Name: Développement de thérapies combinatoires pour les lésions de la moelle épinière à l’aide de l’administration de cellules souches (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-07T14:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Découvrez le développement d'hydrogels décellularisés pour la réparation des lésions de la moelle épinière. Cette méthode utilise des cellules souches adipose-dérivées et une plateforme de culture 3D pour optimiser les thérapies combinatoires régénératives.

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<table><tbody><tr><td>3-(décyldiméthylammonio)sulfonate de propane sel interne</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4266</td><td>Utilisé lors de la décellularisation du nerf sciatique, SB-10</td></tr><tr><td>3-(N,N-Diméthylpalmitylammonio)sulfonate de propane</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H6883</td><td>Utilisé lors de la décellularisation du nerf sciatique, SB-16</td></tr><tr><td>Réactif AlamarBlue</td><td>Fisher Scientific</td><td>DAL1100</td><td>Utilisé lors du test de viabilité des cellules AlamaBlue</td></tr><tr><td>Chondroitinase ABC</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3667</td><td>Utilisé lors de la décellularisation du nerf sciatique</td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Leica</td><td>CM1860</td><td></td></tr><tr><td>Désoxyribonuclase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4263</td><td>Utilisé lors de la décellularisation du nerf sciatique</td></tr><tr><td>Phosphate d’hydrogène disodique heptahydrate</td><td>VWR</td><td>BDH9296</td><td>Produit chimique pour 100 mM Na/50 mM phos et 50 mM Na/10 mM phos tampon</td></tr><tr><td>DNeasy Blood & Blood Kit de mouchoirs</td><td>Qiagen</td><td>69506</td><td>Utilisé lors de l’analyse ADN</td></tr><tr><td>Dpx Mountant pour l’histologie, support de montage sur culasse</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>6522</td><td>Utilisé pendant H& Coloration E</td></tr><tr><td>Éosine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT110216</td><td>Utilisé pendant H& Coloration E</td></tr><tr><td>Éthanol</td><td>VWR</td><td>89125-172</td><td></td></tr><tr><td>Formaldéhyde</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>252549</td><td>Utilisé pendant H& Coloration E</td></tr><tr><td>Glutaraldéhyde (GA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td>Utilisé lors de la fonctionnalisation de la surface PDMS</td></tr><tr><td>Médias de croissance hASC</td><td>Lonza</td><td>PT-4505</td><td>Utilisé pour cultiver des hASC, contenant du sérum bovin fœtal et de la péniciline/streptomycine</td></tr><tr><td>Hématoxyline</td><td>VWR</td><td>26041-06</td><td>Utilisé pendant H& Coloration E</td></tr><tr><td>Cellules souches humaines dérivées de l’adip</td><td>Lonza</td><td>PT-5006</td><td></td></tr><tr><td>Acide chlorhydrique (HCl)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320331</td><td>Utilisé pour digérer les tissus décellularisés et ajuster les solutions de Pregel</td></tr><tr><td>Médias M199</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M0650</td><td>Utilisé pour diluer les pregels à la concentration désirée</td></tr><tr><td>Composé de températ de coupe optimal</td><td>Tissue-Tek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Pepsine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7000</td><td>Utilisé pour digérer les tissus décellularisés</td></tr><tr><td>Acide peracétique</td><td>Allée des labos</td><td>PAA1001</td><td>Utilisé lors de la décellularisation de la moelle épinière</td></tr><tr><td>Solution physiologique tamponnée au phosphate (PBS)</td><td>VWR</td><td>97062-948</td><td></td></tr><tr><td>Lecteur de plaques</td><td>BioTek Instruments</td><td>Synergy Mx</td><td></td></tr><tr><td>Polyéthyléneimine (PEI)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>181978</td><td>Utilisé lors de la fonctionnalisation de la surface PDMS</td></tr><tr><td>Nerf sciatique porcin</td><td>Tissue Source LLC</td><td></td><td>Des cochons vivants, sans aucune information identifiable et sans détails de traçabilité</td></tr><tr><td>Moelle épinière porcine</td><td>Tissue Source LLC</td><td></td><td>Des cochons vivants, sans aucune information identifiable et sans détails de traçabilité</td></tr><tr><td>Système dsDNA QuantiFluor</td><td>Promega</td><td>E2670</td><td>Utilisé pour analyser le contenu de l’ADN</td></tr><tr><td>Rhéomètre</td><td>TA Instruments</td><td>DHR 2</td><td></td></tr><tr><td>Rotateur robuste</td><td>Glas-co</td><td>099A RD4512</td><td>Utilisé lors de la décellularisation de la moelle épinière</td></tr><tr><td>Chlorure de sodium (NaCl)</td><td>VWR</td><td>BDH9286</td><td>Produit chimique pour 100 mM Na/50 mM phos et 50 mM Na/10 mM phos tampon</td></tr><tr><td>Désoxycholate de sodium</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D6750</td><td></td></tr><tr><td>Monohydrate de phosphate de dihydrogène de sodium</td><td>VWR</td><td>BDH9298</td><td>Produit chimique pour 100 mM Na/50 mM phos et 50 mM Na/10 mM phos tampon</td></tr><tr><td>Solution d’hydroxyde de sodium (NaOH)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>415443</td><td>Utilisé pour ajuster les solutions de Pregel</td></tr><tr><td>SU-8</td><td>Matériaux améliorés par Kayaku</td><td>SU8-100</td><td>Utilisé pour recouvrir une plaquette de silicium</td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8501</td><td>Utilisé lors de la décellularisation de la moelle épinière</td></tr><tr><td>Kit en élastomère en silicone Sylgard 184</td><td>DOW</td><td>1317318</td><td>Base et agent de polydiméthylxiloxane (PDMS)</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100</td><td>Utilisé lors de la décellularisation de la moelle épinière</td></tr><tr><td>Trypsine-EDTA (0,05 %), phénol rouge</td><td>Thermo Fisher</td><td>25300062</td><td>Utilisé lors des travaux sur le hASC et lors de la décellularisation de la moelle épinière</td></tr><tr><td>Rotateur de revolver à tube</td><td>Thermo Fisher</td><td>88881001</td><td>Utilisé lors de la décellularisation du nerf sciatique</td></tr><tr><td>Xylène</td><td>VWR</td><td>MK866816</td><td>Utilisé pendant H& Coloration E</td></tr></tbody></table>

développement de thérapies combinatoires pour les lésions de la moelle épinière à l’aide de l’administration de cellules souches

Development of Combinatorial Therapeutics for Spinal Cord Injury using Stem Cell Delivery

Développement de thérapies combinatoires pour les lésions de la moelle épinière à l’aide de l’administration de cellules souches

Traumatic spinal cord injury (SCI) induces permanent sensorimotor deficit below the site of injury. It affects approximately a quarter million people in ...

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JoVE Journal

Bioengineering

Bioingénierie

Lésions traumatiques de la moelle épinière interrompt la communication avec le cerveau. Pour restaurer la connectivité perdue, nous utilisons une greffe du nerf périphérique pour fournir un substrat pour les fibres de régénération en combinaison avec les facteurs neurotrophiques et la matrice de modulation des enzymes pour éliminer les molécules inhibitrices de promouvoir la croissance à longue distance.

Combinant des nerfs périphériques et de greffe matrice de modulation de réparer le cordon Rat épinière lésée

La transplantation précurseurs neuraux est une stratégie prometteuse pour protéger et / ou le remplacement perdu / dysfonctionnel cervicale neurones moteurs phrénique des blessures de la moelle épinière (SCI) et les neurones moteurs désordre, la sclérose amyotrophique latérales (SLA). Nous fournissons un protocole pour la livraison de cellule à la corne moelle épinière cervicale ventrale dans des modèles rongeurs de la SLA et la SCI.

Cell Transplantation intraspinale pour le ciblage du col corne ventrale de la sclérose latérale amyotrophique et les lésions de la moelle épinière

Source : Zweckberger, K., et al. Utilisation synergique de cellules précurseurs neurales et de peptides auto-assemblés dans les lésions expérimentales de la moelle épinière cervicale.  J. Vis. Exp. (2015).Ce protocole démontre une approche d’injection ciblée pour la réparation des lésions de la moelle épinière dans un modèle de rat. Il s’agit d’administrer des peptides auto-assemblés (SAP) dans le noyau de la lésion pour créer un échafaudage de soutien, suivi d’injections de cellules...

Injection de peptides auto-assemblés et de cellules précurseurs neurales pour la réparation de la moelle épinière dans un modèle de rat

des matrices de fibrine contenant des facteurs de croissance ont été utilisés pour conserver des cellules souches neurales dans des sites greffés complète de transection de la moelle épinière. Cellules greffées complètement remplis la cavité de la lésion et différenciées en plusieurs types de cellules neurales, y compris les neurones qui s'étendaient axones dans la moelle épinière hôte sur de longues distances.

Promotion de la survie et de la différenciation des cellules souches neurales de fibrine et du facteur de croissance Cocktails après Spinal Cord Injury sévère

Le traitement des lésions de la moelle épinière cervicale à l’aide de peptides auto-assemblés (SAP) et de cellules précurseurs neurales (NPC), ainsi que de facteurs de croissance, est une approche prometteuse pour favoriser la régénération et la récupération. Un modèle de clip d’anévrisme de contusion/compression chez le rat de LME cervicale et un traitement combiné impliquant l’injection de SAP et la transplantation de NPC sont établis.

Utilisation synergique des cellules neurales précurseurs et peptides d&#39;auto-assemblage dans la partie expérimentale moelle épinière cervicale blessures

Lésion de la moelle épinière est une condition traumatique qui entraîne une morbidité grave et une mortalité élevée. Dans ce travail, nous décrivons en détail un modèle de contusion de blessure de la moelle épinière chez la souris suivie d'une transplantation de cellules souches neurales.

Neural Transplantation de cellules souches dans la partie expérimentale Modèle contusion de la moelle épinière des blessures

Cette étude décrit une plateforme expérimentale permettant de caractériser rapidement les cellules souches modifiées et leurs comportements avant leur application dans des études de transplantation in vivo à long terme pour le sauvetage et la réparation du système nerveux.

High Throughput Caractérisation des cellules souches adultes d&#39;ingénierie pour la livraison des facteurs thérapeutiques pour les stratégies neuroprotectrices

Les lésions graves de la moelle épinière entraînent souvent des anomalies tissulaires. Deux possibilités sont décrites pour combler avec succès ces lacunes afin de promouvoir l’adaptation tissulaire, les réponses régénératives et l’amélioration fonctionnelle chez le rat via l’implantation d’un système de microconnecteur mécanique après une lésion aiguë et cinq semaines après une transsection complète de la moelle épinière.

Stratégies expérimentales pour combler les lacunes de tissus grandes dans la moelle épinière lésée après aiguë et chronique Lésion

Cet article décrit une technique pour insérer un tube creux entre les souches de la moelle épinière après transection complète et remplissez-le de cellules de Schwann (SCs) et matrice injectable membrane basale afin de combler et de promouvoir la régénération axonale dans le fossé.

Transplantation de Schwann des cellules à l’intérieur des Conduits de PVDF-TrFE pour combler les souches moelle épinière sectionnée Rat pour promouvoir la régénération axonale dans le fossé

Ce protocole décrit la fabrication d’un système de culture cellulaire pour permettre à l’ensemencement des cellules souches sur un échafaudage de polymère conducteur pour in vitro la stimulation électrique et subséquent en vivo l’implantation de l’échafaudage graines cellules souches en utilisant un technique mini-invasive.

Échafaudage conductrice de moduler et de fournir des cellules souches

Dans cet article, nous proposons une méthode reproductible pour générer et maintenir à long terme des coupes organotypiques de la moelle épinière transplantées avec des cellules souches neurales comme modèle ex vivo pour tester des thérapies de remplacement cellulaire.

Culture à long terme de coupes organotypiques de moelle épinière de souris comme plate-forme de validation de la transplantation cellulaire dans les lésions de la moelle épinière

Découvrez le développement d'hydrogels décellularisés pour la réparation des lésions de la moelle épinière. Cette méthode utilise des cellules souches adipose-dérivées et une plateforme de culture 3D pour optimiser les thérapies combinatoires régénératives.

Développement de thérapies combinatoires pour les lésions de la moelle épinière à l’aide de l’administration de cellules souches (Vidéo) | JoVE Journal

Développement de thérapies combinatoires pour les lésions de la moelle épinière à l’aide de l’administration de cellules souches

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