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DOI: 10.3791/66697-v
Ying Xue*1, Yunyu Mao*2, Qibin Liao3, Chen Zhao4, Xiaoyan Zhang1,2,4, Jianqing Xu1,2,4
1Institutes of Biomedical Sciences,Fudan University, 2Clinical Center of Biotherapy at Zhongshan Hospital,Fudan University, 3Department of Oncology and Bio-therapeutic Center, Shenzhen Third People's Hospital,Southern University of Science and Technology, 4Shanghai Public Health Clinical Center,Fudan University
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Nous présentons ici un protocole pour la génération et la vérification fonctionnelle de cellules T à récepteur antigénique chimérique (CAR)-T sensibles à l’hypoxie. Ce protocole présente la génération de cellules CAR-T sensibles à l’hypoxie à l’hypoxie et leur caractérisation, y compris la validation de l’expression des CAR dépendants de l’hypoxie et de la cytotoxicité sélective.
Nos recherches portent principalement sur l’immunothérapie du cancer, en particulier l’immunothérapie à base de cellules CAR-T. Au cours des 10 dernières années, nous avons exploré de nouvelles stratégies pour permettre aux cellules CAR-T de cibler spécifiquement une tumeur en minimisant l’effet secondaire, voire en l’absence d’effet secondaire. De nouvelles stratégies ont été explorées avec persistance pour améliorer l’innocuité et l’efficacité de l’immunothérapie à base de cellules CAR-T, en particulier en ciblant le microenvironnement tumoral, tel que le CAR-conditionné par l’hypoxie, comme illustré dans ce protocole.
Il est intéressant de noter qu’une étude récente a démontré que l’hypoxie CAR T améliorait non seulement considérablement le profil d’innocuité, mais réduisait également l’épuisement des CAR T et augmentait l’efficacité dans les tumeurs solides. L’hypoxie est une caractéristique du microenvironnement tumoral. Notre recherche vise à aider les chercheurs dans le domaine de l’immunothérapie du cancer à comprendre le concept des cellules CAR-T sensibles à l’hypoxie, leur construction et la façon d’établir des modèles d’hypoxie pour l’évaluation.
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