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Mesure de la respiration mitochondriale dans les fibres musculaires squelettiques humaines et mur...
Mesure de la respiration mitochondriale dans les fibres musculaires squelettiques humaines et mur...
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Measurement of Mitochondrial Respiration in Human and Mouse Skeletal Muscle Fibers by High-Resolution Respirometry

Mesure de la respiration mitochondriale dans les fibres musculaires squelettiques humaines et murines par respirométrie à haute résolution

Full Text
2,299 Views
08:12 min
October 4, 2024

DOI: 10.3791/66834-v

Terri A. Pietka1,2, Rita T. Brookheart1,3

1John T. Milliken Department of Medicine, Division of Nutritional Sciences and Obesity Medicine,Washington University School of Medicine, 2Nutrition and Obesity Research Center, Cellular and Molecular Biology Core,Washington University School of Medicine, 3Nutrition and Obesity Research Center, Animal Model Research Core,Washington University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ici, nous décrivons une méthode complète pour mesurer la phosphorylation oxydative mitochondriale dans les fibres musculaires squelettiques perméabilisées fraîches à partir de muscles humains ou de souris. Cette méthode permet de quantifier en temps réel la respiration mitochondriale et d’évaluer la préférence pour le carburant et la flexibilité métabolique tout en préservant les réseaux mitochondriaux existants et l’intégrité de la membrane.

Nos recherches portent sur l’intersection du métabolisme et des réponses au stress dans les maladies métaboliques, un thème majeur du programme NORD de l’Université de Washington. Grâce aux synergies entre nos noyaux NORD, nous sommes en mesure d’aborder des questions complexes dans le métabolisme nutritionnel et les maladies grâce à une approche interdisciplinaire et collaborative. Les tests traditionnels de respiration mitochondriale ont examiné des mitochondries isolées.

L’isolement des mitochondries prend du temps et peut compromettre l’intégrité de la membrane mitochondriale externe. De plus, les mitochondries ne fonctionnent pas seules, mais font partie d’un réseau dynamique d’adaptation métabolique cellulaire. Notre protocole maintient ce réseau pour fournir une évaluation physiologiquement pertinente de la fonction mitochondriale.

Notre objectif s’est étendu à l’identification des régulateurs de l’adaptation métabolique qui sont importants pour la santé et la maladie. Les principales questions que nous nous posons sont les suivantes : ces régulateurs, comme la protéase du site 1, sont-ils aussi importants dans différents types de tissus ? Et quelle est leur signification physiologique ?

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Biologie Numéro 212 métabolisme fibres musculaires squelettiques mitochondries consommation d’oxygène souris humain méthodologie respirométrie

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