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DOI: 10.3791/66566-v
Yun Zhu Bai1, Yuriko Terada1, Katsutaka Mineura1, Yuhei Yokoyama1, Ruben G. Nava1, Alexander S. Krupnick2, Andrew E. Gelman1, Mark J. Miller3, Daniel Kreisel1, Wenjun Li1
1Division of Cardiothoracic Surgery,Washington University in St. Louis, 2Division of Thoracic Surgery,University of Maryland, 3Division of Infectious Diseases,Washington University in St. Louis
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ici, nous présentons un protocole d’imagerie intravitale du poumon gauche de souris transplantée à l’aide de la microscopie à deux photons. Il s’agit d’un outil précieux pour étudier la dynamique cellulaire et les interactions en temps réel après une transplantation pulmonaire murine.
L’objectif de notre recherche est de comprendre les mécanismes immunitaires sous-jacents aux lésions d’ischémie-reperfusion et les réponses inflammatoires et tolérogènes après une transplantation pulmonaire. Nous voulons étudier les interactions dynamiques entre les cellules donneuses et receveuses. Nous utilisons actuellement plusieurs techniques chirurgicales et d’imagerie dans l’étude de l’immunologie de la transplantation pulmonaire chez la souris.
Il s’agit notamment de la transplantation et de la retransplantation orthotopiques du poumon gauche, du clampage hilaire pulmonaire gauche, de la tomographie par émission de positrons non invasive et de l’imagerie intravitale à deux photons. Notre recherche révèle des réponses immunitaires uniques dans les poumons transplantés. En utilisant des techniques d’imagerie avancées, nous avons découvert que les monocytes receveurs favorisent l’infiltration des neutrophiles dans les allogreffes pulmonaires via l’IL-1 bêta.
Nous avons également constaté que les lymphocytes T régulateurs FOXP3 se regroupent au sein de ces allogreffes et protègent contre le rejet médié par les anticorps. Notre technique est facile à mettre en place, avec des matériaux que l’on trouve facilement dans un laboratoire de microscopie, tels que de la colle tissulaire et des lunettes de protection. De plus, il offre un champ de vision plus large par rapport aux autres techniques.
Notre laboratoire s’intéresse à la compréhension des mécanismes qui induisent et maintiennent la tolérance à l’allogreffe pulmonaire. L’imagerie intravitale nous permettra de visualiser les interactions entre les cellules immunitaires lors du rejet et de la tolérance.
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