Name: Quantification de la respiration mitochondriale dans des cellules entières de levure (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Découvrez une technique de quantification de la respiration mitochondriale dans des cellules entières de levure. Cette méthode permet d'étudier les mécanismes bioénergétiques des polyphénols comme le resvératrol.

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<meta charset="utf8"></head><body>Mesure de la respiration mitochondriale de la levure tout en maintenant le contexte cellulaire

<ol><li>Jang, D. H., Seeger, S. C., Grady, M. E., Shofer, F. S., Eckmann, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+and+respiration+within+cells+with+increased+open+pore+cytoskeletal+meshes%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Open%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics and respiration within cells with increased open pore cytoskeletal meshes.</a> Biol Open. 6 (12), 1831-1839 (2017).</li>
<li>Duvezin-Caubet, S., Caron, M., Giraud, M. F., Velours, J., di Rago, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+two+rotor+components+of+yeast+mitochondrial+ATP+synthase+are+mechanically+coupled+by+subunit+delta%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">The two rotor components of yeast mitochondrial ATP synthase are mechanically coupled by subunit delta.</a> Proc Natl Acad Sci. 100 (23), 13235-13240 (2003).</li>
<li>Vakifahmetoglu-Norberg, H., Ouchida, A. T., Norberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+mitochondria+in+metabolism+and+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Comm%22%5BJournal%5D)">The role of mitochondria in metabolism and cell death.</a> Biochem Biophys Res Comm. 482 (3), 426-431 (2017).</li>
<li>Matus-Ortega, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+complexes+containing+the+internal+alternative+NADH+dehydrogenase+%28Ndi1%29+in+mitochondria+of+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Yeast%22%5BJournal%5D)">New complexes containing the internal alternative NADH dehydrogenase (Ndi1) in mitochondria of Saccharomyces cerevisiae.</a> Yeast. 32 (10), 629-641 (2015).</li>
<li>Avéret, N., Jobin, M. L., Devin, A., Rigoulet, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proton+pumping+complex+I+increases+growth+yield+in+Candida+utilis%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys%22%5BJournal%5D)">Proton pumping complex I increases growth yield in Candida utilis.</a> Biochim Biophys. 1847 (10), 1320-1326 (2015).</li>
<li>Schägger, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+chain+supercomplexes%5BTitle%5D)+AND+%22IUBMB+Life%22%5BJournal%5D)">Respiratory chain supercomplexes.</a> IUBMB Life. 52 (3-5), 119-128 (2001).</li>
<li>Lasserre, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yeast+as+a+system+for+modeling+mitochondrial+disease+mechanisms+and+discovering+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Yeast as a system for modeling mitochondrial disease mechanisms and discovering therapies.</a> Dis Model Mech. 8 (6), 509-526 (2015).</li>
<li>Turina, P., Samoray, D., Gräber, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((H%2B%2FATP+ratio+of+proton+transport-coupled+ATP+synthesis+and+hydrolysis+catalysed+by+CF0F1-liposomes%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">H+/ATP ratio of proton transport-coupled ATP synthesis and hydrolysis catalysed by CF0F1-liposomes.</a> EMBO J. 22 (3), 418-426 (2003).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+energy+metabolism+in+cultured+cells%2C+including+human+pluripotent+stem+cells+and+differentiated+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Prot%22%5BJournal%5D)">Measuring energy metabolism in cultured cells, including human pluripotent stem cells and differentiated cells.</a> Nat Prot. 7 (6), 1068-1085 (2012).</li>
<li>Kuznetsov, A. V., Javadov, S., Margreiter, R., Hagenbuchner, J., Ausserlechner, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+mitochondrial+function%2C+structure%2C+and+intracellular+organization+in+situ+in+cardiomyocytes+and+skeletal+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Analysis of mitochondrial function, structure, and intracellular organization in situ in cardiomyocytes and skeletal muscles.</a> Int J Mol Sci. 23 (4), 2252(2022).</li>
<li>Divakaruni, A. S., Jastroch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+for+the+analysis%2C+standardization+and+interpretation+of+oxygen+consumption+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">A practical guide for the analysis, standardization and interpretation of oxygen consumption measurements.</a> Nat Metab. 4 (8), 978-994 (2022).</li>
<li>Brand, M. D., Nicholls, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+mitochondrial+dysfunction+in+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Assessing mitochondrial dysfunction in cells.</a> Biochem J. 435 (2), 297-312 (2011).</li>
<li>Mookerjee, S. A., Gerencser, A. A., Nicholls, D. G., Brand, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+intracellular+rates+of+glycolytic+and+oxidative+ATP+production+and+consumption+using+extracellular+flux+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Quantifying intracellular rates of glycolytic and oxidative ATP production and consumption using extracellular flux measurements.</a> J Biol Chem. 292 (17), 7189-7207 (2017).</li>
<li>Rosenfeld, E., Beauvoit, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+non-respiratory+pathways+in+the+utilization+of+molecular+oxygen+by+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Yeast%22%5BJournal%5D)">Role of the non-respiratory pathways in the utilization of molecular oxygen by Saccharomyces cerevisiae.</a> Yeast. 20 (13), 1115-1144 (2003).</li>
<li>Granados-Arvizu, J. A., Canizal-García, M., Madrigal-Pérez, L. A., González-Hernández, J. C., Regalado-González, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+alternative+respiration+system+of+Scheffersomyces+stipitis+and+effect+on+glucose+or+xylose+fermentation%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Yeast+Res%22%5BJournal%5D)">Inhibition of alternative respiration system of Scheffersomyces stipitis and effect on glucose or xylose fermentation.</a> FEMS Yeast Res. 21 (2), foab005(2021).</li>
<li>Carrillo-Garmendia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Snf1p%2FHxk2p%2FMig1p+pathway+regulates+hexose+transporters+transcript+levels%2C+affecting+the+exponential+growth+and+mitochondrial+respiration+of+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Fungal+Genet+Biol%22%5BJournal%5D)">Snf1p/Hxk2p/Mig1p pathway regulates hexose transporters transcript levels, affecting the exponential growth and mitochondrial respiration of Saccharomyces cerevisiae.</a> Fungal Genet Biol. 161, 103701(2022).</li>
<li>Maslanka, R., Zadrag-Tecza, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+potential+of+yeast+cells+depends+on+overall+action+of+interconnected+changes+in+central+carbon+metabolism%2C+cellular+biosynthetic+capacity%2C+and+proteostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Reproductive potential of yeast cells depends on overall action of interconnected changes in central carbon metabolism, cellular biosynthetic capacity, and proteostasis.</a> Int J Mol Sci. 21 (19), 7313(2020).</li>
<li>Olivares-Marin, I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+between+carbon+and+nitrogen+sources+depend+on+RIM15+and+determine+fermentative+or+respiratory+growth+in+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Interactions between carbon and nitrogen sources depend on RIM15 and determine fermentative or respiratory growth in Saccharomyces cerevisiae.</a> Appl Microbiol Biotechnol. 102 (10), 4535-4548 (2018).</li>
<li>Malecki, M., Kamrad, S., Ralser, M., Bähler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+respiration+is+required+to+provide+amino+acids+during+fermentative+proliferation+of+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Rep%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial respiration is required to provide amino acids during fermentative proliferation of fission yeast.</a> EMBO Rep. 21 (11), e50845(2020).</li>
<li>Carrillo-Garmendia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxicity+of+quercetin+is+related+to+mitochondrial+respiration+impairment+in+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Yeast%22%5BJournal%5D)">Cytotoxicity of quercetin is related to mitochondrial respiration impairment in Saccharomyces cerevisiae.</a> Yeast. 39 (11-12), 617-628 (2022).</li>
<li>Hagman, A., Sall, T., Piskur, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+yeast+short-term+Crabtree+effect+and+its+origin%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Analysis of the yeast short-term Crabtree effect and its origin.</a> FEBS J. 281 (21), 4805-4814 (2014).</li>
<li>Gancedo, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yeast+carbon+catabolite+repression%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol+Mol+Biol+Rev%22%5BJournal%5D)">Yeast carbon catabolite repression.</a> Microbiol Mol Biol Rev. 62 (2), 334-361 (1998).</li>
<li>Katzmann, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+an+ATP-binding+cassette+transporter-encoding+gene+%28YOR1%29+is+required+for+oligomycin+resistance+in+Saccharomyces+cerevisiae%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Expression of an ATP-binding cassette transporter-encoding gene (YOR1) is required for oligomycin resistance in Saccharomyces cerevisiae.</a> Mol Cell Biol. 15 (12), 6875-6883 (1995).</li>
<li>Madrigal-Perez, L. A., Nava, G. M., Gonzalez-Hernandez, J. C., Ramos-Gomez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resveratrol+increases+glycolytic+flux+in+Saccharomyces+cerevisiae+via+a+SNF1-dependet+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bioenerr+Biomemb%22%5BJournal%5D)">Resveratrol increases glycolytic flux in Saccharomyces cerevisiae via a SNF1-dependet mechanism.</a> J Bioenerr Biomemb. 47 (4), 331-336 (2015).</li>
<li>Gueguen, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resveratrol+directly+binds+to+mitochondrial+complex+I+and+increases+oxidative+stress+in+brain+mitochondria+of+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Resveratrol directly binds to mitochondrial complex I and increases oxidative stress in brain mitochondria of aged mice.</a> PloS One. 10 (12), e0144290(2015).</li>
<li>Lagoa, R., Graziani, I., Lopez-Sanchez, C., Garcia-Martinez, V., Gutierrez-Merino, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+I+and+cytochrome+c+are+molecular+targets+of+flavonoids+that+inhibit+hydrogen+peroxide+production+by+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Complex I and cytochrome c are molecular targets of flavonoids that inhibit hydrogen peroxide production by mitochondria.</a> Biochim Biophys Acta. 1807 (12), 1562-1572 (2011).</li>
<li>de Oliveira, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin+and+the+mitochondria%3A+A+mechanistic+view%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Adv%22%5BJournal%5D)">Quercetin and the mitochondria: A mechanistic view.</a> Biotechnol Adv. 34 (5), 532-549 (2016).</li>
<li>Carrillo-Garmendia, A., Madrigal-Perez, L. A., Regalado-Gonzalez, C. The multifaceted role of quercetin derived from its mitochondrial mechanism. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCarrillo-Garmendia%2C+A+%22Mol+Cell+Biochem%22">Mol Cell Biochem</a>. , (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2- thénoyltrifluoroacétone (TTFA)</td><td>Merck</td><td>T27006</td><td>Complexe inhibiteur</td></tr><tr><td>II 3-chlorophénylhydrazone cyanure carbonyle (CCCP)</td><td>Merck</td><td>C2759</td><td>Découpleur de la respiration mitochondriale&nbsp ; &nbsp ;</td></tr><tr><td>Absolut ethanol</td><td>Merck</td><td>107017</td><td>Pour dissoudre la quercétine</td></tr><tr><td>Agar</td><td>Merck</td><td>A1296</td><td>Préparation de gélose YPD</td></tr><tr><td>Sulfate d’ammonium granulaire (NH4)2SO4</td><td>J.T. Baker</td><td>0792-05 Préparation de</td><td>bouillon SC</td></tr><tr><td>Antimycine A (AA)</td><td>Merck</td><td>A8674</td><td>Complexe inhibiteur III</td></tr><tr><td>aYSI5300A</td><td>----</td><td>----</td><td>Monitor&nbsp ;</td></tr><tr><td>Centrifugeuse</td><td>Hermle</td><td>Z 206 A</td><td>Pour la centrifugation des cellules</td></tr><tr><td>Oxygène de type Clark</td><td>--------</td><td></td><td>électrode&nbsp ;</td></tr><tr><td>Ordinateur</td><td>----</td><td>----</td><td>Pour l’acquisition de données&nbsp ;</td></tr><tr><td>Phosphate dipotassique K2HPO4</td><td>J.T. Baker</td><td>3252-05</td><td>SC préparation du bouillon</td></tr><tr><td>Glucose</td><td>Merck</td><td>G7021</td><td>Préparation du bouillon YPD</td></tr><tr><td>Glycérol</td><td>Merck</td><td>G5516</td><td>Supplémentation en milieu de substrat&nbsp ;</td></tr><tr><td>Lactate</td><td>Merck</td><td>L1250</td><td>Supplémentation en milieu de substrat&nbsp ;</td></tr><tr><td>Oligomycine à partir de Streptomyces diastatochromogenes</td><td>Merck</td><td>O4876</td><td>Inhibition de l’ATP synthase mitochondriale</td></tr><tr><td>Agitateur orbital</td><td>Thermo Fisher</td><td>SHKE6000</td><td>Inoculum Incubation en verre Tubes et flacons</td></tr><tr><td>Peptone de caséine, digestat enzymatique</td><td>Merck</td><td>82303</td><td>YPD préparation de bouillon</td></tr><tr><td>Quercétine&nbsp ;</td><td>Merck</td><td>337951</td><td>Pour diminuer la respiration mitochondriale</td></tr><tr><td>Uracil&nbsp ;</td>Préparation de bouillon <td>Merck</td><td>U0750</td><td>SC</td></tr><tr><td>Extrait de levure</td> Préparation de bouillon <td>Merck</td><td>Y1625</td><td>YPD</td></tr><tr><td>Base d’azote de levure sans acides aminés ni sulfate d’ammonium</td> Préparation de bouillon <td>Merck</td><td>Y1251</td><td>SC</td></tr><tr><td>Levure synthétique Suppléments de milieu de chute sans uracile</td> Préparation de bouillon <td>Merck</td><td>Y1501</td><td>SC</td></tr></tbody></table>

quantification de la respiration mitochondriale dans des cellules entières de levure

Mitochondrial Respiration Quantification in Yeast Whole Cells

Cette technique de respiration mitochondriale peut être utilisée pour des espèces de levures autres que S. cerevisiae, telles que Scheffersomyces stipitis15 et K. marxianus16. Cependant, à des fins représentatives, nous ne présentons que les résultats de S. cerevisiae. Il est bien connu que S. cerevisiae présente un métabolisme respiratoire prédominant à de faibles concentrations de glucose (inférieures à 0,8 mM)17,18. Ainsi, pour corroborer le phénotype respiratoire de S. cerevisiae, il a été cultivé en deux concentrations de glucose pour stimuler (0,5 % de glucose) et limiter (5 % de glucose) la respiration mitochondriale18,19. Comme prévu, les résultats obtenus dans la respiration basale (substrat oxydable), la respiration liée à l’ATP (oligomycine) et la capacité respiratoire maximale (CCCP) valident le métabolisme énergétique caractéristique de S. cerevisiae (Figure 2). Nous avons observé des valeurs plus élevées de consommation d’oxygène (respiration basale, respiration liée à l’ATP et capacité respiratoire maximale) dans les cellules cultivées avec 0,5 % de glucose par rapport aux valeurs obtenues dans les cellules cultivées avec 5 % de glucose (Figure 2).
De plus, les tests ont utilisé trois substrats : le glucose, le glycérol et le L-lactate. L’objectif de l’utilisation de substrats divers est d’évaluer différentes parties de la chaîne respiratoire mitochondriale. Dans ces conditions, la respiration mitochondriale n’a pas montré de changements significatifs dépendants du substrat puisqu’aucun traitement pour perturber la chaîne respiratoire n’a été ajouté (Figure 2).
Nous avons utilisé la quercétine pour évaluer la capacité de la technique, un composé qui influence négativement la respiration mitochondriale20. Les données obtenues ont montré que la quercétine diminuait significativement la respiration mitochondriale dans les cellules cultivées dans des milieux supplémentés en glucose à 0,5 % (Figure 3). D’autre part, les cellules cultivées dans des milieux supplémentés en glucose à 5 % n’ont pas présenté d’influence négative significative de la quercétine (Figure 4).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67186/67186fig01.jpg"> 
Figure 1 : Courbe représentative de consommation d’oxygène. Courbe de consommation d’oxygène obtenue dans des cellules de S. cerevisiae cultivées dans des milieux SC (0,5 % de glucose). Les couleurs représentent les différentes pentes obtenues au niveau du substrat, des découpleurs et de la supplémentation en inhibiteurs. Vert : Le substrat a utilisé du glucose et une respiration basale correspondant à la pente. Bleu : oligomycine, inhibiteur de l’ATP synthase, pente utilisée pour la détermination de la respiration liée à l’ATP. Jaune : CCCP, découpleur, pente utilisée pour évaluer la respiration maximale. Gris et rouge : complexe inhibiteur II et III, respectivement ; Pente utilisée pour déterminer la consommation d’oxygène ne dépendant pas des mitochondries. Abréviations : CCCP = cyanure de carbonyle de 3-chlorophénylhydrazone ; TTFA = 2-thénoyltrifluoroacétone ; AA = antimycine A. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67186/67186fig01large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67186/67186fig02.jpg"> 
Figure 2 : Dosages de consommation d’oxygène dans des cellules de S. cerevisiae cultivées à 0,5 % et 5 % de glucose. La respiration mitochondriale est évaluée à l’aide de la consommation d’oxygène mesurée au niveau de la respiration basale, de la capacité respiratoire maximale et de la respiration liée à l’ATP dans les cellules de S. cerevisiae cultivées en SC supplémentées en glucose à 0,5 % et 5 %. Trois substrats ont été utilisés pour évaluer leur influence spécifique sur la chaîne de transport d’électrons : le glucose (NADH déshydrogénases), le glycérol (pool d’ubiquinone) et le L-lactate (cytochrome c). (A) Respiration basale à 5 % et 0,5 % de glucose avec du glucose, du glycérol et du L-lactate comme substrats ; (B) respiration maximale à 5 % et 0,5 % de glucose avec du glucose, du glycérol et du L-lactate comme substrats ; (C) Respiration liée à l’ATP à 5 % et 0,5 % de glucose avec du glucose, du glycérol et du L-lactate comme substrat. Les résultats sont présentés sous forme de ± moyenne écart-type à partir de trois expériences indépendantes, chaque expérience comportant deux répétitions techniques. ANOVA à un facteur suivie du test de Tukey (p ≤ 0,05 ; lettres différentes : différence significative, mêmes lettres : pas de différence significative) pour l’analyse statistique. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67186/67186fig02large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67186/67186fig03_.jpg"> 
Figure 3 : Respiration mitochondriale limitée par la quercétine à faible concentration de glucose dans les cellules de S. cerevisiae cultivées. La mesure de la consommation d’oxygène a été effectuée au niveau de la respiration basale, de la capacité respiratoire maximale et de la respiration liée à l’ATP dans des cellules de S. cerevisiae cultivées dans des milieux SC (0,5 % de glucose) supplémentés en quercétine (100 μM). De l’éthanol a été utilisé pour dissoudre la solution de quercétine. Les résultats sont présentés sous forme de ± moyenne écart-type à partir de trois expériences indépendantes, chaque expérience comportant deux répétitions techniques. Des analyses statistiques ont été effectuées à l’aide d’un test t de Student apparié (*, ** p ≤ 0,05). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67186/67186fig03_large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67186/67186fig04_.jpg"> 
Figure 4 : La quercétine n’affecte pas la respiration mitochondriale à forte concentration de glucose chez S. cerevisiae. La consommation d’oxygène a été mesurée au niveau de la respiration basale, de la capacité respiratoire maximale et de la respiration liée à l’ATP dans des cellules de S. cerevisiae cultivées dans des milieux SC (5 % de glucose) supplémentés en quercétine (100 μM). L’éthanol est utilisé pour dissoudre la solution de quercétine. Les résultats montrent une ± moyenne de l’écart-type à partir de trois expériences indépendantes, chacune avec deux répétitions techniques. Des analyses statistiques ont été effectuées à l’aide du test t de Student apparié (p ≤ 0,05 ; ns : non significatif). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67186/67186fig04_large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>

Quantification de la respiration mitochondriale dans des cellules entières de levure

Metabolism is mainly coordinated by cellular energy availability and environmental conditions. Assays for knowing how cells adapt energetic metabolism to ...

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