Imagerie et quantification du système vasculaire hépatique de souris à l’aide de l’échographie Doppler ultrarapide

Notre recherche porte sur l’imagerie échographique ultrarapide non invasive du foie à l’aide d’une plateforme d’échographie disponible dans le commerce. Il vise à rationaliser les processus d’imagerie et d’analyse, à fournir des références anatomiques et à améliorer l’évaluation quantitative et qualitative du système vasculaire hépatique. Les développements récents dans notre domaine comprennent les ultrasons ultrarapides, qui détectent le faible flux sanguin dans les petits vaisseaux, améliorent la sensibilité avec l’agent de contraste et améliorent la résolution spatiale.

Ceci est réalisé grâce à des transmissions d’ondes planes, à l’augmentation de la fréquence d’images et à la fourniture d’estimations détaillées du volume sanguin dans chaque pixel. Les technologies actuelles que l’on retrouve dans la recherche dans notre domaine sont l’imagerie par ultrasons ultrarapides et la micro-tomodensitométrie 3D. Ces outils, combinés à la compréhension avancée de l’anatomie du foie, ont amélioré la précision et la reproductibilité de l’imagerie par ultrasons dans des modèles murins.

Nous avons mis au point un protocole d’imagerie par ultrasons ultrarapides non invasif pour le système vasculaire hépatique de souris, permettant des mesures précises du volume sanguin sans agents de contraste. Nos résultats comprennent une procédure standardisée d’analyse des données, une paramétrification vasculaire robuste et une visualisation claire des structures anatomiques, garantissant des évaluations précises et reproductibles de la microcirculation. Notre protocole offre une imagerie hépatique non invasive et haute sensibilité sans avoir besoin d’agents de contraste, capturant le flux sanguin lent et les petits vaisseaux sanguins.

Il améliore la précision en supprimant les artefacts de mouvement, la quantification standardisée et une vue d’ensemble anatomique claire, et affiche des mesures précises et reproductibles. Pour commencer, placez la souris anesthésiée préparée sur le coussin chauffant. Coupez doucement le ventre de l’animal à l’aide d’une tondeuse vétérinaire sans appliquer de compression sur la poitrine ou l’abdomen. Alors.

Appliquez la crème dépilatoire pendant deux minutes maximum. Retirez la crème dépilatoire et nettoyez doucement à l’eau tiède. Ensuite, placez l’animal dorsalement sur un coussin chauffant et fixez doucement les pattes à l’aide de ruban adhésif.

Hydratez la peau avec une petite quantité d’eau tiède. À l’aide d’une seringue de 20 millilitres, appliquez le gel de transmission d’ultrasons centrifugé directement sur la peau rasée. Ensuite, placez le réservoir d’eau imprimé en 3D au-dessus de l’animal.

Vérifiez s’il y a de l’air entre le gel de transmission d’ultrasons et le thermoplastique polyméthylpentène du réservoir d’eau, puis ajoutez de l’eau dans le réservoir. Après avoir préparé la souris pour l’échographie Doppler ultrarapide, démarrez le logiciel, créez une session expérimentale sur le système et lancez le logiciel de numérisation. Cliquez sur oui dans la fenêtre contextuelle pour centrer les moteurs.

Pour créer une nouvelle session expérimentale, sélectionnez session dans le menu. Dans le panneau de session, remplissez les informations nécessaires, y compris le projet, le sujet, la session, le nom d’utilisateur, le commentaire et la balise. Cliquez sur Valider.

Ensuite, chargez une séquence d’échographie ultrasensible Doppler de 10 millisecondes avec le bouton de séquence de charge. Définissez la profondeur d’imagerie entre un et 50 millimètres, avec une profondeur d’image maximale de 50 millimètres. Pour sélectionner les paramètres de visualisation, choisissez Doppler pour imager le système vasculaire.

Choisissez la méthode de compression d’image, logarithmique, racine carrée ou linéaire. Vous pouvez également ajuster la plage de contraste automatiquement ou manuellement à l’aide des curseurs pour les options de contraste élevé et faible. Pour sélectionner l’échelle de la carte de couleurs du noir au blanc, cochez l’option gris, ou du noir rougeâtre au jaune, cochez chaud.

Sélectionnez le plan d’imagerie en fonction des repères anatomiques. Basculez entre la visualisation du mode Doppler et le mode B pour vous familiariser avec l’anatomie des lobes hépatiques et du système vasculaire. Cliquez sur l’icône d’arrêt pour arrêter la vue en direct.

Maintenant, accédez au menu Déplacer la sonde pour ajuster la sonde et sélectionner un plan. Pour commencer, préparez l’animal à l’imagerie et positionnez la sonde dans le réservoir d’eau. Effectuez le fonctionnement de la sonde et la sélection du plan, puis lancez une acquisition Doppler avec une fréquence d’images de 10 millisecondes.

Allez dans le menu fUS 2D pour imager les variations hémodynamiques dans le temps à une position spécifique. Dans l’onglet préréglage, réglez le temps entre les images sur zéro seconde pour choisir un mode continu sans pause entre les images, puis définissez la durée totale d’enregistrement en secondes. Ensuite, appuyez sur le bouton d’enregistrement pour lancer l’acquisition 2D.

Une fois l’enregistrement terminé, appuyez sur le bouton d’arrêt. Donnez un nom à l’enregistrement acquis pour enregistrer le fichier dans un format de numérisation dans le dossier de session. Une fenêtre contextuelle apparaîtra à la fin de chaque enregistrement pour sauvegarder automatiquement les données.

Ouvrez le script d’analyse gui_analysis.m. Sélectionnez le balayage et définissez 10 régions d’intérêt avec une taille de voxel de deux par deux. Choisissez 40 millisecondes pour chaque image afin d’effectuer l’intégration Doppler.

Ensuite, dessinez la périphérie vasculaire de l’organe de manière à ce que les 10 ROI soient automatiquement prépositionnés entre les artères clairement visibles et puissent être ajustés manuellement si nécessaire. Pour quantifier le volume sanguin hépatique moyen en unités arbitraires du total des 10 ROI, estimez automatiquement la moyenne et l’écart-type des valeurs de cadre silencieux dans l’enregistrement de 30 secondes.