Name: Modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3D - une approche de fabrication d’un système d’organe sur puce vasculaire (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-16T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 12 s
Description: Découvrez la modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3D. Cette méthode permet d'étudier les réponses vasculaires et les stratégies thérapeutiques ciblant la santé du glycocalyx.

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<ol><li>Sharma, S., Beshara, M., Bora, V. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSharma%2C+S+%22Pneumonectomy%22">Pneumonectomy</a>. , StatPearls Publishing LLC. (2024).</li>
<li>Grapatsas, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pneumonectomy+for+primary+lung+tumors+and+pulmonary+metastases%3A+a+comprehensive+study+of+postoperative+morbidity%2C+early+mortality%2C+and+preoperative+clinical+prognostic+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Pneumonectomy for primary lung tumors and pulmonary metastases: a comprehensive study of postoperative morbidity, early mortality, and preoperative clinical prognostic factors.</a> Curr. Oncol. 30 (11), 9458-9474 (2023).</li>
<li>Lucas, G. F. N., James, M. I., David, R. J., Victor, E. L. Chapter 24. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLucas%2C+GFN+%22Topics+in+thoracic+surgery%22">Topics in thoracic surgery</a>. Guerreiro Cardoso, P. F. , IntechOpen. (2012).</li>
<li>Sentenac, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+after+pneumonectomy%3A+a+preclinical+model+in+rats+and+human+pulmonary+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Cardiothorac.+Surg%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension after pneumonectomy: a preclinical model in rats and human pulmonary endothelial cells.</a> Eur. J. Cardiothorac. Surg. 59 (1), 147-154 (2020).</li>
<li>Russo, T. A., Banuth, A. M. M., Nader, H. B., Dreyfuss, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+shear+stress+on+endothelial+cells+leads+to+remodeling+of+extracellular+matrix+and+induction+of+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Altered shear stress on endothelial cells leads to remodeling of extracellular matrix and induction of angiogenesis.</a> PLoS One. 15 (11), e0241040(2020).</li>
<li>Milusev, A., Rieben, R., Sorvillo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelial+glycocalyx%3A+a+possible+therapeutic+target+in+cardiovascular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cardiovasc.+Med%22%5BJournal%5D)">The endothelial glycocalyx: a possible therapeutic target in cardiovascular disorders.</a> Front. Cardiovasc. Med. 9, e897087(2022).</li>
<li>Vittum, Z., Cocchiaro, S., Mensah, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basal+endothelial+glycocalyx%27s+response+to+shear+stress%3A+a+review+of+structure%2C+function%2C+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Basal endothelial glycocalyx's response to shear stress: a review of structure, function, and clinical implications.</a> Front. Cell Dev. Biol. 12, e1371769(2024).</li>
<li>Villalba, N., Baby, S., Yuan, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelial+glycocalyx+as+a+double-edged+sword+in+microvascular+homeostasis+and+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The endothelial glycocalyx as a double-edged sword in microvascular homeostasis and pathogenesis.</a> Front. Cell Dev. Biol. 9, e711003(2021).</li>
<li>Harding, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+reinforcement+relies+on+flow-regulated+glycocalyx%2C+a+potential+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Biorheology%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier reinforcement relies on flow-regulated glycocalyx, a potential therapeutic target.</a> Biorheology. 56 (2-3), 131-149 (2019).</li>
<li>Alphonsus, C. S., Rodseth, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelial+glycocalyx%3A+a+review+of+the+vascular+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">The endothelial glycocalyx: a review of the vascular barrier.</a> Anaesthesia. 69 (7), 777-784 (2014).</li>
<li>Möckl, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+the+mammalian+glycocalyx+in+functional+membrane+organization+and+immune+system+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The emerging role of the mammalian glycocalyx in functional membrane organization and immune system regulation.</a> Front. Cell Dev. Biol. 8, e00253(2020).</li>
<li>Nian, K., Harding, I. C., Herman, I. M., Ebong, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood-brain+barrier+damage+in+ischemic+stroke+and+its+regulation+by+endothelial+mechanotransduction%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blood-brain barrier damage in ischemic stroke and its regulation by endothelial mechanotransduction.</a> Front. Physiol. 11, 605398(2020).</li>
<li>Dietz, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+postpneumonectomy+pulmonary+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Cardiothorac.+Vasc.+Anesth%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of postpneumonectomy pulmonary edema.</a> Semin. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 4 (1), 31-35 (2000).</li>
<li>Bozlar, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+artery+diameters+measured+by+multidetector-row+computed+tomography+in+healthy+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Radiol%22%5BJournal%5D)">Pulmonary artery diameters measured by multidetector-row computed tomography in healthy adults.</a> Acta Radiol. 48 (10), 1086-1091 (2007).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Kataoka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+imaging+of+endothelial+glycocalyx+layer+with+wheat+germ+agglutinin+using+intravital+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc.+Res.+Tech%22%5BJournal%5D)">Fluorescent imaging of endothelial glycocalyx layer with wheat germ agglutinin using intravital microscopy.</a> Microsc. Res. Tech. 79, 31-37 (2016).</li>
<li>Wood, K. M., Stone, G. M., Peppas, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wheat+germ+agglutinin+functionalized+complexation+hydrogels+for+oral+insulin+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Wheat germ agglutinin functionalized complexation hydrogels for oral insulin delivery.</a> Biomacromolecules. 9 (4), 1293-1298 (2008).</li>
<li>Tarnowski, B. I., Spinale, F. G., Nicholson, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DAPI+as+a+useful+stain+for+nuclear+quantitation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotech.+Histochem%22%5BJournal%5D)">DAPI as a useful stain for nuclear quantitation.</a> Biotech. Histochem. 66 (6), 297-302 (1991).</li>
<li>Emde, B., Heinen, A., Gödecke, A., Bottermann, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wheat+germ+agglutinin+staining+as+a+suitable+method+for+detection+and+quantification+of+fibrosis+in+cardiac+tissue+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Histochem%22%5BJournal%5D)">Wheat germ agglutinin staining as a suitable method for detection and quantification of fibrosis in cardiac tissue after myocardial infarction.</a> Eur. J. Histochem. 58 (4), 2448(2014).</li>
<li>Hu, Z., Cano, I., D'Amore, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+the+role+of+the+endothelial+glycocalyx+in+angiogenesis+and+vascular+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Cell+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Update on the role of the endothelial glycocalyx in angiogenesis and vascular inflammation.</a> Front. Cell Dev. Biol. 9, e734276(2021).</li>
<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Funct.+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J. Funct. Biomater. 14 (10), e14100497(2023).</li>
<li>Fallon, M. E., Mathews, R., Hinds, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+flow+chamber+design+for+the+study+of+endothelial+cell+%28patho%29physiology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomech.+Eng%22%5BJournal%5D)">In vitro flow chamber design for the study of endothelial cell (patho)physiology.</a> J. Biomech. Eng. 144 (2), e4051765(2021).</li>
<li>Basehore, S., Garcia, J., Clyne, A. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBasehore%2C+S+%22The+science%2C+etiology+and+mechanobiology+of+diabetes+and+its+complications%22">The science, etiology and mechanobiology of diabetes and its complications</a>. Gefen, A. , Acad. Press. 291-312 (2021).</li>
</ol>

Une pneumonectomie est une intervention chirurgicale invasive et à haut risque réalisée pour extraire le poumon droit ou gauche1. Cette procédure est généralement utilisée comme option de traitement pour diverses affections graves telles que le cancer du poumon, la tuberculose pulmonaire et les lésions pulmonaires traumatiques2. Bien que la procédure soit prometteuse, elle présente des risques importants, mis en évidence par des taux accrus de complications postopératoires allant des arythmies aux œdèmes pulmonaires1.
Les pneumonectomies ont un impact profond sur la dynamique cardiovasculaire en dirigeant l’ensemble du débit cardiaque du cœur vers le poumon restant3. Cette redirection du flux sanguin est connue pour augmenter les contraintes de pression et de cisaillement dans le système vasculaire pulmonaire restant4. Avec ces vastes altérations des schémas de flux sanguins, le glycocalyx endothélial (GCX) joue un rôle central dans la détection de ces changements dans les schémas de flux sanguin5.
Le GCX est une couche semblable à un gel qui régule les activités biochimiques en réponse aux changements de son environnement 6,7. Il a été démontré que son expression augmente avec une exposition prolongée à un écoulement uniforme et diminue avec l’exposition à un écoulement perturbé par rapport à la culture statique 8,9. Le GCX présente une épaisseur variable allant de 0,1 à 1 μm sur l’ensemble du système vasculaire et fonctionne comme une couche essentielle de mécanotransduction recouvrant les cellules endothéliales des vaisseaux sanguins10. Le réseau est composé d’une couche dense de sucres, de lipides et de protéines, comme le montre la figure 1. Ces sucres se lient pour former des glycanes, qui peuvent exister soit librement dans la circulation sanguine, soit attachés à des protéines ou à des lipides, entraînant la formation de protéoglycanes, de glycoprotéines ou de glycolipides 7,11. Les protéoglycanes sont composés de chaînes de glycosaminoglycanes (GAG), qui se lient à la membrane cellulaire par l’intermédiaire de protéines plasmatiques ou de récepteurs. Ces GAG comprennent le sulfate d’héparane (HS), l’acide hyaluronique (HA), le sulfate de chondroïtine (CS), le sulfate de dermatane et le sulfate de kératan12. Le sulfate d’héparane est le GAG prédominant, représentant plus de 50 % du total des GAG trouvés dans le GCX. Ces chaînes latérales peuvent se fixer à des protéines centrales intégrées, qui comprennent des glypicanes (ancrés par le glycosylphosphatidylinositol) et des syndéciques (avec un domaine couvrant la membrane), ainsi que CD44 (un récepteur d’adhésion de surface). Les complexes décrits ci-dessus jouent un rôle crucial dans la régulation des facteurs de croissance, les réactions anti-inflammatoires, la facilitation de la dilatation des vaisseaux et le contrôle de la perméabilité vasculaire13.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67246/67246fig1v2.jpg"> 
Figure 1 : Schéma des composants GCX. Schéma représentant les composants du glycocalyx endothélial. Ce schéma montre le glycocalyx apical, qui se trouve sur la lumière du vaisseau, montrant ses protéoglycanes et glycoprotéines liés à la membrane. Créé avec BioRender.com <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67246/67246fig1v2large.jpg" target="_blank">Cliquez ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
Bien que le lien précis entre les pneumonectomies et les lésions de la GCX ne soit pas bien étudié, il existe une corrélation plausible entre la modification du flux sanguin induite par les pneumonectomies et l’intégrité de la GCX. La perturbation du flux sanguin dans le système vasculaire est connue pour infliger des dommages au GCX6. Nous avons émis l’hypothèse que l’augmentation de l’écoulement perturbé et les changements dans la contrainte de cisaillement dans le système vasculaire restant après une pneumonectomie peuvent infliger des dommages au GCX au fil du temps. Cette détérioration accélérée peut catalyser les complications et les morbidités postopératoires, augmentant ainsi les risques inhérents pour la santé globale du patient13.
Ce protocole visait à modéliser la vascularisation pulmonaire après pneumonectomie, en suivant la procédure générale décrite à la figure 2. Des simulations de fluides ont été réalisées sur un modèle de conception assistée par ordinateur reproduisant le système vasculaire pulmonaire humain avec et sans pneumonectomie. Les modèles de pneumonectomie ont été créés en concevant des systèmes vasculaires pulmonaires en 3D dans un logiciel de modélisation 3D, sur la base de dimensions dérivées de tomodensitogrammes et de données de la littérature, puis en les simplifiant davantage pour les simulations d’écoulement dans un logiciel de dynamique des fluides numérique (CFD). Les simulations ont permis d’identifier des zones d’intérêt spécifiques, choisies par des zones où la contrainte de cisaillement était accrue dans les modèles de pneumonectomie par rapport au témoin. Ces zones d’intérêt ont été choisies pour être reproduites dans le cadre de la construction d’un modèle in vitro . Le modèle in vitro a utilisé une conception de chambre fluidique pour simuler plusieurs sections de système vasculaire avec une géométrie normale et une géométrie de pneumonectomie pour simuler la différence dans les conditions d’écoulement.
Des cellules endothéliales microvasculaires pulmonaires humaines (HLMVEC) ont été cultivées sur des substrats de polydiméthylsiloxane (PDMS) enrobés de fibronectine, façonnés pour imiter une région de bifurcation sélectionnée. Un milieu de culture de cellules endothéliales microvasculaires a été perfusé à travers le système à l’aide d’une pompe péristaltique. Enfin, les cellules et GCX ont été fixées, immunomarquées avec un anticorps de coloration GCX et visualisées à l’aide d’un microscope fluorescent pour évaluer leur état après exposition à un écoulement de fluide. Une chronologie générale du protocole se trouve dans le tableau 1.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67246/67246fig2.jpg"> 
Figure 2 : Séquence de développement OOC. Séquence de développement d’un nouveau système OOC pour étudier les effets de la pneumonectomie pulmonaire (1) TDM générée sur le système vasculaire pulmonaire humain. (2) Géométrie de tomodensitométrie utilisée pour identifier les régions d’intérêt pour le modèle CAO 3D. (3) Simulations d’écoulement de fluides pour déterminer des géométries d’intérêt pour un modèle in vitro. (4) Moule PDMS modélisé contenant des zones d’intérêt à partir des résultats de simulation (5) Moule inséré dans un boîtier en acrylique pour fixer le moule pour la perfusion (6) Configuration complète de la chambre d’écoulement (7) Configuration complète de la chambre d’écoulement transférée dans l’incubateur (8) Images en fond clair et fluorescentes prises après exposition à la contrainte de cisaillement. Créé avec BioRender.com <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67246/67246fig2large.jpg" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.</a>
Tableau 1 : Chronologie générale du protocole. Séquence d’exécution des étapes dans le protocole avec la durée moyenne (h) de chaque étape. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67246/Table%201.xlsx" target="_blank">Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.</a>

<table><tbody><tr><td>#8-32 x 3/4 po Vis à métaux zinguée à tête ronde combo (paquet de 8)</td><td>Everbilt</td><td>204274613</td><td>-</td></tr><tr><td>0,25 % EDTA-trypsine</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>25200056</td><td>-</td></tr><tr><td>Tubes à centrifuger coniques stériles en polypropylène de 15 ml</td><td>Thermo Scientific</td><td>12-565-269</td><td>-</td></tr><tr><td>Antenne parabolique 35x10mm, Nunclon Delta</td><td>Thermo Scientific</td><td>153066</td><td>-</td></tr><tr><td>Tubes à centrifuger coniques stériles en polypropylène de 50 ml</td><td>Thermo Scientific</td><td>12-565-271</td><td>-</td></tr><tr><td>Bouchons en caoutchouc assortis</td><td>Fisherbrand</td><td>14-132</td><td></td></tr><tr><td>Fioles traitées pour la culture cellulaire BioLite (25cm^2)</td><td>Thermo Scientific</td><td>12-556-009</td><td>-</td></tr><tr><td>Fioles traitées à la culture cellulaire BioLite (75cm^2)</td><td>Thermo Scientific</td><td>12-556-010</td><td>-</td></tr><tr><td>COMSOL Multiphysique</td><td>COMSOL</td><td>N/A</td><td>-</td></tr><tr><td>Adhésif double face&nbsp ;</td><td>3M</td><td>16758005</td><td>-</td></tr><tr><td>Epredia Richard-Allan Scientific Cover Glass&nbsp ;</td><td>Thermo Scientific</td><td>22-050-218</td><td>-</td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp ;</td><td>A5256701</td><td>-</td></tr><tr><td>Fibronectine</td><td>ThermoFisher Scientific&nbsp ;</td><td>33016015</td><td>20 &mu ; Dilution en g/mL</td></tr><tr><td>Fisherbrand Bains-marie à commande numérique Isotemp : modèle 210</td><td>Fisherbrand</td><td>15-462-10Q</td><td>-</td></tr><tr><td>Fisherbrand Seringue stérile (60 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>14-955-461</td><td>-</td></tr><tr><td>Cellules endothéliales microvasculaires du poumon humain</td><td>Sigma Aldrich</td><td>540-05A&nbsp ;</td><td>-</td></tr><tr><td>Keyence BZX810 Fluorescent Microscope</td><td>Cléence</td><td>N/A</td><td>-</td></tr><tr><td>Krayden Dow Sylgard 184 Kit d’élastomètre en silicone. Transparent, (1,1 LB)</td><td>Dow</td><td>4019862</td><td>-</td></tr><tr><td>Marga Cipta feuille d’acrylique coulée 1/2' d’épaisseur, 48x96'</td><td>Marga Cipta</td><td>N/A</td><td>-</td></tr><tr><td>Tête de pompe Masterflex L/S Easy-Load II</td><td>MasterFlex</td><td>77200-50</td><td></td></tr><tr><td>Tube de pompe de précision Masterflex L/S, silicone durci au platine, L/S 16 ; 25 pieds</td><td>MasterFlex</td><td>96410-16</td><td>-</td></tr><tr><td>Pompe péristaltique standard Masterflex L/S</td><td>Masterflex</td><td>07522-20</td><td></td></tr><tr><td>Micropipette 0,2 à 2 &mu ; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE00002</td><td>-</td></tr><tr><td>Micropipette 10 à 100 &mu ; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE00100</td><td>-</td></tr><tr><td>Micropipette 100 à 1000 &mu ; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE01000</td><td>-</td></tr><tr><td>Micropipette 5 à 50 &mu ; L</td><td>Fisherbrand</td><td>FBE00050</td><td>-</td></tr><tr><td>Milieu de croissance des cellules endothéliales microvasculaires (500ml)</td><td>Sigma - Aldrich</td><td>111-500</td><td>-</td></tr><tr><td>Nalgene Filtres à seringue stériles</td><td>Thermo Scientific</td><td>725-2520</td><td>-</td></tr><tr><td>Nikon Eclipse TS-100 Fluorescent Microscope</td><td>Nikon</td><td>NI-TS100</td><td></td></tr><tr><td>Solution saline tamponnée au phosphate (DPBS, 10X), formule de Dulbecco</td><td>Thermo Scientific</td><td>J61917. K3</td><td>-</td></tr><tr><td>Prusament PLA Prusa Galaxy Noir 1kg</td><td>Prusa</td><td>PRM-PLA-GLX-1000</td><td>-</td></tr><tr><td>Microscope hybride rebelle, droit et inversé, découvrez Echo</td><td>ÉCHO</td><td>76376-746</td><td>-</td></tr><tr><td>Mastic silicone&nbsp ;</td><td>Loctite</td><td>908570</td><td>-</td></tr><tr><td>SolidWorks (en anglais)</td><td>Dassault Systèmes</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Pipettes sérologiques jetables en polystyrène stérile avec bande de loupe (10 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11F</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipettes sérologiques jetables stériles en polystyrène avec bande de loupe (25 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipettes sérologiques jetables stériles en polystyrène avec bande de loupe (50 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11F</td><td>-</td></tr><tr><td>Pipettes sérologiques jetables stériles en polystyrène avec bande de loupe (5 ml)</td><td>Fisherbrand</td><td>13-678-11D</td><td>-</td></tr><tr><td>Streptavidine, conjugué Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen&nbsp ;</td><td>Réf. S32354</td><td></td></tr><tr><td>Streptavidine, conjugué Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>Réf. S32354</td><td>-</td></tr><tr><td>Seringue resevoir&nbsp ;</td><td>BD</td><td>300865</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Scientific Alfa Aesar 1LT Albumine, bovin, fraction V, 35 % soln., qualité réactif, sans acide gras, avec azoture comme conservati</td><td>Thermo Scientific</td><td>N12H004</td><td>-</td></tr><tr><td>Connecteurs de tubes</td><td>Fisherbrand</td><td>01-000-161</td><td>-</td></tr><tr><td>Milieu de montage anti-effacement VECTASHIELD avec DAPI&nbsp ;</td><td>Bouclier de Vecta</td><td>N° H-1200-10</td><td>-</td></tr><tr><td>Incubateur CO2 à chemise d’eau VWR</td><td>Avantar&nbsp ;</td><td>10810-744 ;</td><td>-</td></tr><tr><td>Anticorps biotinylé WGA</td><td>Vecteur</td><td>Réf. B-1025</td><td>-</td></tr></tbody></table>

modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3d - une approche de fabrication d’un système d’organe sur puce vasculaire

Modeling the Endothelial Glycocalyx Post-Pneumonectomy in a 3D Fluidic Chip - An Approach to Fabricating a Vascular-based Organ-on-Chip System

Les résultats de l’étude de simulation de fluide à écoulement laminaire à l’état stationnaire ont montré une augmentation de la contrainte de cisaillement dans certaines bifurcations dans les modèles de pneumonectomie par rapport au modèle témoin, illustré à la figure 11. Visualisées à l’étape 2.8 du protocole, les zones rouges indiquent les zones de forte contrainte de cisaillement, tandis que les zones bleues montrent les zones de faible contrainte de cisaillement.
<p class="jove_conte...

Modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3D - une approche de fabrication d’un système d’organe sur puce vasculaire

Endothelial glycocalyx (GCX), a carbohydrate-rich layer coating the luminal surface of endothelial cells, plays a pivotal role in regulating cellular ...

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JoVE Journal

Bioengineering

Bioingénierie

Chambres d'écoulement microfluidiques gravés par photolithographie et fabriqué à partir de PDMS sont appliqués à sonder les résultats fonctionnels associés à une dysfonction CE et de l'inflammation. Dans une expérience représentative, la capacité de contrainte de cisaillement différentiel de moduler l'adhésion cellulaire monocytaire à cytokine activé monocouches CE est démontrée.

On-Chip phénotypage endothélium inflammatoire

Une plate-forme microcanaux-on-a-chip a été développé par la combinaison de la technique de photolithographie reflowable de résine photosensible, lithographie douce, et la microfluidique. La plate-forme de micro-canaux endothélialisée imite la géométrie en trois dimensions (3D) des microvaisseaux in vivo, fonctionne sous débit de perfusion continue contrôlée, permet l'imagerie de haute qualité et en temps réel et peut être appliqué pour la recherche microvasculaire.

Procédure à suivre pour le développement de la multi-profondeur circulaire transversale endothélialisées microcanaux-on-a-chip

Ce protocole décrit la mise en œuvre de la dégradation de l’hydrogel guidée par l’image, basée sur le laser, pour fabriquer des réseaux microfluidiques biomimétiques dérivés de vaisseaux intégrés dans des hydrogels de poly(éthylène glycol) diacrylate (PEGDA). Ces systèmes microfluidiques biomimétiques peuvent être utiles pour les applications d’ingénierie tissulaire, la génération de modèles de maladies in vitro et la fabrication de dispositifs avancés « sur puce ».

, Fabrication de réseaux microfluidiques vasculaire dérivés à base de laser guidée par l&#39;image

Nous présentons ici un protocole qui décrit la fabrication de canal extensible, double, orgue puce cell culture microfluidiques pour récapitulant les organes au niveau fonctionnalité in vitro.

Fabrication évolutive d’étirable, Dual Channel, puces microfluidiques orgue

Le but de ce protocole est de bioimprimer directement les cellules épithéliales du sein sous forme de sphéroïdes multicellulaires sur les réseaux endothéliales pré-formés pour créer rapidement des modèles de co-culture mammaire-endothéliale 3D qui peuvent être utilisés pour des études de dépistage de médicaments.

Bioimpression directe de sphéroïdes mammaires multicellulaires 3D sur les réseaux endothéliales

Ici, nous fournissons une puce microfluidique et un système microfluidique de circulation automatiquement contrôlé et très efficace qui récapitule le microenvironnement initial de la néovascularisation, permettant aux cellules endothéliales (CE) d'être stimulées simultanément par un stress de cisaillement luminal élevé, un niveau physiologique de flux transendothelial et diverses distributions simultanées du facteur de croissance endothéliale vasculaire (VEGF).

Modèle microfluidique pour imiter l&apos;événement initial de la néovascularisation

Ici, nous présentons un protocole pour générer un modèle de peau tridimensionnel simplifié et indifférencié à l’aide d’une plate-forme microfluidique micro-usinée. Une approche à flux parallèle permet le dépôt in situ d’un compartiment dermique pour l’ensemencement de cellules épithéliales sur le dessus, le tout contrôlé par des pompes à seringues.

Génération d’un modèle tridimensionnel simplifié de peau sur puce dans une plate-forme microfluidique micro-usinée

Le but de ce protocole est d’expliquer et de démontrer le développement d’un modèle microfluidique tridimensionnel (3D) de tissu cardiaque humain fortement aligné, composé de cardiomyocytes dérivés de cellules souches co-cultivés avec des fibroblastes cardiaques (CFs) dans un hydrogel biomimétique et à base de collagène, pour des applications dans l’ingénierie tissulaire cardiaque, le criblage de drogue, et la modélisation de maladie.

Développement de tissu cardiaque humain organisé en 3D au sein d’une plate-forme microfluidique

Le présent protocole décrit les capacités et les modalités de culture essentielles de l’Open-Top Organ-Chip pour l’établissement et la maturation réussis de cultures d’organes sur puce de pleine épaisseur de tissus primaires (peau, alvéole, voies respiratoires et intestin), offrant la possibilité d’étudier différents aspects fonctionnels de l’interface épithéliale/mésenchymateuse et vasculaire humaine in vitro.

Reconstitution de la cytoarchitecture et de la fonction des tissus épithéliaux humains sur une puce organique à sommet ouvert

Les modèles de poumons sur puce surpassent les cultures 2D traditionnelles en imitant l’interface air-liquide et la perfusion de cellules endothéliales, simulant le flux sanguin et l’échange de nutriments essentiels pour les études de physiologie pulmonaire. Cela renforce la pertinence de la recherche pulmonaire, en offrant un environnement dynamique et physiologiquement précis pour faire progresser la compréhension et le traitement des infections respiratoires.

Modèle d’alvéole sur puce immunocompétent pour l’étude des réponses immunitaires de la muqueuse alvéolaire

Nous présentons un protocole pour la production à haut débit de canaux vasculaires avec des tailles flexibles et des motifs souhaités sur une plaque standard à six puits en utilisant la technologie de bio-impression 3D, appelée vaisseaux sur plaque (VOP). Cette plateforme a le potentiel de faire progresser le développement de traitements pour les troubles associés à l’endothélium compromis.

Procédé de bio-impression à haut débit pour modéliser la perméabilité vasculaire dans des plaques standard à six puits avec flexibilité de taille et de motif

Découvrez la modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3D. Cette méthode permet d'étudier les réponses vasculaires et les stratégies thérapeutiques ciblant la santé du glycocalyx.

Modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3D - une approche de fabrication d’un système d’organe sur puce vasculaire (Vidéo) | JoVE Journal

Modélisation du glycocalyx endothélial post-pneumonectomie dans une puce fluidique 3D - une approche de fabrication d’un système d’organe sur puce vasculaire

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