 558-570 (2012).</li>
<li>Dobrolecki, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+%28PDX%29+models+in+basic+and+translational+breast+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Metastasis+Rev%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft (PDX) models in basic and translational breast cancer research.</a> Cancer Metastasis Rev. 35 (4), 547-573 (2016).</li>
<li>Abdolahi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+%28PDX%29+models%2C+applications+and+challenges+in+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft (PDX) models, applications and challenges in cancer research.</a> J Transl Med. 20 (1), 206(2022).</li>
<li>Deng, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+whole-genome+sequencing+identifies+recurrent+genomic+alterations+in+commonly+used+breast+cancer+cell+lines+and+patient-derived+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Deep whole-genome sequencing identifies recurrent genomic alterations in commonly used breast cancer cell lines and patient-derived xenograft models.</a> Breast Cancer Res. 24 (1), 63(2022).</li>
<li>Chen, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+and+characterization+of+patient-derived+xenografts+from+patients+with+osteosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Cell%22%5BJournal%5D)">Generation and characterization of patient-derived xenografts from patients with osteosarcoma.</a> Tissue Cell. 79, 101911(2022).</li>
<li>Fortuna-Costa, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+association+between+successful+engraftment+of+osteosarcoma+patient-derived+xenografts+and+clinicopathological+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Histol+Histopathol%22%5BJournal%5D)">An association between successful engraftment of osteosarcoma patient-derived xenografts and clinicopathological findings.</a> Histol Histopathol. 35 (11), 1295-1307 (2020).</li>
<li>Beck, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Canine+and+murine+models+of+osteosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Pathol%22%5BJournal%5D)">Canine and murine models of osteosarcoma.</a> Vet Pathol. 59 (3), 399-414 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Solution neutre à 10 % de formol</td><td>Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd</td><td>G1101-500ml</td><td>Fixer les tissus</td></tr><tr><td>Autoclave</td><td>Japon Hiryama Company</td><td>HVE-50</td><td>Instruments chirurgicaux de stérilisation</td></tr><tr><td>CAnN.Cg-Foxn1nu/Crl</td><td>Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.</td><td>/</td><td>Animal</td></tr><tr><td>Caliper</td><td>Yantai Green Forest Tools Co., Ltd.</td><td>034180A</td><td>Mesurer le volume tumoral</td></tr><tr><td>Plat (60mm)</td><td>Shanghai NianYue Biotechnology Co., Ltd</td><td>430166, Corning</td><td>Placement de l’échantillon pendant</td>la</tr><tr><td>transplantation Boules de coton désinfectantes</td><td>Shanghai Honglong Industrial Co., Ltd.</td><td>20230627</td><td>Désinfecter la peau des souris</td></tr><tr><td>Gants stériles jetables</td><td>Guilin Hengbao Health Protection Co., Ltd.</td><td>YT21131</td><td>Opération stérile</td></tr><tr><td>Double lion Régime alimentaire irradié pour rongeurs</td><td>Suzhou Shuangshi Experimental Animal Feed Technology Co., Ltd.</td><td>GB 14924.3</td><td>Alimentation animale</td></tr><tr><td>Balance électronique</td><td>Shanghai NianYue Biotechnology Co., Ltd</td><td>1-2000</td><td>Peser le poids de la tumeur</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Shanghai Gengyun Biotechnology Co., Ltd</td><td>E4009-25G</td><td>Coloration à l’hématoxyline eosine</td></tr><tr><td>Hématoxyline</td><td>Shanghai Gengyun Biotechnology Co., Ltd</td><td>H3136-25G</td><td>Coloration à l’hématoxyline à l’éosine</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd</td><td>VETEASY</td><td>Anesthésie chez la souris&nbsp ;</td></tr><tr><td>IVCs souris cage</td><td>Suzhou Monkey King Animal Experimental Equipment Technology Co., Ltd.</td><td>HH-MMB-2</td><td>Stylo de marquage barrière pour animaux</td></tr><tr><td></td><td>Zebra Trading (Shenzhen) Co., Ltd.</td><td>YYST5</td><td>Marquer l’incision chirurgicale</td></tr><tr><td>Microscope optique</td><td>Olympus Japonais Olympus Company</td><td>BH20</td><td>Scanner des tranches de tissus</td></tr><tr><td>Pommade ophtalmique</td><td>Shanghai Gengyun Biotechnology Co., Ltd</td><td>SOICOEYEGRL</td><td>Eviter les yeux secs des souris pendant l’anesthésie</td></tr><tr><td>Ciseaux ophtalmiques</td><td>Shanghai NianYue Biotechnology Co., Ltd</td><td>Y00030 JZ</td><td>Couper la peau</td></tr><tr><td>Pince à épiler ophtalmique</td><td>Shanghai NianYue Biotechnology Co., Ltd</td><td>BS-ZER-S-100 Biosharp</td><td>Retenir les tissus d’ostéosarcome pendant la transplantation</td></tr><tr><td>Paraffine</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd.</td><td>80200-0015</td> Machine à trancher la paraffine <td>du tissu d’ostéosarcome enterré</td></tr><tr><td></td><td>Lyca Microsystem (Shanghai) Trading Co., Ltd.</td><td>RM2235</td><td>Section de tissu d’ostéosarcome</td></tr><tr><td>solution saline physiologique</td><td>Guangzhou Jinsheng Biotechnology Co., Ltd.</td><td>605-004057</td><td>Rinçage et stockage temporaire de tissus d’ostéosarcome</td></tr><tr><td>Scalpels</td><td>Surgical Instrument Factory of Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd.</td><td>J11010-10# JZ</td><td>Séparation du tissu de l’ostéosarcome et réalisation d’incisions chirurgicales</td></tr><tr><td>Cagoule</td> stérile <td>Thermo Fisher Technology (China) Co., Ltd.</td><td>ECO0.9</td><td>Table d’opération chirurgicale</td></tr><tr><td>champs chirurgicaux stériles</td><td>Henan Huayu Medical Equipment Co., Ltd.</td><td>20160090</td><td>Fournir une zone de chirurgie stérile</td></tr><tr><td>Porte-aiguille droit</td><td>Shanghai Gengyun Biotechnology Co., Ltd</td><td>J31050 JZ</td><td>Suture la plaie</td></tr><tr><td>Ligne de suture</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td>F3124</td><td>Suturer la plaie</td></tr><tr><td>Aiguille de suture</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td>F3124</td><td>Suturer la plaie</td></tr><tr><td>Solution protectrice des tissus</td><td>Nanjing Shenghang Biotechnology Co., LTD</td><td>BC-CFM-03</td><td>Maintenir l’activité des cellules tissulaires</td></tr><tr><td>Tube (50 mL)</td><td>Shanghai Baisai, Biotechnology Co., Ltd.</td><td>BLD-BL2002500</td><td>Installer une solution de fixation au formol</td></tr></tbody></table>

mise en place d’un modèle murin de xénogreffe dérivé d’un patient avec des tissus d’ostéosarcome humain

Establishment of Patient-Derived Xenograft Mouse Model with Human Osteosarcoma Tissues

Ce protocole décrit la procédure détaillée d’établissement d’un modèle murin PDX, en préservant les caractéristiques morphologiques de l’ostéosarcome humain après transplantation immédiate de tissu d’ostéosarcome humain fraîchement réséqué et passages successifs chez la souris. Ici, un modèle murin PDX a été établi avec succès en utilisant du tissu d’ostéosarcome humain.
La figure 3A montre une souris représentative de PDX à P0, deux mois après la transplantation de tissu d’ostéosarcome fémoral d’un patient de 15 ans. La figure 3B représente une souris représentative de la PDX à P1, un mois après la transplantation de tissu PDX à P0. La figure 3C montre une souris représentative de la PDX à P2, un mois après la transplantation de tissu PDX à P1. La figure 3D illustre une souris représentative de la PDX à P3, un mois après la transplantation de tissu PDX à P2.
Des souris ont été sacrifiées en utilisant la méthode de la luxation cervicale après inhalation de CO2 lorsque la taille de la tumeur a atteint 1 500mm3 pour collecter les tissus tumoraux PDX. Les tissus tumoraux de patients cliniques et de souris ont ensuite été intégrés dans de la paraffine et soumis à une coloration H&amp;E. Une image représentative de la coloration H&amp;E du tissu tumoral clinique du patient est illustrée à la figure 4A. Des images représentatives de la coloration H&amp;E des tissus tumoraux de souris PDX à P0, P1 et P2 sont présentées dans les figures 4B, C et D. Les caractéristiques de l’ostéosarcome, caractérisées par de petites cellules avec des noyaux ronds et hyperchromatiques dans les tissus tumoraux cliniques parentaux du patient, ont été maintenues dans les PDX établis à P0, P1 et P2.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66491/66491fig01.jpg"> Figure 1 : Instruments chirurgicaux. (A) Scalpel. (B, C) Pince à épiler ophtalmique. (D) Ciseaux ophtalmiques. (E) Aiguille de suture. (F) Ligne de suture. (G) Porte-aiguille droit. (H) Stylo de marquage. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66491/66491fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66491/66491fig02.jpg"> Figure 2 : Etablissement du modèle PDX. (A) Le site de transplantation tissulaire de l’ostéosarcome dans la région du flanc de la souris est marqué à l’aide d’un stylo de marqueur. (B) Une incision de 5 mm de longueur a été pratiquée dans la peau jusqu’au tissu sous-cutané. (C) Dissection émoussée et transplantation de tissu d’ostéosarcome. (D) Incision suturée. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66491/66491fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66491/66491fig03.jpg"> Figure 3 : Croissance de PDX transplantée à l’origine avec du tissu d’ostéosarcome fémoral d’un patient de 15 ans. (A) PDX établie par transplantation de tissu d’ostéosarcome humain (P0). (B) PDX établi par transplantation du tissu PDX à P0 (P1). (C) PDX établi par transplantation du tissu PDX à P1 (P2). (D) PDX établi par transplantation du tissu PDX à P2 (P3). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66491/66491fig03large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66491/66491fig04.jpg"> Figure 4 : Coloration à l’hématoxyline-éosine (H&amp;E) de coupes de tissus cliniques primaires et de tissus PDX. La coloration H&amp;E a détecté les caractéristiques histologiques de (A) l’ostéosarcome fémoral chez le patient de 15 ans, (B) le PDX à P0, (C) le PDX à P1, (D) le PDX à P2. Barres d’échelle : (A-D) 100 μm ; (E-H) 20 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66491/66491fig04large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

Mise en place d’un modèle murin de xénogreffe dérivé d’un patient avec des tissus d’ostéosarcome humain

Osteosarcoma is the most common primary malignant bone tumor in children and adolescents. Despite the development of new treatment plans in recent years, ...

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Dans cette vidéo, des cellules de mélanome d’origine humaine sont implantées par voie sous-cutanée dans la région du flanc d’une souris immunodéprimée. Le modèle PDX permet l’investigation préclinique des cellules de mélanome qui récapitulent mieux l’hétérogénéité tumorale et l’agressivité du mélanome observées dans des conditions in vivo.

Modélisation de xénogreffes dérivées de patients : une technique pour générer des modèles de souris de mélanome

Le cancer de la prostate est la deuxième cause la plus fréquente de décès liés au cancer aux États-Unis. Un modèle de cancer orthotopique fournit une approche utile pour comprendre la biologie du cancer de la prostate et pour évaluer l’efficacité des schémas thérapeutiques. Ce protocole décrit en détail les étapes nécessaires à l’établissement d’un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate.

Pré-clinique Orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine

Injection directe de vésicules extracellulaires dérivées du cancer (EVs) conduit à la reprogrammation de la moelle osseuse supportant la progression tumorale ; Cependant, les cellules médient cet effet n’est pas claire. Ici, les auteurs décrivent un protocole étape par étape pour étudier les interactions de EV médiée par les cellules souches tumeur mésenchymateuse (MSC) in vivo, révélant un rôle crucial pour MSCs EV-éduqués à la métastase.

Un modèle de souris préclinique de l’ostéosarcome pour définir la Communication médiée par les vésicules extracellulaire entre la tumeur et les cellules souches mésenchymateuses

Nous décrivons un protocole détaillé pour l'isolement des cellules tumeur-initiatrices des xénogreffes patient-dérivées humaines par le tri de cellules fluorescence-activé, utilisant l'antigène humain de leucocyte-1 (HLA-1) comme marqueur négatif, et pour la validation plus loin et caractérisation de ces cellules HLA-1-négatives de tumeur-initiateur.

Isolement et caractérisation des cellules initiatrices de tumeurs des xénogreffes dérivées du sarcome

Ici, nous présentons un protocole pour la génération de pluripotentes induites des cellules souches (CISP) de Syndrome de Li-Fraumeni (LFS) patient dérivée fibroblastes, différenciation de CISP par l’intermédiaire de cellules souches mésenchymateuses (CSM) d’ostéoblastes et modélisation in vivo tumorigenèse utilisant des ostéoblastes patient dérivé de LFS.

Ostéosarcome utilisant le Syndrome de Li-Fraumeni cellules souches de pluripotentes induites Patient dérivé de modélisation

Le protocole actuel décrit les méthodes pour établir des modèles de xénogreffe (PDX) dérivés du patient et des lignées cellulaires cancéreuses primaires à partir d'échantillons chirurgicaux de cancer gastrique. Les méthodes fournissent un outil utile pour le développement de médicaments et la recherche en biologie du cancer.

Établissement de modèles de xénogreffe dérivés du cancer gastrique et de lignées cellulaires primaires

Des modèles de souris de xénogreffe de xénogreffe de mélanome uastatique de foie humain orthotopic ont été créés utilisant des techniques orthotopic chirurgicales d'implantation orthotopic avec le morceau patient-dérivé de tumeur et les techniques d'injection d'aiguille avec les lignes humaines cultivées de cellules de mélanome uveal.

Génération d'un foie orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

Les modèles de métastases osseuses ne développent pas de métastases uniformément ou avec une incidence de 100%. L’injection directe de cellules tumorales intra-osseuses peut entraîner une embolisation du poumon. Nous présentons notre technique de modélisation des tumeurs osseuses primaires et des métastases osseuses en utilisant l’implantation d’une greffe de tumeur solide dans l’os, conduisant à une greffe et une croissance reproductibles.

Modélisation des tumeurs osseuses primaires et des métastases osseuses avec implantation d’une greffe de tumeur solide dans l’os

Les modèles PDX de métastases du système nerveux central représentent les caractéristiques phénotypiques et moléculaires des métastases humaines, ce qui en fait d’excellents modèles pour les études précliniques. Décrit ici comment établir des modèles PDX et les voies d’inoculation qui sont les mieux utilisées pour les études précliniques.

L’établissement et l’utilisation de modèles de xénogreffes dérivés de patients de métastases du système nerveux central

Le présent protocole décrit l’injection intratibia de cellules d’ostéosarcome pour générer des modèles murins portant des lésions d’ostéosarcome orthotopique et de métastases pulmonaires.

Injection intratibiale de cellules d’ostéosarcome pour générer des modèles murins d’ostéosarcome orthotopique et de métastases pulmonaires

Découvrez comment établir un modèle de xénogreffe dérivé de patient pour l'ostéosarcome humain chez la souris immunodéficiente. Cette méthode permet d'étudier la croissance tumorale, la résistance aux médicaments et la métastase.

Mise en place d’un modèle murin de xénogreffe dérivé d’un patient avec des tissus d’ostéosarcome humain

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