Récolte, intégration et culture de ganglions de la racine dorsale dans des dispositifs à compartiments multiples pour étudier les caractéristiques neuronales périphériques
June 28th, 2024
Ce protocole fournit une technique pour récolter et cultiver le ganglion de la racine dorsale (DRG) explanté de rats Sprague Dawley adultes dans un dispositif à compartiments multiples (MC).
Notre recherche vise à comprendre certains des mécanismes sous-jacents qui contribuent à la douleur musculo-squelettique chronique, afin de pouvoir développer de nouveaux traitements ciblés. Ainsi, nous avons développé des modèles in vitro et in vivo de lombalgie chronique et de sensibilisation neuronale. Les thérapies actuelles qui fonctionnent in vivo dans des modèles animaux échouent souvent aux essais cliniques en raison de différences mécanistes entre les modèles animaux et le phénotype de la douleur chronique chez l’homme.
Test individuel par ce modèle, l’hypersensibilité des nocicepteurs présente dans la douleur chronique ont le potentiel d’identifier des traitements plus prometteurs pour la douleur chronique chez l’homme. Notre protocole démontre clairement comment isoler les ganglions primaires de la racine dorsale et les cultiver dans un dispositif à plusieurs compartiments. En gardant intacts les ganglions de la racine dorsale primaires, nous maintenons les cellules de soutien natives et les cultivons dans un dispositif à plusieurs compartiments, permettant une isolation anatomiquement pertinente entre les somas neuronaux et les neurites périphériques.
Cet outil aidera à cultiver les ganglions primaires de la racine dorsale d’une manière plus pertinente sur le plan physiologique et anatomique, augmentant ainsi l’efficacité translationnelle des résultats. Plus précisément, nous sommes ravis d’utiliser ce système pour identifier un nouveau traitement pour l’hypersensibilité nociceptrice présente dans la douleur chronique.
Aperçu
Ce protocole fournit une technique pour récolter et cultiver des ganglions de la racine dorsale (DRG) explantés de rats Sprague Dawley adultes dans un dispositif à compartiments multiples (MC). L'étude vise à comprendre les mécanismes contribuant à la douleur musculosquelettique chronique et à développer des traitements ciblés.
Composants clés de l'étude
Domaine de la science
- Neuroscience
- Recherche sur la douleur chronique
- Techniques de culture cellulaire
Contexte
- La douleur musculosquelettique chronique est un défi clinique important.
- Les modèles animaux actuels échouent souvent à se traduire en thérapies humaines.
- Les modèles in vitro peuvent aider à identifier des traitements prometteurs.
- Le maintien des cellules de soutien natives est crucial pour une modélisation précise.
Objectif de l'étude
- Isoler les ganglions de la racine dorsale primaires (DRG) des rats.
- Cultiver les DRG d'une manière qui préserve la pertinence anatomique.
- Faciliter l'étude de l'hypersensibilité des nocicepteurs.
Méthodes utilisées
- Récolte des ganglions de la racine dorsale de rats Sprague Dawley adultes.
- Culture des DRG dans un dispositif à compartiments multiples.
- Maintien des DRG primaires intacts pour préserver les cellules de soutien natives.
- Isolation des somas neuronaux des neurites périphériques.
Résultats principaux
- Le protocole isole et cultive avec succès les DRG.
- Le maintien de la séparation anatomique améliore la pertinence expérimentale.
- Les conditions in vitro imitent les caractéristiques de la douleur chronique.
- Potentiel d'identification de nouveaux traitements pour la douleur chronique.
Conclusions
- Le protocole développé est efficace pour étudier les mécanismes de la douleur chronique.
- Il permet l'exploration de l'hypersensibilité des nocicepteurs.
- Les recherches futures peuvent s'appuyer sur ce modèle pour améliorer les stratégies thérapeutiques.
Questions fréquemment posées
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:24
Assembly of Multi‐Compartment Device and Harvesting of Dorsal Root Ganglia (DRG) from Adult Sprague Dawley Rats
3:35
Trimming, Cutting, and Embedding the Dorsal Root Ganglion for Culturing in a Multi‐Compartment (MC) Device
5:10
Quantification of Dorsal Root Ganglion Neurite Growth in a Multi‐Compartment (MC) Device Using Fiji
