Name: Électroporation à base de substrat poreux avec surveillance de l’impédance électrique transépithéliale (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 6 s
Description: Découvrez l'électroporation à base de substrat poreux avec surveillance de l'impédance électrique transépithéliale pour la biologie cellulaire. Cette méthode optimise la livraison intracellulaire tout en maintenant une haute viabilité cellulaire.

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<meta charset="utf8"></head><body>Méthode TEEI pour l’analyse d’électroporation et la prédiction de l’administration dans les cellules A431

<ol><li>Brooks, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+throughput+and+highly+controllable+methods+for+in+vitro+intracellular+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">High throughput and highly controllable methods for in vitro intracellular delivery.</a> Small. 16 (51), e2004917(2020).</li>
<li>Stewart, M. P., Langer, R., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+delivery+by+membrane+disruption%3A+Mechanisms%2C+strategies%2C+and+concepts%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Rev%22%5BJournal%5D)">Intracellular delivery by membrane disruption: Mechanisms, strategies, and concepts.</a> Chem Rev. 118 (16), 7409-7531 (2018).</li>
<li>Canatella, P. J., Karr, J. F., Petros, J. A., Prausnitz, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+study+of+electroporation-mediated+molecular+uptake+and+cell+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Quantitative study of electroporation-mediated molecular uptake and cell viability.</a> Biophys J. 80 (2), 755-764 (2001).</li>
<li>Pliquett, U., Gift, E. A., Weaver, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+the+electric+field+and+anomalous+heating+caused+by+exponential+pulses+with+aluminum+electrodes+in+electroporation+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectrochem+Bioenerg%22%5BJournal%5D)">Determination of the electric field and anomalous heating caused by exponential pulses with aluminum electrodes in electroporation experiments.</a> Bioelectrochem Bioenerg. 39 (1), 39-53 (1996).</li>
<li>Pan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+membrane+damage+and+cargo+delivery+in+nano-electroporation%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Cell membrane damage and cargo delivery in nano-electroporation.</a> Nanoscale. 15 (8), 4080-4089 (2023).</li>
<li>Boukany, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanochannel+electroporation+delivers+precise+amounts+of+biomolecules+into+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Nanochannel electroporation delivers precise amounts of biomolecules into living cells.</a> Nat Nanotechnol. 6 (11), 747-754 (2011).</li>
<li>Chang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-%2Fnanoscale+electroporation%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Micro-/nanoscale electroporation.</a> Lab Chip. 16 (21), 4047-4062 (2016).</li>
<li>Patino, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+high-throughput+localized+electroporation+workflow+with+deep+learning-based+analysis+for+cell+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Multiplexed high-throughput localized electroporation workflow with deep learning-based analysis for cell engineering.</a> Sci Adv. 8 (29), 7637(2022).</li>
<li>Sagvolden, G., Giaever, I., Pettersen, E. O., Feder, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+adhesion+force+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cell adhesion force microscopy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (2), 471-476 (1999).</li>
<li>Ishibashi, T., Takoh, K., Kaji, H., Abe, T., Nishizawa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+porous+membrane-based+culture+substrate+for+localized+in+situ+electroporation+of+adherent+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+Actuators+B%3A+Chem%22%5BJournal%5D)">A porous membrane-based culture substrate for localized in situ electroporation of adherent mammalian cells.</a> Sensors Actuators B: Chem. 128 (1), 5-11 (2007).</li>
<li>Mukherjee, P., Nathamgari, S. S. P., Kessler, J. A., Espinosa, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+numerical+and+experimental+investigation+of+localized+electroporation-based+cell+transfection+and+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Combined numerical and experimental investigation of localized electroporation-based cell transfection and sampling.</a> ACS Nano. 12 (12), 12118-12128 (2018).</li>
<li>Brooks, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+equivalent+circuit+model+for+localized+electroporation+on+porous+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">An equivalent circuit model for localized electroporation on porous substrates.</a> Biosens Bioelectron. 199, 113862(2022).</li>
<li>Brooks, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transepithelial+electrical+impedance+increase+following+porous+substrate+electroporation+enables+label-free+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Transepithelial electrical impedance increase following porous substrate electroporation enables label-free delivery.</a> Small. 20 (25), 2310221(2023).</li>
<li>Vindiš, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+electrotransfer+into+mammalian+cells+using+commercial+cell+culture+inserts+with+porous+substrate%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Gene electrotransfer into mammalian cells using commercial cell culture inserts with porous substrate.</a> Pharmaceutics. 14 (9), 1959(2022).</li>
<li>Ye, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+electroporation+with+real-time+impedance+assessment+using+a+constriction+microchannel%5BTitle%5D)+AND+%22Micromachines%22%5BJournal%5D)">Single-cell electroporation with real-time impedance assessment using a constriction microchannel.</a> Micromachines. 11 (9), 856(2020).</li>
<li>Bednarek, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+methods+for+measuring+the+permeability+of+cell+monolayers%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Protoc%22%5BJournal%5D)">In vitro methods for measuring the permeability of cell monolayers.</a> Methods Protoc. 5 (1), 17(2022).</li>
<li>Harhaj, N. S., Antonetti, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+tight+junctions+and+loss+of+barrier+function+in+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of tight junctions and loss of barrier function in pathophysiology.</a> Int J Biochem Cell Biol. 36 (7), 1206-1237 (2004).</li>
<li>Hunter, R. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHunter%2C+RJ+%22Zeta+potential+in+colloid+science%3A+Principles+and+applications%22">Zeta potential in colloid science: Principles and applications</a>. 2, Academic Press. (2013).</li>
<li>Wong, P. K., Wang, T. -H., Deval, J. H., Ho, C. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrokinetics+in+microdevices+for+biotechnology+applications%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE%2FASME+Trans+Mechatron%22%5BJournal%5D)">Electrokinetics in microdevices for biotechnology applications.</a> IEEE/ASME Trans Mechatron. 9 (2), 366-376 (2004).</li>
<li>Qian, K., Wang, Y., Lei, Y., Yang, Q., Yao, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+and+theoretical+study+on+cell+swelling+for+osmotic+imbalance+induced+by+electroporation%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectrochemistry%22%5BJournal%5D)">An experimental and theoretical study on cell swelling for osmotic imbalance induced by electroporation.</a> Bioelectrochemistry. 157, 108637(2024).</li>
<li>Fox, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroporation+of+cells+in+microfluidic+devices%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Bioanal+Chem%22%5BJournal%5D)">Electroporation of cells in microfluidic devices: A review.</a> Anal Bioanal Chem. 385 (3), 474-485 (2006).</li>
</ol>

L’électroporation est une technique dans laquelle les cellules sont exposées à un champ électrique, créant des pores temporaires dans la membrane cellulaire à travers lesquels les marchandises, y compris les protéines, l’ARN et l’ADN, peuvent passer 1,2. La version la plus utilisée est l’électroporation en vrac (BEP). La PEB est réalisée en remplissant une cuvette avec un électrolyte contenant des millions de cellules, en exposant l’électrolyte à une haute tension et en permettant à la cargaison de pénétrer dans les cellules par diffusion ou endocytose1. Les BEP présentent de nombreux avantages, notamment un débit élevé et de nombreux systèmes disponibles dans le commerce. Cependant, il existe des limites à la livraison du BEP. Le positionnement incohérent des cellules par rapport aux électrodes et le blindage du champ électrique par rapport aux cellules adjacentes entraînent une variabilité significative de l’exposition au champ électrique pendant les PEB3 et 4. La haute tension requise pour le BEP a également un impact négatif significatif sur la viabilité des cellules5. Depuis sa création en 20116, il y a eu un intérêt croissant pour une méthode d’électroporation appelée électroporation sur substrat poreux (PSEP), bien qu’elle soit parfois désignée par d’autres noms, notamment l’électroporation localisée et la nano- ou micro-électroporation 1,7,8. Contrairement à la suspension cellulaire de BEP, la PSEP est réalisée sur des cellules qui adhèrent à un substrat poreux. Non seulement un état d’adhérence est préféré pour la majorité des lignées cellulaires humaines9, mais les pores du substrat se concentrent également sur le courant électrique, localisant le potentiel électrique transmembranaire (TMP) dans des régions spécifiques de la membrane cellulaire10,11. Cette localisation permet une réduction significative de la tension appliquée, diminuant les dommages et augmentant la viabilité des cellules. Cette combinaison d’effets aide à contrôler le développement des pores de la membrane cellulaire, ce qui se traduit par une administration plus cohérente et plus efficace 1,5,12.
Une étude récente a présenté un dispositif PSEP doté d’un réseau d’électrodes plaquées or à six puits pour maintenir des inserts de membrane poreuse disponibles dans le commerce13 (figures 1A, B), une pratique qui a été introduite pour la première fois par Vindis et al.14. L’appareil peut appliquer des impulsions et mesurer l’impédance électrique à travers la monocouche de cellule, connue sous le nom d’impédance électrique transépithéliale (TEEI), en temps réel13. L’interface utilisateur de l’appareil permet un contrôle total de la forme d’onde et de la polarité de l’électroporation. Il est important de noter que les mesures d’impédance en temps réel peuvent être utilisées pour prédire les résultats de l’administration sans avoir besoin de réactifs coûteux ou de marqueurs fluorescents, un concept connu sous le nom d’administration sans marquage15.
La plate-forme PSEP se compose de deux principaux composants électriques personnalisés : le corps principal de l’appareil, qui abrite le générateur d’impulsions et l’équipement de mesure TEEI, et le réseau d’électrodes, où les substrats poreux sont insérés et où l’électroporation se produit. Des diagrammes pour tous les composants électroniques personnalisés et imprimés en 3D peuvent être trouvés sur GitHub : https://github.com/YangLabUNL/PSEP-TEEI. En plus de l’électronique personnalisée, un ordinateur est également nécessaire au bon fonctionnement de la plate-forme. Le logiciel personnalisé nécessite MATLAB (version 2021a ou ultérieure) pour s’exécuter, et Microsoft Excel pour stocker et accéder aux données à des fins d’analyse. Le programme contrôle l’électronique personnalisée et fournit l’interface utilisateur graphique (GUI) pour ajuster les paramètres. Ces programmes ont également été mis à disposition sur GitHub : https://github.com/YangLabUNL/PSEP-TEEI.
Les données préliminaires suggèrent que ce processus est possible pour différents types de cellules adhérentes (Figure 1C), mais cet article ne traitera que de la préparation des cellules A431 à l’aide de paramètres qui se sont avérés optimaux pour cette lignée cellulaire par Brooks et al.13. De plus, comme la cargaison d’iodure de propidium (PI) est cytotoxique, deux expériences sont réalisées, la première avec un milieu de transfection PI à haute concentration pour quantifier l’efficacité de l’administration, et la seconde avec uniquement des milieux de culture cellulaire pour mesurer l’EIEO sur des échelles de temps plus longues. Ces expériences utilisent des formes d’onde d’électroporation identiques, ce qui permet de corréler les résultats (Figure 1D).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66971/66971fig01.jpg"> Figure 1 : Schéma d’assemblage du réseau d’électrodes et données de base. (A) Modèle CAO d’un insert à l’intérieur d’un puits du réseau d’électrodes. (B) Modèle CAO du réseau d’électrodes. (C) Augmentation de l’impédance due au PSEP pour certaines lignées cellulaires, n = 3 par lignée cellulaire. Barre d’erreur : erreur type de la moyenne. (D) Efficacité de la livraison vs. TEEI augmenter les données de corrélation. L’efficacité de livraison a été calculée en divisant le nombre de cellules étiquetées dans les images PI et calcein des expériences de livraison par le nombre total de cellules identifiées avec Hoechst. Le nombre de cellules a été déterminé à l’aide d’un pipeline CellProfiler personnalisé, n = 6 par tension. Barre d’erreur : erreur type (axes x et y) de la moyenne. Cette figure est reproduite à partir de Brooks et al.13 avec autorisation. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66971/66971fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

<table><tbody><tr><td>Tube de centrifugation conique 15 mL</td><td>Thermo Scientific</td><td>339651</td><td></td></tr><tr><td>Hémocytomètre jetable à 2 puces</td><td>Bulldog Bio</td><td>DHC-N01</td><td></td></tr><tr><td>75 cm2 Flacon de culture tissulaire</td><td>fisherbrand</td><td>FB012937</td><td></td></tr><tr><td>A431 Cellules</td><td>ATCC</td><td>CRL-1555</td><td></td></tr><tr><td>Calcein AM</td><td>Invitrogen</td><td>C3099</td><td></td></tr><tr><td>Classe II Type A2 Armoire de biosécurité</td><td>Labgard</td><td>NU-543-600</td><td></td></tr><tr><td>Composants personnalisés</td><td>YangLab</td><td></td><td>https://github.com/YangLabUNL/PSEP-TEEI</td></tr><tr><td>Tube à centrifuger jetable (50 mL)</td><td>fisherbrand</td><td>05-539-6</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Sérum de veau fœtal</td><td>Gibco</td><td>A5670401</td><td></td></tr><tr><td>système d’aspiration de fluide</td><td>vacuubrand</td><td>20727403</td><td></td></tr><tr><td>HERACELL 240i</td><td>Thermo Scientific</td><td>51026331</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Thermo Scientific</td><td>62249</td><td></td></tr><tr><td>Plasma humain Fibronectine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>FIBRP-RO</td><td></td></tr><tr><td>Microscope à fluorescence inversée</td><td>Zeiss</td><td>491916-0001-000</td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé</td><td>Labomed</td><td>TCM 400</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>cytiva</td><td>SH30256.02</td><td></td></tr><tr><td>Tube PCR 200 & micro ; L</td><td>Sarstedt</td><td>72.737</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline / Streptomycine</td><td>Gibco</td><td>15140148</td><td></td></tr><tr><td>Pipette (0.2-2 &micro ; L)</td><td>fisherbrand Elite</td><td>FBE00002</td><td></td></tr><tr><td>Pipette (100-1000 & micro ; L)</td><td>fisherbrand Elite</td><td>FBE01000</td><td></td></tr><tr><td>Pipette (20-200 & micro ; L)</td><td>fisherbrand Elite</td><td>FBE00200</td><td></td></tr><tr><td>Pipette (2-20 & micro ; L)</td><td>fisherbrand Elite</td><td>FBE00020</td> Tube de réaction Invitrogen P1304MP <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td>à<td>l’iodure de propidium</td></tr><tr><td>1,5 mL</td><td>Sarstedt</td><td>72.690.300</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse Sorvall ST 16R</td><td>Thermo Scientific</td><td>75004240</td><td></td></tr><tr><td>Thincert (24 puits)</td><td>Greiner Bio-One</td><td>662 641</td><td>0,4 et micro ; M Diamètre des pores, 2x106 cm-2 densité des pores,</td></tr><tr><td>plaque de culture tissulaire en PET transparent (24 puits)</td><td>Fisherbrand</td><td>FB012929</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8154-20mL</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Gibco</td><td>15090046</td><td></td></tr></tbody></table>

Électroporation à base de substrat poreux avec surveillance de l’impédance électrique transépithéliale

Porous Substrate-Based Electroporation with Transepithelial Electrical Impedance Monitoring

Le protocole donné établit une méthode d’utilisation des mesures TEEI pour examiner les processus intermédiaires d’électroporation et faire des prédictions de livraison, en particulier pour la lignée cellulaire A431 et le fret PI. Bien que la modification de ce protocole soit abordée plus loin dans l’article, il est important de noter maintenant que même si les valeurs spécifiques peuvent changer, les tendances générales de la réponse restent constantes. Par exemple, les données TEEI qui descendent en dessous de la base de référence initiale correspondent à la mort cellulaire, tandis que l’augmentation maximale de la valeur TEEI au-dessus du minimum correspond à l’efficacité de livraison13. Ces tendances générales et leurs implications sont examinées ci-dessous.
Comme le montre la figure 2A, l’utilisation de la plateforme PSEP peut entraîner diverses tendances en matière de mesure et d’imagerie cellulaire. Le résultat idéal de ce protocole est de produire une courbe similaire aux données de santé optimisées montrées dans la figure 2Ai. Ceci est caractérisé comme le résultat idéal, car il n’y a pas de chute en dessous de la ligne de base, indiquant très peu, voire aucune, mort cellulaire. De plus, la courbe saine optimisée présente la plus forte augmentation de TEEI par rapport au minimum, indiquant un degré élevé d’efficacité de livraison13. Ces inférences sont étayées par l’imagerie post-PSEP de la monocouche cellulaire, qui révèle une mort cellulaire négligeable et une monocouche cellulaire saine et entièrement confluente (Figure 2Aiii). De plus, une expérience de livraison réussie utilisant des formes d’onde PSEP identiques peut être caractérisée par les images présentées à la figure 2B. L’application correcte de la forme d’onde d’électroporation et la concentration de la cargaison permettent d’obtenir un haut degré de cohérence de livraison et de viabilité de la cellule.
La santé et la confluence de la monocouche cellulaire sont essentielles à l’application réussie des prédictions de livraison basées sur l’TEEI16,17. Même avec une forme d’onde optimisée, une monocouche cellulaire malsaine ou incomplète entraîne une réponse TEEI diminuée, comme l’illustrent les données malsaines optimisées de la figure 2Aii. Cependant, notons que les images de ce résultat (Figure 2Avi) correspondent toujours à l’interprétation de la réponse TEEI donnée par Brooks et al.13. Il n’y a pas de creux en dessous de la ligne de base, indiquant une mort cellulaire proche de zéro (Figure 2C,D). De plus, l’augmentation réduite par rapport au minimum correspond à un impact négatif sur l’efficacité de l’administration, car moins de cellules dans la monocouche réduisent l’administration totale de PI (Figure 2C,D).
Si une forme d’onde non optimisée est appliquée, il est possible de voir des diminutions encore plus significatives de la réponse TEEI. En fonction de l’énergie totale et de la période dans laquelle elle est appliquée, des formes d’onde non optimisées peuvent produire des résultats allant d’une efficacité réduite à l’annihilation quasi totale de la monocouche cellulaire (Figure 2Ai,iii,v). Les courbes non optimisées et très non optimisées montrent une diminution significative par rapport à la ligne de base, indiquant une mort cellulaire importante. Cependant, des formes d’onde de moins en moins optimisées entravent la récupération des cellules, ce qui entraîne une diminution de l’efficacité de livraison.
L’efficacité de livraison a été calculée en divisant le nombre de cellules étiquetées dans les images PI et calcein des expériences de livraison par le nombre total de cellules identifiées avec Hoechst. La mort a été calculée en prenant les cellules marquées par PI dans les expériences de mesure TEEI et en divisant par le nombre total de cellules identifiées par Hoechst. Le nombre de cellules a été déterminé à l’aide d’un pipeline CellProfiler personnalisé pour les deux métriques.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66971/66971fig02.jpg"> Figure 2 : Courbes de réponse TEEI et imagerie pour les conditions courantes. (A) (i) Données de réponse TEEI illustrant le pourcentage de variation TEEI pour les conditions optimisées et non optimisées. (ii) Comparaison de la réponse TEEI entre des monocouches saines et malsaines dans des conditions de forme d’onde optimisées. iii à v) Imagerie représentative des résultats potentiels pour des conditions de forme d’onde optimisées et non optimisées montrant la mort cellulaire (rouge) et les cellules vivantes (vert). (vi) Imagerie représentative d’une monocouche malsaine après application de conditions de forme d’onde optimisées montrant la mort cellulaire (rouge) des cellules vivantes (vert). (B) Images montrant l’administration réussie de l’IP (rouge), les cellules vivantes (vert) et l’emplacement des noyaux (bleu). Toutes les images sont éclaircies pour plus de clarté. Barres d’échelle : 1000 μm. (C) Diminution de l’EIEO par rapport à la ligne de base pré-PSEP au minimum après PSEP et augmentation du minimum post-PSEP au pic post-PSEP pour des tensions données. (D) Efficacité de distribution et pourcentages de mort cellulaire pour des tensions données. Les barres d’erreur représentent le SEM (n = 6). (C,D) reproduit de Brooks et al.13 avec autorisation. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66971/66971fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

Porous substrate electroporation (PSEP) is an emerging method of electroporation that provides high throughput and consistent delivery. Like many other ...

porous-substrate-based-electroporation-with-transepithelial

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Modèle tissulaire tridimensionnel à haut débit pour la quantification des seuils d’électroporation

Ici, nous présentons un protocole pour fabriquer un dispositif microfluidique unique à deux couches pour étudier la régulation électromécanique de l’homéostasie du tissu épithélial. L’appareil applique des courants électriques physiologiques statiques perpendiculaires au plan tissulaire, ce qui a un impact sur l’adhésion, la prolifération et l’extrusion entre les cellules. L’imagerie de cellules vivantes et les mesures de contraintes mécaniques révèlent les mécanismes de ces processus.

Révéler le contrôle électromécanique de l’homéostasie tissulaire à l’aide d’un dispositif microfluidique à deux couches

Découvrez l'électroporation à base de substrat poreux avec surveillance de l'impédance électrique transépithéliale pour la biologie cellulaire. Cette méthode optimise la livraison intracellulaire tout en maintenant une haute viabilité cellulaire.

Électroporation à base de substrat poreux avec surveillance de l’impédance électrique transépithéliale

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